花生根中白藜芦醇的分离纯化工艺研究

论文摘要

本文首先综述了天然活性物质白藜芦醇的生理功能、检测方法、粗提技术、纯化工艺等国内外的研究现状,然后通过二次通用旋转组合试验设计方法优化了超声波提取花生根中白藜芦醇的最佳工艺条件,还研究了大孔树脂纯化花生根中白藜芦醇的最优工艺,以及硅胶柱层析纯化白藜芦醇的工艺条件（1）通过二次通用旋转组合试验设计,得到超声波提取白藜芦醇的数学模拟方程：y=0.078X1+0.033X2-0.030X3-0.075X4+0.055X1X2+0.060X2X3+0.056X2X4+0.036X3X4-0.133X12-0.074X22-0.075X32-0.073X42+3.922,并且通过数学统计分析确定了超声波提取花生根中白藜芦醇最佳工艺条件：即乙醇浓度73%,超声功率290w,萃取时间5.6min,液料比17.5：1,使其理论得率可以达到3.96‰。然后通过验证试验发现,理论模型是可靠的。（2）通过大孔吸附树脂型号优选试验、DA-201树脂吸附白藜芦醇的动力学试验、DA-201树脂等温吸附试验、上样量试验与动态洗脱试验以及以考察上样流速、洗脱流速和洗脱溶剂浓度的三元二次通用旋转组合设计柱层析试验等研究发现：DA-201树脂等温吸附白藜芦醇过程符合Langmuir和Freundilch方程,该过程为吸热吸附,而且是物理吸附过程；由此进一步分析讨论确定在上样浓度为0.7mg/mL,上样液的pH=3,上样体积为20mL,洗脱体积为15mL的条件下,进行DA-201大孔吸附树脂柱层析纯化试验,可以得到大孔吸附树脂柱层析纯化白藜芦醇的数学模型：y=75.516-4.790X1-1.549X2+8.914X3-1.612X1X2-2.542X12-2.498X22-8.107X32经过回归分析以及方差分析,对方程进行局部寻优得出：在上样流速1.0 mL/min,洗脱流速1.6 mL/min,乙醇浓度76%,其纯化后白藜芦醇的得率为80.43±0.13%,经HPLC检测其纯度可以达到39%。（3）通过薄层层析和硅胶柱层析以及HPLC纯度检测试验研究发现,以氯仿与甲醇之比为9：1为常压硅胶柱层析的洗脱溶剂,硅胶吸附剂与样品量之比50：1,经一次硅胶柱层析可以使经大孔吸附树脂纯化的白藜芦醇粉末的纯度从39%提高到99%以上。

论文目录

• 摘要
• ABSTRACT
• 1 绪言
• 1.1 白藜芦醇的化学性质及来源
• 1.2 白藜芦醇的生理功能研究现状
• 1.2.1 抗癌作用
• 1.2.2 保护心血管作用
• 1.2.3 抗氧化作用
• 1.2.4 抗菌作用
• 1.2.5 抗炎作用
• 1.3 白藜芦醇粗提工艺研究现状
• 1.3.1 有机溶剂浸提法
• 1.3.2 碱提法
• 1.3.3 酶法
• 2萃取'>1.3.4 超临界CO₂萃取
• 1.3.5 微波辅助提取
• 1.3.6 超声波辅助提取
• 1.4 白藜芦醇的纯化工艺研究现状
• 1.4.1 大孔吸附树脂纯化
• 1.4.2 硅胶柱层析纯化
• 1.4.3 高速逆流色谱纯化
• 1.4.4 分子印迹技术纯化
• 1.5 白藜芦醇的检测技术研究现状
• 1.5.1 薄层色谱
• 1.5.2 高效液相色谱
• 1.5.3 毛细管电泳
• 1.5.4 飞行时间质谱
• 1.5.5 色谱联用技术
• 1.6 花生的研究概况
• 1.6.1 花生的主要功能成分
• 1.6.2 花生的种植概况
• 1.6.3 花生中白藜芦醇含量研究
• 1.7 本论文的研究内容和意义
• 1.7.1 本论文研究研究意义
• 1.7.2 本论文研究内容
• 2 超声波提取花生根中白藜芦醇的工艺研究
• 2.1 材料与方法
• 2.1.1 材料与试剂
• 2.1.2 主要试验仪器
• 2.1.3 试验方法
• 2.2 结果与分析
• 2.2.1 四元二次通用旋转组合试验设计试验结果分析
• 2.2.2 主因子效应分析
• 2.2.3 单因子效应分析
• 2.2.4 交互效应分析
• 2.2.5 回归方程局部最优点的寻找
• 2.2.6 最优工艺条件验证
• 2.3 小结
• 3 大孔吸附树脂纯化白藜芦醇工艺研究
• 3.1 材料与方法
• 3.1.1 试剂与仪器
• 3.1.2 试验方法
• 3.2 结果与分析
• 3.2.1 大孔树脂的静态考察
• 3.2.2 大孔树脂的动态考察
• 3.3 小结
• 4 硅胶柱层析纯化白藜芦醇工艺研究
• 4.1 材料与方法
• 4.1.1 试剂与仪器
• 4.1.2 试验方法
• 4.2 结果与分析
• 4.2.1 洗脱溶剂的选择
• 4.2.2 上样量的选择
• 4.3 小结
• 5 结论
• 展望
• 参考文献
• 附录
• 致谢