人泪腺ACC的发病与转移机制及125I粒子植入的实验研究

论文摘要

目的1检测人泪腺腺样囊性癌（ACC）组织中微血管密度（MVD）、血管内皮生长因子（VEGF）、增殖细胞核抗原（PCNA）、基质金属蛋白酶-2（MMP-2）及基质金属蛋白酶-9（MMP-9）的表达，并观察其与泪腺ACC组织生物学行为之间的关系，以及彼此的相关性。2探讨125I粒子组织间植入对裸鼠移植性ACC的治疗效果，对外周血的影响，对癌细胞增殖、血管生成及转移因子的影响，以及粒子放射活度与疗效的关系，为临床125I粒子组织间植入治疗泪腺ACC提供实验依据。3利用透射电镜观察距离125I粒子不同距离肿瘤细胞凋亡坏死的情况，明确不同放射活度125I对肿瘤的有效治疗半径，为临床设计应用125I粒子植入方案提供参考依据。方法1应用免疫组化SP法检测60例泪腺ACC患者手术标本和10例正常泪腺组织中CD105、VEGF、PCNA、MMP-2及MMP-9的表达。采用CD105免疫组化染色标记微血管内皮计数MVD。2在BALB/C裸鼠背部皮下注射ACC-2癌细胞5×107/ml/0．1ml建立荷人ACC裸鼠模型30只。选取14 d后体积大致相等的荷瘤鼠各25只，随机数字表法分成五个组，每组5只裸鼠。治疗组每只裸鼠分别植入1枚125I粒子，按放射活度分为0．4mci，0．6mci，0．8mci，1．0mci 4个治疗组，三维治疗计划系统（TPS）计算4种不同放射活度125I粒子的剂量-体积直方图（DVH）；对照组植入无活性的空心粒子1枚，B型超声扇形扫描对125I粒子进行定位监测。每2d测量一次肿瘤直径并计算各组肿瘤体积抑制率，14 d后断颈处死裸鼠，行血常规检查，制作肿瘤组织标本，行透射电镜及常规病理学染色检测肿瘤坏死凋亡情况并记录肿瘤出现坏死凋亡改变距离125I粒子的最大半径。通过免疫组织化学来检测PCNA、VEGF、MMP-2、MMP-9及CD105的表达情况，计算出MVD。结果1泪腺ACC组织中MVD值及VEGF、MMP-2、MMP-9、PCNA的阳性表达率依次为（17．71±5．63）、53．33%（32/60）、45．00%（27/60）、55．00%（33/60）、46．67%（28/60）；正常泪腺组织中MVD值为（0．70±0．95），VEGF、MMP-2、MMP-9、PCNA未见阳性表达，差别有统计学意义（P＜0．05）。2泪腺ACC组织中MVD值、VEGF、PCNA、MMP-2及MMP-9的阳性表达率，实体型明显高于筛管型，复发瘤明显高于初发瘤，差别有统计学意义（P＜0．05），不同年龄及性别其表达差别无统计学意义（P＞0．05）。3泪腺ACC组织中MVD值，VEGF、MMP-2、MMP-9、PCNA阳性组分别高于VEGF、MMP-2、MMP-9、PCNA的阴性组，差别均有统计学意义（t’=2．043，P＜0．05；t=8．233，P＜0．01；t=8．209，P＜0．01；t’=2．048，P＜0．05）；Spearman相关分析显示MVD值与VEGF、MMP-2、MMP-9、PCNA的阳性表达均有相关性（rs=0．834，p＜0．05；rs=0．636，p＜0．05；rs=0．524，p＜0．05；rs=0．742，p＜0．05）。4泪腺ACC组织中VEGF阳性率，MMP-2、MMP-9阳性组分别高于MMP-2、MMP-9阴性组，Spearman相关分析显示VEGF的阳性表达与MMP-2、MMP-9的阳性表达均有相关性（rs=0．646，p＜0．05；rs=0．524，p＜0．05）；泪腺ACC组织中PCNA阳性率，VEGF、MMP-2、MMP-9阳性组分别高于VEGF、MMP-2、MMP-9阴性组，Spearman相关分析提示PCNA阳性表达与VEGF、MMP-2、MMP-9的阳性表达均有相关性（rs=0．