论文摘要
目的 建立树鼩的实验室内人工繁殖和育幼的方法和条件,并在此基础上探讨用围生期和幼年树鼩接种人乙型肝炎病毒(HBV)来提高树鼩对HBV的感染效率,并通过提高树鼩感染HBV指标的检测方法的敏感性与可靠性,优化树鼩感染HBV实验动物模型。 方法 第一部分:①成年雄雌树鼩按1:1或1:2配对,根据动物间的适应和受孕情况调整成相对固定的繁殖对。给所有动物建立档案,记录树鼩的生产情况,计算母树鼩的总产仔数、平均年产仔数及平均每次妊娠的合笼天数。记录仔动物的每日体重、进食量和健康情况。②随机选取雄性成年树鼩和上一年内无生产史的雌性成年树鼩分成两组,A组:雌性动物肌注氯前列烯醇钠,10ug/只,10天后重复1次;雄性动物不作处理,一直与雌性合笼。B组:雌性动物处理同A组;雄性动物则先与雌性分笼,在雌性第2次用药时予雄性肌注孕马血清,10U/只,给药后即与雌性合笼。比较两组动物用药后的生产情况。③对仔树鼩用两种方法进行人工喂养,即单纯配方乳喂养和被动母乳联合配方乳喂养,比较两种喂养方法的仔树鼩生长情况。第二部分:用人的HBV阳性血清感染围生期和幼年树鼩,其中围生期感染包括对新生树鼩直接接种和通过对妊娠晚期母树鼩接种来垂直感染仔树鼩。对感染后的仔树鼩进行以下检测:①用Enzyme-Lined Immunosorbent Assay (ELISA)法检测血清标本的HBsAg、HBeAg及抗-HBc;②用巢式PCR (nested Polymerase Chain Reaction,nPCR)检测活检肝组织标本的HBV DNA;③用nPCR检测血清标本的HBV DNA;④对nPCR扩增出的HBV片段进行测序验证;⑤用常规HE染色切片来观察活检肝组织中的病理组织学改变。 结果 第一部分:①16个月的观察期内35只母树鼩共产仔147窝、400只。每只母树鼩平均年产仔3.2窝、8.7只,平均每次妊娠的合笼天数为68±32。400只仔树鼩中死胎95只(23.8%),被母树鼩产后吃或咬伤致死83只(20.8%),生后因个小、体弱等原因夭折16只(4.0%),健康活产206只
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