针刺干预脑缺血再灌注损伤大鼠海马神经细胞[Ca～（2+）]i变化的信号传导机制的实验研究

论文题目: 针刺干预脑缺血再灌注损伤大鼠海马神经细胞[Ca～（2+）]i变化的信号传导机制的实验研究

论文类型: 博士论文

论文专业: 针灸推拿学

作者: 姜文

导师: 石学敏,王舒

关键词: 局灶性脑缺血再灌注损伤,海马神经细胞,钙超载,信号传导,激光扫描共聚焦显微镜,醒脑开窍,针刺方法

文献来源: 天津中医学院

发表年度: 2005

论文摘要: 目的: 研究局灶性脑缺血再灌注损伤大鼠神经细胞胞内Ca2+的信息传导机制及醒脑开窍针刺方法对神经细胞[Ca2+]i变化的信息调控作用机理。方法: 1.健康SD大鼠随机分为6组:正常组、假手术组、模型组、非穴位针刺组,传统穴位针刺组,醒脑开窍针刺组;后四个组内分设缺血1h,缺血1h再灌注1h、3h、6h、12h、24h共计6个时间观察点,线栓法建立大鼠大脑中动脉缺血再灌注（MCAO）模型。三个针刺组均通以电针刺激10min。分别在相应的时间点取材,制备活体海马脑片,采用激光共聚焦扫描显微技术动态观察脑组织海马CA1区神经细胞[Ca2+]i在不同时间点的变化。 2.制备脑组织石蜡切片,HE染色光镜下动态观察大鼠海马组织形态学及神经细胞病理改变。 3.大鼠左侧侧脑室分别定位注射neomycin、heparin、dantrolene、thapsigargin（TG）、carbonyl cyanide 3-chlorophenylhydrazone（CCCP）,20min后制备MCAO模型,针刺方法同上。在大鼠缺血再灌注6h时取材,制备活体海马脑片,观察[Ca2+]i的变化。结果: 1.与正常组大鼠相比,模型组大鼠脑组织海马CA1神经细胞内游离Ca2+浓度([Ca2+]i,以细胞内Ca2+相对荧光强度表示)在局灶性脑缺血1h时升高,缺血1h再灌注1h、3h后继续增高;缺血再灌注6h时[Ca2+]i达到最高峰,12h时下降;24h时出现再次增高,但是低于最高值（6h时）（P<0.05）。假手术组与正常组相比,[Ca2+]i变化无显著性差异（P>0.05）。相应时间点非穴位针刺组与模型组比较,[Ca2+]i无显著变化（P>0.05）。在相应时间点,传统针刺组和醒脑开窍针刺组[Ca2+]i都低于模型组（P<0.05,P<0.01）,与传统针刺组相比,醒脑开窍针刺组更具有显著差异（P<0.05）。 2.HE染色光镜下观察海马组织及神经细胞改变,正常组及假手术组组织形态结构正常,神经细胞数量正常,结构清晰,分布均匀,神经细胞无坏死和损伤;缺血1h和缺血1h再灌注1h、3h时海马区神经细胞无明显变化;再灌注6h海马区出

论文目录:

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英文缩略语表

前言

综述一 Ca~(2+)信号传导在脑缺血再灌注损伤中的作用与调控机理初探

一、神经系统中细胞内钙的平衡机制及其调节

二、脑缺血再灌注损伤后Ca~(2+)的变化

三、钙超载与脑缺血再灌注损伤的关系

四、脑缺血再灌注损伤时细胞内Ca~(2+)升高的机制

综述二针刺治疗脑缺血再灌注损伤作用机理的研究进展

一、清除自由基

二、降低中枢系统兴奋性氨基酸的含量

三、调节细胞内钙稳态

四、调节缺血区脑组织的能量代谢

五、抑制缺血区神经细胞凋亡

六、展望

研究思路与技术路线

一、研究思路

二、技术路线

实验研究

第一部分针刺对大鼠局灶性脑缺血再灌注后不同时间点海马神经细胞[Ca~(2+)]i变化的调节作用

材料与方法

结果与分析

第二部分针刺对局灶性脑缺血再灌注大鼠脑组织形态学的影响

材料与方法

结果与分析

第三部分局灶性脑缺血再灌注损伤时大鼠海马神经细胞胞内钙库对[Ca~(2+)]i变化的调控机制及针刺对其调节作用

材料与方法

结果与分析

讨论

一、中医对中风病的认识

二、醒脑开窍针刺法的立法依据

三、关于动物模型的评价

四、激光共聚焦显微技术在医学研究中的应用

五、钙信号在神经细胞内的产生及调控机制

六、脑缺血再灌注后不同时间点神经细胞[Ca~(2+)]i变化及针刺的干预作用

七、针刺调节海马神经细胞[Ca~(2+)]i信号的可能机制

八、神经细胞钙信号传导与经络功能之间的关系

小结

参考文献

致谢

发布时间: 2005-09-15

针刺干预脑缺血再灌注损伤大鼠海马神经细胞[Ca～（2+）]i变化的信号传导机制的实验研究

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