添加物对热带假丝酵母APV.12发酵产辅酶Q10的影响

论文摘要

辅酶Q10,一类脂溶性醌类化合物,以极低的含量广泛存在于动物、植物、微生物等细胞内。作为呼吸链中的递氢体,在生物体中具有重要的生理功能,是细胞内天然抗氧化剂,细胞代谢的激活剂,并能够提高机体免疫力,在临床中有着广泛的用途。目前,辅酶Q10普遍比较低下,而微生物发酵法是生产辅酶Q10最有希望实现工业化的生产方法,论文以热带假丝酵母（Candida tropicalis）APV.12为发酵菌种,研究了发酵添加物对菌体形成辅酶Q10的影响,确定并优化了提取方案,主要结果如下;1.研究了细胞破碎方法,确定了冻融酶解破壁法破壁;比较了常用的几种提取方法,确定溶剂萃取法提取辅酶Q10,并对溶剂萃取法进行了优化,最终辅酶Q10的得率为17.5mg/L,比优化前提高了31.6%。2.研究了热带假丝酵母的生长曲线,确定了辅酶Q10的发酵条件;培养温度30℃,初始pH6.0,接种量6%,发酵时间50h。3.研究了添加物对热带假丝酵母形成辅酶Q10的影响,结果表明,烟叶、胡萝卜汁、番茄汁、豆油、对羟基苯甲酸、甲硫氨酸、苯丙氨酸、半胱氨酸、维生素B2这些物质均可以促进菌体形成辅酶Q10,特别是胡萝卜汁、烟叶和羟基苯甲酸分别比对照组提高了43.5%、31.4%和29.3%。4.运用SAS响应面分析软件重点研究了烟叶、对羟基苯甲酸、胡萝卜汁三者复合添加对菌体形成辅酶Q10的影响,结果为;在100mL培养基中添加0.085g对羟基苯甲酸、11mL胡萝卜汁、0.21g烟叶,最终辅酶Q10含量达到24.9mg/L,比未添加任何物质的空白对照提高了48.6%,但三者之间没有显著的交互作用。

论文目录

• 摘要
• ABSTRACT
• 第1章 绪论
• 10的理化性质'>1.1 辅酶Q₁₀的理化性质
• 1.1.1 物理性质
• 1.1.2 化学性质
• 10的生理功能'>1.1.3 辅酶Q₁₀的生理功能
• 10的主要生产方法及其现状'>1.2 辅酶Q₁₀的主要生产方法及其现状
• 1.2.1 化学合成法
• 1.2.2 生物组织提取法
• 1.2.3 微生物发酵法
• 10的研究进展'>1.3 微生物法生产辅酶Q₁₀的研究进展
• 10'>1.3.1 微生物直接发酵生产辅酶Q₁₀
• 10的生物体内的合成途径'>1.3.2 辅酶Q₁₀的生物体内的合成途径
• 10工程菌研究进展'>1.3.3 辅酶Q₁₀工程菌研究进展
• 10'>1.3.4 微生物转化法生产辅酶Q₁₀
• 10提取和测定研究'>1.4 辅酶Q₁₀提取和测定研究
• 10的提取'>1.4.1 辅酶Q₁₀的提取
• 10的鉴定'>1.4.2 辅酶Q₁₀的鉴定
• 1.5 本课题研究的意义与研究内容
• 10提取方法的研究'>第2章 热带假丝酵母细胞辅酶Q₁₀提取方法的研究
• 2.1 引言
• 2.2 实验材料
• 2.2.1 菌种
• 2.2.2 培养基
• 2.2.3 实验试剂及仪器
• 2.3 实验方法
• 2.3.1 热带假丝酵母菌体细胞的制备
• 2.3.2 细胞破碎方法的选择
• 10的提取方法的选择'>2.3.3 辅酶Q₁₀的提取方法的选择
• 10方法的优化'>2.3.4 溶剂萃取法提取辅酶Q₁₀方法的优化
• 10的检测;紫外分光光度法'>2.3.5 辅酶Q₁₀的检测;紫外分光光度法
• 2.4 结果与分析
• 10的标准曲线'>2.4.1 辅酶Q₁₀的标准曲线
• 2.4.2 热带假丝酵母细胞破碎方法的确定
• 10提取方法的确定'>2.4.3 辅酶Q₁₀提取方法的确定
• 10条件的优化'>2.4.4 溶剂萃取法提取辅酶Q₁₀条件的优化
• 2.5 本章小结
• 10发酵条件的研究'>第3章 热带假丝酵母APV.12产辅酶Q₁₀发酵条件的研究
• 3.1 引言
• 3.2 实验材料与方法
• 3.2.1 菌种
• 3.2.2 培养基
• 3.2.3 实验试剂及仪器
• 3.2.4 实验方法
• 3.3 结果与分析
• 3.3.1 葡萄糖标准曲线
• 10发酵条件的研究'>3.3.2 产辅酶Q₁₀发酵条件的研究
• 3.4 本章小结
• 10的影响'>第4章 添加物对热带假丝酵母APV.12产辅酶Q₁₀的影响
• 4.1 引言
• 4.2 实验材料与方法
• 4.2.1 菌种
• 4.2.2 材料
• 4.2.3 主要试剂及仪器
• 4.2.4 培养基
• 4.2.5 实验方法
• 4.3 结果与分析
• 10的影响'>4.3.1 天然添加物质对热带假丝酵母APV.12合成辅酶Q₁₀的影响
• 10的影响'>4.3.2 中间前体物质对热带假丝酵母APV.12合成辅酶Q₁₀的影响
• 10的影响'>4.3.3 其它促进剂对热带假丝酵母APV.12合成辅酶Q₁₀的影响
• 10的影响'>4.3.4 不同添加物对热带假丝酵母APV.12合成辅酶Q₁₀的影响
• 4.4 本章小结
• 10的研究'>第5章 复合添加物对假丝酵母APV.12产辅酶Q₁₀的研究
• 5.1 引言
• 5.2 实验材料与方法
• 5.2.1 菌种
• 5.2.2 主要试剂及仪器
• 5.2.3 培养基
• 5.2.4 实验方法
• 5.3 结果与分析
• 10的影响'>5.3.1 添加时间对热带假丝酵母APV.12产辅酶Q₁₀的影响
• 5.3.2 Box-Behnken设计响应面分析
• 5.3.3 回归模型的建立及方差分析
• 5.3.4 回归方程的确定
• 5.3.5 方差模型可靠性实验验证
• 5.4 本章小结
• 第6章 结论与展望
• 10的研究'>6.1 热带假丝酵母提取辅酶Q₁₀的研究
• 6.2 热带假丝酵母APV.12发酵条件的研究
• 10形成的影响'>6.3 不同添加物对辅酶Q₁₀形成的影响
• 6.4 三种添加物复合添加效果的研究
• 6.5 展望
• 致谢
• 参考文献
• 附录 缩略语表
• 攻读学位期间的研究成果