大连地区大樱桃根癌病的研究

论文摘要

根癌病是由根癌土壤杆菌（Agrobacterium.tumefaciens）引起的一种世界性的植物病害,大连地区大樱桃的根癌病尤为严重,急需查明该病发病程度,致病原因和病菌株系,从而进行有效的防治、抑制。本文对大连地区的大樱桃根癌病进行了田间调查;从染病的大樱桃植株根系和根际土壤中分离病原菌,进行了形态学、生理生化和分子生物学鉴定;研究了生物农药-壳寡糖对根癌菌的抑菌效果及对染病植株的诱导抗性;探讨了27种中药、内生菌、砧木和化学药剂对根癌菌的抑菌效果及大樱桃根癌病的防制措施。实验结果如下:1、大连地区大樱桃根癌病的发病率为56%、病情指数为29.33%。田间发病调查发现:发病部位在伤口上,伤口是根癌菌侵入的主要通道。湿度大利于接种点癌瘤的形成;癌瘤的形成以2225℃为宜;碱性、粘重土壤、排水不良的土壤易发病;樱桃癌瘤主要发生在根基部、主根、侧根和支根上;砧木不同,植株对病原菌的抗性不同。2、对从大樱桃感病植株根际土壤和病瘤里分离到的14株细菌,进行了形态学、生理生化和分子生物学三方面的鉴定,认为分离的7号菌株可能是大连地区根癌病的主要致病菌株。3、壳寡糖从800ppm开始对根癌土壤杆菌在实验室中具有抑菌活性,（抑菌活性相当于25ug/mL的青霉素的抑菌强度）。壳寡糖与根癌菌侵染寄主的防御酶活性变化成正相关。壳寡糖处理可提高黄瓜、向日葵感染根癌病植株的防御酶活性,尤其是PAL对壳寡糖处理敏感,在壳寡糖诱导抗性作用中可能是一种关键的防御酶。壳寡糖对根癌病植株有诱导抗病作用。壳寡糖处理后再接菌的黄瓜和向日葵幼苗比直接接菌的显症慢、病情轻,其诱导抗病作用主要表现在病原菌侵入初期,被诱导的植株对病原菌有抗侵入和抗扩展的效果。4进行了大樱桃根癌病防治、抑制研究。27种中药制剂中,大黄和黄连对根癌土壤杆菌具有较强的抑菌性,是很好的植物源生物农药资源。7种不同种类药剂、不同浓度的药效试验比较,抗根癌菌剂K84和抗菌剂402防效较好;针刺接种后再药剂处理,凡接种砧木均长癌瘤;在主根上刮瘤易伤根,且刮瘤后药剂处理无效。6种砧木对根癌病抗性试验中没有筛选出高抗性砧木,但依据发病率、瘤径和植株长势等指标综合评价,马哈利砧木对根癌病有较好的抗性。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 第1章 根癌病的研究进展
• 1.1 根癌病病原菌
• 1.1.1 根癌病病原菌的分类
• 1.1.2 根癌病病原菌的形态特征
• 1.1.3 根癌病病原菌的病害症状和宿主范围
• 1.1.4 根癌病病原菌的致病机理
• 1.1.5 根癌病病原菌的研究现状
• 1.2 根癌病防治研究
• 1.3 本论文研究背景和主要研究内容
• 1.3.1 本论文研究背景
• 1.3.2 本论文主要研究内容
• 第2章 大连地区大樱桃根癌病的调查研究
• 2.1 大樱桃根癌病的发病率与发病指数的调查
• 2.1.1 调查方法
• 2.1.2 调查结果与讨论
• 2.2 大樱桃根癌病田间发病条件的研究
• 2.2.1 材料与方法
• 2.2.1.1 实验材料
• 2.2.1.2 实验方法
• 2.2.2 结果与分析
• 2.2.2.1 传播途径
• 2.2.2.2 发病条件
• 2.2.2.3 发病部位
• 2.2.2.4 砧木对癌瘤形成的影响
• 2.2.3 讨论
• 第3章 大樱桃根癌病病原菌的分离和鉴定
• 3.1 大樱桃根癌病病原菌的分离纯化
• 3.1.1 实验材料
