扇贝多肽对UVB辐射损伤小鼠胸腺淋巴细胞的保护作用机制

论文摘要

目的 建立UVB（45mJ/cm2）对体外培养的小鼠胸腺淋巴细胞辐射损伤的病理模型,探讨在UVB辐射下,扇贝多肽（PCF）对小鼠胸腺淋巴细胞辐射损伤的保护作用及机制。方法 MTT法检测胸腺淋巴细胞活性;测定胞浆超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-px）和过氧化氢酶（CAT）的活性;流式细胞术检测细胞内活性氧（ROS）的产生以及细胞的凋亡率。透射电镜观察细胞超微结构的改变;琼脂糖凝胶电泳观察各组不加入或分别加入ERK抑制剂、JNK抑制剂和P38抑制剂后的DNA ladder;western-blot检测磷酸化ERK、磷酸化JNK、和磷酸化P38的活性。结果 PCF能显著提高UVB辐射后小鼠胸腺淋巴细胞的活性;提高胞浆中SOD、GSH-px、CAT的活性,降低ROS含量及细胞凋亡率;抑制UVB辐射所致的胸腺淋巴细胞凋亡的形态学改变,维持细胞的正常超微结构;抑制UVB所致的胸腺淋巴细胞DNA片段的出现;预先应用ERK抑制剂使DNA片段增加,给予JNK和P38抑制剂后协同PCF使DNA片段带减少。PCF还能提高磷酸化ERK的活性但降低磷酸化JNK及磷酸化P38的活性。结论 PCF能提高体外培养的小鼠胸腺淋巴细胞的活性,抑制UVB辐射诱导的细胞凋亡,对UVB辐射损伤的细胞具有保护作用。其作用机制与PCF能提高抗氧化酶的活性、减低活性氧的产生,减少DNA断裂有关,此外PCF对胸腺淋巴细胞的部分保护作用可能是通过调节MAPK的信号转导级联通路实现。

论文目录

• 引言
• 第一章 实验材料
• 1 试剂
• 2 实验用动物
• 3 仪器设备
• 第二章 实验方法
• 1 实验设计和动物处理
• 2 实验项目和指标检测
• 3 统计学处理
• 第三章 实验结果
• 1 PCF对UVB辐射小鼠胸腺淋巴细胞活性的影响
• 2 PCF对UVB辐射小鼠胸腺淋巴细胞抗氧化酶活性的影响
• 3 PCF对UVB辐射淋巴细胞后ROS的产生及凋亡率的影响
• 4 PCF对UVB辐射小鼠胸腺淋巴细胞超微结构的影响
• 5 PCF对UVB辐射小鼠胸腺淋巴细胞DNAladder的影响
• 6 PCF对细胞受UVB辐射后ERKs、JNKs、p38的影响
• 7 附图
• 第四章 讨论
• 第五章 结论
• 第六章 参考文献
• 综述及参考文献
• 攻读学位期间的研究成果
• 附录
• 致谢
• 学位论文独创性声明、学位论文知识产权权属声明