本文主要研究内容
作者申鑫越（2019）在《DkHB4调控‘磨盘柿’果实采后软化的机制研究》一文中研究指出：柿果实采后极易软化,过度或快速的软化不利于采后贮藏,直接影响其流通和商品价值,因此果实软化始终是柿采后研究的重要课题之一。本文以’磨盘柿’(Diospyros kaki.cv.Mopanshi)为实验材料,采用乙烯处理,利用RNA-Seq,通过基因克隆、实时荧光定量PCR、烟草双荧光素酶、酵母双杂交、BiFC等技术体系、亚细胞定位等,鉴别了受乙烯处理诱导的转录因子,并进一步明确其靶标基因,初步探索这些基因之间的作用机制。主要研究结果如下:1.柿果实后熟软化相关基因的克隆与表达分析。依据RNA-Seq结果,筛选得到受乙烯处理诱导的转录因子和结构基因,并利用RACE技术获得了 30个转录因子和13个结构基因的编码基因序列。利用实时荧光定量PCR(Q-PCR),验证了其中27个转录因子和10个结构基因的表达在乙烯处理后快速软化的果实中显著上调。2.响应乙烯处理的转录因子对细胞壁降解相关基因的作用效应分析。通过烟草双荧光素酶体系,鉴别到DkHB4、DkGATA3、DkWRKY12、DkNAC22能显著激活涩柿果实采后软化相关DkXTH9和DkPE9的启动子活性。点突变实验结果表明,DkHB4、DkGATA3、DkWRKY12均能直接结合DkXTH9启动子,DkNAC22能直接结合DkPE9启动子。3.DkB4与DkERFs的协同调控效应分析。进一步选择DkHB4为主要研究对象,分析了它与DkERFs的协同调控效应。烟草双荧光素酶体系研究发现DkHB4与DkERF8、DkERF16和DkERF19 混合,均可显著提升对DkXTH9启动子的诱导效应。酵母双杂交和BiFC实验结果均表明DkHB4与DkERF16存在蛋白互作关系,但DkHB4与DkERF8和DkERF 19并没有直接的蛋白互作关系。综上所述,本论文克隆了受乙烯诱导的’磨盘柿’果实转录因子及细胞壁降解基因,发现了多个调控细胞壁降解基因的转录因子,其中DkHB4既可直接结合DkXTH9的启动子,还可通过与DkERF16蛋白互作协同调控DkXTH9启动子。这些结果进一步丰富了乙烯加速柿果实后熟软化的转录调控机制。
Abstract
shi guo shi cai hou ji yi ruan hua ,guo du huo kuai su de ruan hua bu li yu cai hou zhu cang ,zhi jie ying xiang ji liu tong he shang pin jia zhi ,yin ci guo shi ruan hua shi zhong shi shi cai hou yan jiu de chong yao ke ti zhi yi 。ben wen yi ’mo pan shi ’(Diospyros kaki.cv.Mopanshi)wei shi yan cai liao ,cai yong yi xi chu li ,li yong RNA-Seq,tong guo ji yin ke long 、shi shi ying guang ding liang PCR、yan cao shuang ying guang su mei 、jiao mu shuang za jiao 、BiFCdeng ji shu ti ji 、ya xi bao ding wei deng ,jian bie le shou yi xi chu li you dao de zhuai lu yin zi ,bing jin yi bu ming que ji ba biao ji yin ,chu bu tan suo zhe xie ji yin zhi jian de zuo yong ji zhi 。zhu yao yan jiu jie guo ru xia :1.shi guo shi hou shou ruan hua xiang guan ji yin de ke long yu biao da fen xi 。yi ju RNA-Seqjie guo ,shai shua de dao shou yi xi chu li you dao de zhuai lu yin zi he jie gou ji yin ,bing li yong RACEji shu huo de le 30ge zhuai lu yin zi he 13ge jie gou ji yin de bian ma ji yin xu lie 。li yong shi shi ying guang ding liang PCR(Q-PCR),yan zheng le ji zhong 27ge zhuai lu yin zi he 10ge jie gou ji yin de biao da zai yi xi chu li hou kuai su ruan hua de guo shi zhong xian zhe shang diao 。2.xiang ying yi xi chu li de zhuai lu yin zi dui xi bao bi jiang jie xiang guan ji yin de zuo yong xiao ying fen xi 。tong guo yan cao shuang ying guang su mei ti ji ,jian bie dao DkHB4、DkGATA3、DkWRKY12、DkNAC22neng xian zhe ji huo se shi guo shi cai hou ruan hua xiang guan DkXTH9he DkPE9de qi dong zi huo xing 。dian tu bian shi yan jie guo biao ming ,DkHB4、DkGATA3、DkWRKY12jun neng zhi jie jie ge DkXTH9qi dong zi ,DkNAC22neng zhi jie jie ge DkPE9qi dong zi 。3.DkB4yu DkERFsde xie tong diao kong xiao ying fen xi 。jin yi bu shua ze DkHB4wei zhu yao yan jiu dui xiang ,fen xi le ta yu DkERFsde xie tong diao kong xiao ying 。yan cao shuang ying guang su mei ti ji yan jiu fa xian DkHB4yu DkERF8、DkERF16he DkERF19 hun ge ,jun ke xian zhe di sheng dui DkXTH9qi dong zi de you dao xiao ying 。jiao mu shuang za jiao he BiFCshi yan jie guo jun biao ming DkHB4yu DkERF16cun zai dan bai hu zuo guan ji ,dan DkHB4yu DkERF8he DkERF 19bing mei you zhi jie de dan bai hu zuo guan ji 。zeng shang suo shu ,ben lun wen ke long le shou yi xi you dao de ’mo pan shi ’guo shi zhuai lu yin zi ji xi bao bi jiang jie ji yin ,fa xian le duo ge diao kong xi bao bi jiang jie ji yin de zhuai lu yin zi ,ji zhong DkHB4ji ke zhi jie jie ge DkXTH9de qi dong zi ,hai ke tong guo yu DkERF16dan bai hu zuo xie tong diao kong DkXTH9qi dong zi 。zhe xie jie guo jin yi bu feng fu le yi xi jia su shi guo shi hou shou ruan hua de zhuai lu diao kong ji zhi 。
论文参考文献
论文详细介绍
论文作者分别是来自浙江大学的申鑫越，发表于刊物浙江大学2019-05-20论文，是一篇关于柿果实论文,乙烯论文,后熟软化论文,转录调控论文,浙江大学2019-05-20论文的文章。本文可供学术参考使用，各位学者可以免费参考阅读下载，文章观点不代表本站观点，资料来自浙江大学2019-05-20论文网站，若本站收录的文献无意侵犯了您的著作版权，请联系我们删除。
标签：柿果实论文; 乙烯论文; 后熟软化论文; 转录调控论文; 浙江大学2019-05-20论文;