• 3.1.2 实验方法
• 3.1.2.1 采样与样品处理
• 3.1.2.2 稀释涂布平板法
• 3.1.3 实验结果
• 3.2 大樱桃树根癌病病原菌的鉴定
• 3.2.1 大樱桃树根癌病病原菌的形态学鉴定
• 3.2.1.1 实验材料与用品
• 3.2.1.2 实验方法
• 3.2.1.3 实验结果与分析
• 3.2.2 大樱桃根癌病病原菌的生理生化鉴定
• 3.2.2.1 实验材料和仪器
• 3.2.2.2 全自动分析仪生理生化鉴定
• 3.2.2.3 实验结果与分析
• 3.2.3 大樱桃根癌病病原菌的分子生物学鉴定
• 3.2.3.1 实验材料与用品
• 3.2.3.2 实验方法
• 3.2.3.3 实验结果
• 3.3 结论与讨论
• 第4章 壳寡糖对根癌菌的抑菌效果及诱导抗病作用研究
• 4.1 壳寡糖对根癌菌的抑菌实验
• 4.1.1 实验材料与方法
• 4.1.1.1 实验材料
• 4.1.1.2 实验方法
• 4.1.1.3 实验结果与分析
• 4.2 壳寡糖对根癌菌侵染寄主的防御酶活性的影响
• 4.2.1 材料
• 4.2.2 方法
• 4.2.3 实验结果与分析
• 4.2.3.1 壳寡糖诱导对黄瓜叶片苯丙氨酸解氨酶（PAL）活性的影响
• 4.2.3.2 壳寡糖诱导对黄瓜叶片多酚氧化酶（P0）活性的影响
• 4.2.3.3 壳寡糖诱导对黄瓜叶片过氧化物酶（P0D）活性的影响
• 4.2.3.4 壳寡糖诱导对向日葵叶片 PAL 活性的影响
• 4.2.3.5 向日葵叶中多酚氧化酶（P0）活性的变化
• 4.2.3.6 向日葵叶中过氧化物酶（P0D）活性的变化
• 4.3 壳寡糖对根癌病植株的诱导抗病作用
• 4.3.1 实验材料与方法
• 4.3.1.1 实验材料
• 4.3.1.2 实验方法
• 4.3.2 实验结果与分析
• 4.3.2.1 壳寡糖对黄瓜根癌病的诱导抗病作用
• 4.3.2.2 壳寡糖对向日葵根癌病的诱导抗病作用
• 4.4 讨论
• 第5章 大樱桃根癌病防治研究
• 5.1 中药制剂抑菌试验
• 5.1.1 实验材料
• 5.1.2 方法
• 5.1.2.1 中药药液的制备
• 5.1.2.2 药敏纸片的制备
• 5.1.2.3 菌种的制备
• 5.1.2.4 中药抑菌实验
• 5.1.3 结果与分析
• 5.1.3.1 几种中药对土壤根癌杆菌的抑菌效果比较
• 5.1.3.2 具有抑菌活性中药制剂的最低抑菌浓度
• 5.1.4 大黄和黄连有效成分的高效液相色谱分析
• 5.1.4.1 色谱分析条件
• 5.1.4.2 结果
• 5.1.5 讨论
• 5.2 大樱桃内源菌筛选
• 5.2.1 材料和用品
• 5.2.2 实验方法
• 5.2.2.1 指示菌菌种制备
• 5.2.2.2 内源菌的分离纯化
• 5.2.2.3 内源菌的抑菌试验
• 5.2.3 实验结果与分析
• 5.3 大樱桃根癌病药剂防治实验
• 5.3.1 材料与方法
• 5.3.1.1 材料
• 5.3.1.2 方法
• 5.3.2 结果与分析
• 5.3.2.1 无瘤无伤口不同砧木药剂处理效果
• 5.3.2.2 无瘤人为伤口不同砧木药剂处理效果
• 5.3.2.3 癌瘤刮除后药剂处理的效果
• 5.4 砧木对根癌病抗性研究
• 5.4.1 材料与方法
• 5.4.1.1 材料
• 5.4.1.2 方法
• 5.4.2 结果与分析
• 5.5 大樱桃癌肿病的防治措施
• 第6章 结论
• 参考文献
• 致谢