免疫增强剂及疫苗对刺参（Apostichopus japonicus）免疫酶活性及抗病力影响的初步研究

论文摘要

本文主要研究了口服不同剂量免疫增强剂海藻硫酸多糖或壳聚糖及不同浓度C6或TB福尔马林灭活全细胞疫苗对刺参的免疫酶活性及抗病力的影响。在基础饲料中分别添加0.25%(质量比)海藻硫酸多糖、0.5%海藻硫酸多糖、1.0%海藻硫酸多糖,0.5%壳聚糖、1.0%壳聚糖、2.0%壳聚糖,1×107CFU/mLC6疫苗、1×108CFU/mLC6疫苗、1×109CFU/mLC6疫苗,1×107CFU/mLTB疫苗、1×108CFU/mLTB疫苗、1×109CFU/mLTB疫苗,分别于投喂7日后第2、5、9和15日检测酸性磷酸酶(ACP)、碱性磷酸酶(AKP)、溶菌酶(LSZ)与超氧化物歧化酶(SOD)活性;第16日用1.4×108 CFU/mL C6进行攻毒实验,观察测定其免疫保护率(RPS)。多糖免疫增强剂实验结果表明,投喂后15日内,各实验组ACP、AKP活性均持续升高,与对照组具有显著性差异(P<0.05),其中1.0%海藻硫酸多糖组与2.0%壳聚糖组效果最佳,酶活最高分别是对照组的3倍、3.9倍以及2.3倍、4.4倍;LSZ活性则先升高后降低,最高时与对照组具有显著性差异(P<0.05),且LSZ活性与免疫多糖添加量不成正比关系,0.5%海藻硫酸多糖组与1.0%壳聚糖组效果最佳,酶活最高分别是对照组的1.3倍、3.4倍;SOD活性均在第2日显著升高,短暂升高后逐渐降低趋于对照,效果最佳的是1.0%海藻硫酸多糖组、2.0%壳聚糖组,且酶活最高分别是对照组的1.7倍、2.1倍。攻毒实验结果证实各实验组均产生了一定的免疫保护率,且与免疫增加剂添加浓度成正比,其中1.0%海藻硫酸多糖组与2.0%壳聚糖组效果最佳,免疫保护率分别为30.4%、39.1%。研究结果表明,海藻硫酸多糖和壳聚糖作为天然免疫多糖,可以积极调理刺参免疫机能,可用于刺参病害防治,建议其适宜添加量分别为1.0%、2.0%。疫苗实验结果表明,投喂后15日内,各实验组ACP、AKP、LSZ活性均持续升高,且随疫苗浓度升高而升高幅度增大,与对照组具有显著性差异(P<0.05),其中1×109CFU/mLC6疫苗组与1×109CFU/mLTB疫苗组效果最佳,酶活最高分别是对照组的1.9倍、1.6倍;2.9倍、1.9倍以及2.3倍、1.5倍;SOD活性均呈现逐渐升高然后在第15日逐渐趋于平稳,且随着疫苗浓度升高效果较明显,但差异均不显著(P>0.05),1×109CFU/mLC6疫苗组与1×109CFU/mLTB疫苗组SOD活性最高分别是对照组的1.2倍、1.1倍。攻毒实验结果证实各实验组均产生了一定的免疫保护率,且与添加浓度成正比,其中1×109CFU/mLC6疫苗组与1×109CFU/mLTB疫苗组效果最佳,免疫保护率最大分别为50%、36.4%。研究结果表明,C6及TB灭活疫苗,可以积极调理刺参免疫机能,可用于刺参病害防治,建议其适宜免疫口服浓度为1×109CFU/mL。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 前言
• 第一章 综述
• 1 棘皮动物免疫系统研究进展
• 1.1 细胞免疫
• 1.1.1 体腔细胞类型
• 1.1.2 体腔细胞免疫功能
• 1.2 体液免疫
• 1.2.1 凝集素
• 1.2.2 溶血素
• 1.2.3 氧化酶
• 1.2.4 酚氧化酶
• 1.2.5 类白介素
• 1.2.6 类补体样因子
• 1.3 关于特异性免疫的探讨
• 1.4 发展前景及研究展望
• 2 水产动物免疫增强剂的研究现状
• 2.1 水产动物免疫增强剂的应用现状
• 2.1.1 多糖类
• 2.1.2 维生素
• 2.1.3 中草药
• 2.1.4 微生态制剂
• 2.1.5 化学合成类
• 2.2 影响免疫增强剂作用效果的因素
• 2.2.1 免疫增强剂的使用方法
• 2.2.2 免疫增强剂的给予时间与剂量
• 2.3 免疫增强剂的前景展望
• 3 水产疫苗研究的现状及发展前景
• 3.1 水产疫苗的发展过程
• 3.2 疫苗的种类
• 3.2.1 传统型疫苗
• 3.2.2 新型疫苗
• 3.3 水产疫苗的接种方法
• 3.3.1 注射法
• 3.3.2 浸泡法与喷雾法
• 3.3.3 口服法
• 3.4 水产疫苗存在的问题
• 3.5 水产疫苗的发展前景
• 4 本文研究目的及意义
• 第二章 两种免疫多糖对刺参组织主要免疫酶活性及抗病力的影响
• 1 材料与方法
• 1.1 实验材料
• 1.1.1 实验药品
• 1.1.2 实验仪器
• 1.2 实验方法
• 1.2.1 养殖管理
• 1.2.2 实验设计及投喂
• 1.2.3 刺参组织匀浆液制备
• 1.2.4 免疫指标的测定
• 1.2.5 蛋白含量的测定
• 1.2.6 攻毒实验
• 1.3 数据分析
• 2 实验结果与分析
• 2.1 两种免疫多糖对刺参免疫酶活性的影响
• 2.1.1 两种免疫多糖对刺参ACP 活性的影响
• 2.1.2 两种免疫多糖对刺参AKP 活性的影响
• 2.1.3 两种免疫多糖对刺参LSZ 活性的影响
• 2.1.4 两种免疫多糖对刺参SOD 活性的影响
• 2.2 免疫保护率
• 3 讨论
• 3.1 两种免疫多糖对刺参免疫酶活性的影响
• 3.2 两种免疫多糖对刺参的免疫保护作用
• 4 结论
• 第三章 两种灭活疫苗对刺参组织主要免疫酶活性及抗病力的影响
• 1 材料与方法
• 1.1 实验材料
• 1.1.1 菌种
• 1.1.2 培养基
• 1.1.3 实验仪器
• 1.2 实验方法
• 1.2.1 养殖管理
• 1.2.2 疫苗制备
• 1.2.3 实验分组与疫苗投喂
• 1.2.4 刺参组织匀浆液制备
• 1.2.5 免疫指标的测定
• 1.2.6 蛋白含量的测定
• 1.2.7 攻毒实验
• 1.3 数据分析
• 2 实验结果与分析
• 2.1 疫苗的无菌检验及安全性检验
• 2.2 两种灭活疫苗对刺参免疫酶活性的影响
• 2.2.1 两种灭活疫苗对刺参ACP 活性的影响
• 2.2.2 两种灭活疫苗对刺参AKP 活性的影响
• 2.2.3 两种灭活疫苗对刺参LSZ 活性的影响
• 2.2.4 两种灭活疫苗对刺参SOD 活性的影响
• 2.3 免疫保护率的测定与分析
• 3 讨论
• 3.1 两种灭活疫苗对刺参免疫酶活性的影响
• 3.2 两种灭活疫苗对刺参的免疫保护作用
• 4 结论
• 参考文献
• 致谢
• 个人简历及在校期间发表学术论文