培美曲塞时辰给药治疗肿瘤的基础研究

论文摘要

目的：构建肺腺癌A549细胞的裸鼠皮下移植瘤模型，研究按昼夜的不同时辰给予培美曲塞是否可以提高疗效和降低副作用；筛选能预测培美曲塞的疗效和副作用的生物学指标。方法：肺腺癌A549细胞系用含有10%的肽牛血清的高糖DMEM培养基在37℃5%CO2条件下培养。使用20只BLAB/c的裸鼠作为实验动物。饲养条件：SPF级实验动物房，统一光照条件下,光照时间（7:00-19:00），黑暗时间（19:00-7:00）温度控制在22℃-24℃，湿度控制在30%-50%，每周更换无菌垫料两次和无菌笼具一次。常规方法体外培养肺腺癌A549细胞，收集对数生长期的肺腺癌细胞，调整细胞悬液浓度至2×107/ml，皮下注射约0.2ml细胞悬液，接种后4天肉眼可见肿瘤生长，动物模型建立成功。待肿瘤生长至0.5至1.5cm3，随机将荷瘤鼠分为4组，每组5只，其中3组严格按照每昼夜的三个时辰7h、15h和23h进行腹腔给药，第4组为对照组，腹腔给予同样体积的生理盐水。培美曲塞按照150mg/kg给予，每天一次，连续4天。以给药的当天算起，以后每周测量瘤体积和裸鼠的体重，绘制瘤体的生长曲线和体重生长曲线，观察小鼠的生存质量。第35天断颈处死小鼠，剥离肿瘤，称重瘤，计算抑瘤率,应用实时荧光定量PCR（Real Time-PCR）检测20只小鼠的肿瘤组织中的TS mRNA和TP mRNA的表达水平。结果：培美曲塞对肺腺癌裸鼠移植瘤有疗效（P<0.05）,其中7h组抑瘤率最大（P<0.01），瘤体积生长最慢（P<0.05），体重增长较快（P<0.05），15h组抑瘤率最小（P<0.01），瘤体积生长最快（P<0.05），体重增长较慢（P<0.05），7h给药组的肿瘤组织中TS mRNA相对表达量最低，TP mRNA相对表达量最高，差异有统计学意义（P<0.01），结论：培美曲塞对肺腺癌移植瘤裸鼠有明显的抑制作用且疗效及毒副作用呈现时辰节律变化，7h组疗效最佳，15h组疗效最差。初步认为TS和TP可以作为预测培美曲塞副作用及疗效的生物学标志物，为培美曲塞的合理化和个体化的临床应用提供了参考。

论文目录

• 中文摘要
• Abstract
• 前言
• 资料与方法
• 结果
• 讨论
• 结论
• 参考文献
• 致谢
• 附录 A：附图
• 附录 B：英汉文对译
• 附录 C：综述
• 参考文献