大肠杆菌内毒素对小鼠繁殖机能及肝脏部分生化指标影响

论文摘要

【目的】:研究资料表明,LPS对动物对动物的生殖发育过程有不利影响,它能造成动物以及人的卵泡发育受阻、排卵数减少、胚胎发育停滞、早期胚胎流失、流产、早产等问题。目前国内外关于LPS对胚胎附植的影响的研究还较少,本实验主要目的是研究LPS对小鼠胚胎附植以及体外受精-胚胎发育的影响;同时也观察了LPS对小鼠的卵泡发育、排卵数的影响;并对小鼠血液中的内毒的浓度进行了检测,结合部分肝脏生化指标的变化进一步了解LPS对小鼠繁殖机能影响的可能性以及严重程度。【方法及结果】:1)卵泡发育及排卵试验:3-4周龄昆明系小鼠,体重16-19g,分成4个组,其中一个对照组,3个试验组,每组7只。分别给试验小鼠腹腔注射12mg/kg、8mg/kg、4mg/kg LPS并利用PMSG-HCG做同期发情、超数排卵处理;对照组则用无菌生理盐水代替LPS,其他处理相同。卵泡发育试验在腹腔注射PMSG48h后处死采取卵巢制作组织切片并观察;排卵试验则在腹腔注射HCG后14-16h处死,从输卵管壶腹部分离出卵丘卵母细胞复合物,对排卵进行计数。试验发现,与正常对照组相比,试验组小鼠卵泡发育情况以及排卵数并没显著差异。2)LPS对小鼠IVF以胚胎附植的影响:1ng/ml的LPS浓度分别加入到精子获能液、体外受精液、胚胎培养液中并没对受精率、胚胎发育率、胚胎速度以及发育形态产生显著影响;在妊娠0.5D或者4.5D,或者0.5-2.5D连续给药,给药量在1.5mg/kg以内时成年雌性小鼠子宫角内的胚胎数没有受到显著抑制,但存在较大的个体差异。3)小鼠血液中毒素的检测及部分肝脏生化指标的测定:试验分7个组,其中两个对照组（6h和72h对照）和5个试验组（6h,12h,24h,48h,72h组）,对照组腹腔注射无热源生理盐水、试验组给予4mg/kgLPS。各组分别在各自的时间段采血处死,并取肝脏做组织匀浆测生化指标。试验发现在腹腔注射4mg/kgLPS后12h小鼠血液中的LPS浓度达到高峰,此后迅速下降,48h后达到最低值。并且显著低于生理盐水对照组（P＜0.05）。随着血液中LPS浓度的变化,试验中还观察到肝脏中GOT、GPT在6-12h内降低到最低值（P＜0.05,P＜0.01）;自由基NO在12h时的含量与对照组相比显著升高（P＜0.01）,SOD、MDA的变化也体现了肝脏受损的迹象,在自由基升高的同时,超氧化物歧化酶活力降低（P＜0.01）,而MDA含量则显著升高。【结论】:本研究可得出以下结论:055:B5LPS能造成机体毒效反应和肝脏的损伤,但未能证实对小鼠卵泡发育、排卵以及胚胎附植产生明显毒性影响。

论文目录

• 中文摘要
• Abstract
• 第一章 文献综述
• 1 内毒素
• 2 内毒素对雌性动物繁殖机能的影响
• 2.1 内毒素对卵泡发育及排卵的影响
• 2.2 内毒素与胚胎附植，发育的影响
• 3 作用机理
• 3.1 内毒素与细胞因子
• 3.2 雌性生殖与细胞因子
• 4 研究目的与意义
• 第二章 大肠杆菌O55:B5血清型LPS对小鼠卵泡发育及排卵机能的影响
• 1 材料与方法
• 1.1 试验材料
• 1.2 试验方法
• 1.3 结果统计
• 2 结果
• 2.1 小鼠对LPS的临床反应
• 2.2 LPS对小鼠卵泡发育的影响
• 2.3 LPS对小鼠排卵的影响
• 3 讨论
• 4 小结
• 第三章 大肠杆菌O55:B5血清型LPS对昆明系小白鼠IVF及胚胎附植的影响
• 1 材料和方法
• 1.1 试验材料
• 1.2 试验方法
• 2 结果
• 2.1 大肠杆菌O55:B5型内毒素对小鼠体外受精及胚胎发育的影响
• 2.2 大肠杆菌O55:B5型内毒素对小鼠体胚胎附植的影响结果
• 3 讨论
• 3.1 大肠杆菌O55:B5型内毒素对小鼠体外受精及胚胎发育的影响
• 3.2 大肠杆菌O55:B5型内毒素对小鼠体胚胎附植的影响结果
• 第四章 小鼠血液内毒素的定量检测及其对肝脏部分生化指标的影响
• 1 材料与方法
• 1.1 试验材料
• 1.2 试验方法
• 2 结果与分析
• 2.1 雌性小鼠血液内毒素浓度定量检测
• 2.2 肝脏组织匀浆中AST、ALT的检测
• 2.3 肝脏组织匀浆中NO、SOD及MDA的检测
• 3 讨论
• 3.1 雌性小鼠体内内毒素降解速度定量检测
• 3.2 肝脏组织匀浆中AST，ALT的检测
• 3.3 肝脏组织匀浆中NO、SOD及MDA的检测
• 4 小结
• 参考文献
• 附件
• 致谢
• 作者简介