712，p＜0．05；rs=0．546，p＜0．05；rs=0．612，p＜0．05）。5各治疗组红细胞计数及血红蛋白、白细胞及血小板含量较对照组差异均无统计学意义（P＞0．05）。6粒子植入14d，对照组G0平均瘤体积为（3713．19±243．23）mm3，各治疗组平均瘤体积分别为G1（3113．35±316．54）mm3、G2（2635．85±261．21）mm3、G3（2538．37±312．16）mm3、G4（1686．28±231．65）mm3，与对照组比较，差异均有统计学意义（P＜0．05）；各治疗组抑瘤率，G1（20．11±3．09）%、G2（36．18±2．54）%、G3（40．83±4．17）%、G4（66．63±5．34）%，直线相关分析结果；125I放射活度与抑瘤率呈正相关（r=0．965，P=0．035）。7透射电镜结果：各治疗组距离籽源凋亡或坏死的最大有效治疗半径依次为G15．2mm、G26．4mm、G37．4mm、G48．2mm，差异具有显著性（F=29．22，P=0．0000）；直线相关分析结果：125I放射活度与最大有效治疗半径呈正相关（r=0．9960，P=0．0040）。8 MVD值与VEGF、PCNA、MMP-2、MMP-9光密度值，各治疗组较对照组均明显降低，差异均有统计学意义（P＜0．05）。9治疗组，125I放射活性分别与VEGF、MMP-2、MMP-9、PCNA光密度值及MVD值的表达呈负相关（r=-0．9973，P=0．0026；r=-0．9961，P=0．0039；r=-0．9985，P=0．0014；r=-0．9777，P=0．0223；r=-0．9597，P=0．0403）；MMP-2、MMP-9的光密度值与VEGF的光密度值呈正相关（r=0．9948，P=0．0051；r=0．9998，P=0．0002）。结论1 MVD值及VEGF、PCNA、MMP-2、MMP-9与在泪腺ACC中均有较高的阳性表达。2 MVD值及VEGF、PCNA、MMP-2、MMP-9的表达与泪腺ACC的病理类型及复发相关，与泪腺ACC患者的性别、年龄无关。3 VEGF、PCNA、MMP-2、MMP-9与泪腺ACC的血管生成有关，检测MVD值及VEGF、PCNA、MMP-2、MMP-9的表达有望成为判断泪腺ACC恶性程度、复发与转移行为的生物学指标。4 125I粒子组织间植入对裸鼠移植性ACC持续照射可以抑制肿瘤细胞增殖周期，减少血管生成及向周围浸润转移，从而可以抑制肿瘤的生长，是一种安全、有效、可行、副作用少的方法。5 0．4mCi、0．6mCi、0．8mCi、1．0mCi四种放射活度的125I最大有效治疗半径依次为G1（5．2±0．5）mm、G2（6．4±0．7）mm、G3（7．4±0．4）mm、G4（8．2±0．5）mm，以上测量数据对于临床实际设计应用125I粒子植入方案具有积极的参考意义。6125I组织间植入治疗可能通过抑制ACC细胞表达VEGF、MMP-2与MMP-9来抑制肿瘤新生血管的形成，从而抑制肿瘤生长并减少癌细胞向周围浸润转移。

论文目录

• 中文摘要
• Abstract
• 符号说明
• 前言
• 研究现状、成果
• 研究目的、方法
• 一、泪腺ACC发病与转移机制的研究
• 1.1 对象和方法
• 1.2 结果
• 1.3 讨论
• 1.4 小结
• 125Ⅰ组织间植入治疗ACC的实验研究'>二、放射性¹²⁵Ⅰ组织间植入治疗ACC的实验研究
• 2.1 对象和方法
• 2.2 结果
• 2.3 讨论
• 2.4 小结
• 结论
• 参考文献
• 发表论文和参加科研情况说明
• 附录
• 综述
• 放射性粒子组织间植入近距离治疗肿瘤的进展
• 综述参考文献
• 致谢