汉防己甲素等四种抗纤维化药物对离体兔角膜基质细胞抑制作用的实验研究

论文摘要

目的 运用离体兔角膜基质细胞从汉防己甲素等四种抗纤维化药物中筛选出抑制作用最佳的药物,然后初步探讨其对角膜基质细胞的作用机理及对纤维连接蛋白的影响,力图寻找一种能替代皮质类固醇用于防治屈光术后 Haze 形成的药物。 方法 1、选用原代及传代兔角膜基质细胞,实验组分别加入含不同浓度汉防己甲素（1 10μg/ml）、TGF-β 抗体（0.516μg/ml）、α-2b 干扰素（100～2500 u/ml）、维拉帕米（20～100μg/ml）、氟美童（16.67～83.33μg/ml）的培养液,对照组加入等量空白培养液,分别培养 24h、48h、72 h 后,采用 MTT 法检测其对细胞增殖的抑制作用,计算出抑制率和 IC50,并对其进行比较,选出抑制作用最佳的药物。2、将所选药物作用于基质细胞后,运用流式细胞仪测定细胞周期和凋亡率的变化;电镜观察其超微结构变化;免疫细胞化学检测其凋亡指标——bax、bcl-2 的改变。3、将所选药物作用基质细胞后,运用免疫细胞化学和酶联免疫吸附法检测纤维连接蛋白的变化。 结果 1、汉防己甲素在各时间段各浓度组,均能明显抑制角膜基质细胞的增殖,其 24、48、72 h 的 IC50分别为 3.71、3.16 和 2.82μg/ml,并具有明显的时间剂量-效应依赖关系。TGF-β 抗体在各时间段各浓度组均有较强抑制作用,其 IC50 分别为 6.55、3.31 和 3.86μg/ml。α-2b干扰素在各时间段各浓度组均有抑制作用,但作用都较弱。维拉帕米除在 24h 的 80、100μg/ml 和 72h 的 100μg/ml 浓度组有抑制作用外,其

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• 正文 汉防己甲素等四种抗纤维化药物对离体兔角膜基质细胞抑制作用的实验研究
• 前言
• 第一部分 比较四种抗纤维化药物对离体兔角膜基质细胞的抑制作用——筛选出最佳药物
• 材料与方法
• 结果
• 讨论
• 小结
• 第二部分 汉防己甲素对离体兔角膜基质细胞的作用机理及其对纤维连接蛋白的影响
• 材料与方法
• 结果
• 讨论
• 小结
• 全文结论
• 附图
• 参考文献
• 文献综述 PRK 术后Haze 发病机制及防治的研究进展
• 致谢
• 攻读硕士学位期间发表的文章