小鼠粒单白血病模型的建立及FK506和CSA对异基因造血细胞的免疫保护研究

论文摘要

目的研究小鼠粒单白血病动物模型的建立方式,在该模型的基础上进一步研究FK506和环孢霉素A （cyclosporin a, CsA）处理对异基因造血细胞存活的影响及免疫保护作用相关机制。方法用WEHI-3细胞从尾静脉注射及球后注射的方法建立小鼠粒单白血病（MML,myelomonocytic leukemia）模型,观察小鼠的一般情况、外周血计数和骨髓的光镜象,确定建模的优选方法；从绿色荧光蛋白转基因ICR小鼠的骨髓中获得造血细胞并进行体外扩增培养,将其作为供体细胞对MML小鼠进行输注；观察FK506和CsA处理对造血祖细胞的存活及对受体IL-2和IL-4表达量的影响。结果与球后注射相比,通过尾静脉注射小鼠存活期长,接种后第14天外周血白细胞计数及未成熟粒、单细胞百分率开始升高,第20天左右达到发病标准,第28天小鼠骨髓原始细胞百分率已显著增高,疾病模型已建立,说明尾静脉注射是建模的优选方法。对照组输注的造血细胞在粒单白血病模型小鼠中仅存1周,在经CsA和FK506处理的粒单白血病鼠,不仅造血细胞可存活至2周,而且个体存活较对照组改善。IL-2、IL-4水平在FK506和CsA处理组亦较模型小鼠组显著下调。CsA和FK506均能下调IL-2、IL-4；FK506下调IL-2、IL-4能力强于CsA。结论在制备小鼠粒单白血病模型上,尾静脉注射优于球后注射。CsA和FK506可降低宿主体内IL-2、IL-4的水平,延长造血细胞的存活,对造血细胞起到免疫保护的作用,从而延长病鼠的存活。其中,FK506下调粒单白血病模型小鼠体内IL-2、IL-4的表达水平优于CsA,这可能是异基因造血细胞移植中促进造血细胞植入、提高造血细胞移植成功率的因素之一。

论文目录

• 摘要
• ABSTRACT
• 前言
• 1.1 粒单细胞性白血病与造血干细胞移植治疗
• 1.2 小鼠粒单白血病动物模型的建立
• 1.3 环孢霉素A和FK506在免疫抑制方面的作用
• 1.4 白细胞介素2和白细胞介素4的功能
• 实验材料和方法
• 2.1 实验材料
• 2.2 实验方法
• 结果
• 3.1 小鼠粒单白血病动物模型的建立
• 3.2 造血祖细胞形态学与染色结果
• 3.3 造血细胞在各组的存活情况及各组IL-2和IL-4水平
• 3.4 IL-2和IL-4表达水平检测
• 3.5 造血细胞在4组小鼠存活时间与数量变化
• 讨论
• 4.1 小鼠粒单白血病动物模型的建立
• 4.2 造血细胞的分离、纯化、培养
• 4.3 FK506和CsA对移植后造血细胞的免疫保护作用
• 结论
• 参考文献
• 附录
• 综述
• 攻读学位期间成果
• 致谢
• 统计学证明