增生性瘢痕与正常角质形成细胞蛋白质的差异表达研究

论文摘要

瘢痕是创伤修复的必然产物,各种原因造成的皮肤伤口愈合后病理性瘢痕的发生率为5%-15%,可以说是一种常见的病理性损害,也是整形外科最常见的疾病。病理性瘢痕的发病机理目前仍不十分清楚且缺乏理想的防治方法。以往对于瘢痕的研究主要以成纤维细胞为中心,集中在受伤早期成纤维细胞被激活机理的探讨,关于伤口愈合之后对成纤维细胞起抑制作用的因素的来源与机理研究甚少。临床上的一些现象和最近的一些实验研究结果提示:表皮细胞特别是角质形成细胞,很有可能在伤口愈合之后,成纤维细胞由激活转入抑制状态过程中,发挥着重要的作用。而这些作用的行使则是通过角质形成细胞合成和分泌的蛋白质分子来完成的,因此寻找这些蛋白质分子成为我们研究的主要目的。 蛋白质组学是继基因组学之后基础研究中最重要的研究领域之一。目前蛋白质组研究主要方法就是利用双向聚丙烯酰胺凝胶电泳来进行高通量的蛋白质组分分离,并利用专门的计算机软件对所得的图象进行数据采集和分析,然后采用氨基酸组成分析、微量蛋白质序列分析、质谱分析等技术将从胶上回收的蛋白质斑点进行鉴定,获得蛋白质性质、表达及翻译后修饰等方面的信息。这些研究方法为本课题的研究提供了重要的研究手段。

论文目录

• 缩略语表
• 中文摘要
• 英文摘要
• 前言与文献回顾
• 一、角质形成细胞在瘢痕形成中的作用
• 二、蛋白质组研究的进展
• 三、蛋白质组学与角质形成细胞
• 正文
• 实验一 表皮角质细胞的分离及蛋白质的提取
• 1 试剂与仪器
• 2 方法
• 3 结果和讨论
• 实验二 增生性瘢痕表皮角质细胞蛋白质的2-D过程
• 1 表皮细胞蛋白质的提取
• 2 第一向等电聚焦电泳（IEF）
• 3 第二向聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）
• 4 银染
• 实验三 凝胶图像采集、分析及差异蛋白质的比较
• 1 仪器与软件
• 2 方法
• 3 结果与讨论
• 实验四、差异蛋白的质谱分析
• 1 仪器与试剂
• 2 蛋白质原位酶解
• 3 MALDI-TOF肽质量指纹图
• 4 蛋白质鉴定数据库搜寻
• 5 结果与讨论
• 小结
• 参考文献
• 附图
• 个人简历和研究成果
• 致谢