IL-10对树突状细胞分化及其功能的影响

论文摘要

在SLE患者体内树突状细胞（dendritic cell,DC）的研究中发现,非成熟DC更加有效的提呈抗原,成熟DC高表达MHC分子与T细胞相互作用,表现了不同的作用和在诱发疾病中的协同配合。DC对细胞因子介导的活化敏感,SLE患者血清中异常升高的成份可以诱导DC及其前体细胞产生促炎性因子,活化T/B细胞,促使T/B细胞引起自身免疫的发生,导致了SLE患者对自身抗原的反应和持续产生大量自身抗体。本课题希望从SLE患者血清及其对产生DC的影响上来部分阐述SLE的发病机制。本实验主要是针对高IL-10 SLE患者血清对单核细胞和造血干细胞来源的DC的影响进行研究。本实验用ELISA法检测SLE患者和正常人血清中的IL-10、IL-6、IFN-α,以筛选高IL-10 SLE患者血清。同时检测部分病人的抗dsDNA抗体、补体（C3、C4）和24小时尿蛋白。应用GM-CSF+IL-4+TNF-α体系诱导培养DC,在该体系中加入外源性IL-10（30pg/ml）。根据ELISA法检测到的IL-10、IL-6、IFN-α浓度,选择单独IL-10增高的SLE患者血清参与诱导脐血CD34+造血干细胞分化为DC。用流式细胞术检测DC的表型和DC刺激的活化T细胞胞内细胞因子,CCK-8法检测DC刺激同种异体T淋巴细胞增殖能力,ELISA法检测DC分泌细胞因子水平、与DC共培养的T细胞分泌细胞因子的水平。结果发现,以超过正常人IL-10浓度95%参考值范围为IL-10异常增高标准（＞8.12pg/ml）,则在收集的94例SLE患者中50例IL-10浓度增高,占整个SLE患者的53.20%。将这50例血清的浓度进行分析得到IL-10平均浓度为33.77±41.94pg/ml,其中有16份血清仅表现IL-10异常增高,IL-6、IFN-α均在正常范围内。故选择外源性IL-10的实验浓度为30pg/ml。当应用GM-CSF+IL-4+TNF-α诱导培养DC时,如加入外源性IL-10 30pg/ml作为实验观察因素,与正常诱导DC相比,所诱导的DC HLA-DR、CD86、CD80、CD83的表达阳性率均下降并具有统计学意义;对其刺激同种异体淋巴细胞增殖能力的研究结果显示,刺激细胞:效应细胞为1:10比例组中IL-10浓度为30pg/ml的诱导组诱导的DC刺激淋巴细胞增殖的能力显著降低;该种DC分泌细胞因子的水平有变化,表现有高分泌IL-10,低分泌IL-12p40和IFN-γ的趋势。然而,在高IL-10的SLE患者血清参与诱导干细胞来源的DC的实验中,DC的表型、刺激同种异体T淋巴细胞增殖和分化的能力、DC分泌IL-12p40、IL-10、IFN-γ水平,并未显示出与常规诱导培养的DC统计学的差异。以上实验结果证实,30pg/ml的外源性IL-10可使单核细胞来源的DC的MHC-Ⅱ类分子和共刺激分子的表达以及JL-12p40和IFN-γ的分泌水平受到抑制,并使其刺激同种异体T细胞增殖能力下降。但是IL-10异常增高的SLE患者血清在诱导CD34+造血干细胞分化发育为DC时由于作用的细胞不同、SLE患者血清中存在IL-6、IFN-α以外的其它复杂因素的影响,并不能相同地呈现明显抑制作用。总之,IL-10在SLE发病机制中起到了重要作用,但是如协同作用的因素不同及作用的细胞不同,可能得到不同的结果。

论文目录

• 中文摘要
• 英文摘要
• 引言
• 第一部分:外源性IL-10对单核细胞定向分化为树突状细胞的影响
• 前言
• 材料与方法
• 结果
• 讨论
• 第二部分:IL-10异常升高的SLE患者血清对造血干细胞分化为树突状细胞表型和功能的影响
• 前言
• 材料与方法
• 结果
• 讨论
• 小结
• 参考文献
• 致谢
• 综述及参考文献