利用正丙氧基钛制备钛胶HPLC整体柱及影响结构的因素探讨

论文摘要

近年来,二氧化钛已经引起了越来越多的关注。它在很多领域都具有自己独特的性质,但最为引人注目的是它作为色谱填充材料。二氧化钛具有极好的机械强度和化学稳定性,可以用于大批量样品、大分子化合物（如多肽和蛋白等化合物）的分离分析和食品安全检测,具有重大意义。本文主要研究了利用溶胶-凝胶方法制备钛胶基质整体材料以及条件优化,并利用钛胶基质高效液相色谱柱分离蛋白样品。本课题的研究包括三个部分:（1）采用溶胶-凝胶法合成钛胶整体材料,确定了影响整体材料结构和性能的几个因素,包括初始混合物中各成分的比例、老化温度以及后续的干燥条件等。通过严格控制实验中的各个步骤制备出二氧化钛整体材料,并对制备得到的整体材料进行比表面积、孔径、SEM和XRD等参数的测定。（2）通过对牛血清白蛋白的胰蛋白酶水解液的单因素实验得出二氧化钛裸柱分离蛋白的最佳实验条件（用浓度为15mM的磷酸盐缓冲液修饰二氧化钛裸柱,流动相为85%ACN,流动相中磷酸盐缓冲液浓度为3.0mM,pH=5.0）并在得到的最佳实验条件下分离牛血清白蛋白的胰蛋白酶水解液。（3）通过对牛血清白蛋白的胰蛋白酶水解液的单因素实验得出钛胶基质反相高效液相色谱柱分离蛋白的最佳实验条件（用浓度为40mM的氟化铵缓冲液及尽可能高ACN含量的溶液作为流动相）并在四元泵高效液相色谱上采用梯度条件探讨分离蛋白水解液的最佳方案,得出分离的最佳条件（40mM的氟化铵条件下缓慢梯度变化ACN含量）。

论文目录

• 摘要
• ABSTRACT
• 第一章 前言
• 1.1 高效液相色谱研究概况
• 1.2 高效液相色谱整体柱的分类
• 1.2.1 无机整体柱
• 1.2.2 有机聚合物整体柱
• 1.2.3 有机整体柱与无机整体柱的比较
• 1.3 无机整体柱的制备方法
• 1.3.1 溶胶-凝胶法（Sol-gel）
• 1.3.2 聚合诱导胶体凝聚法（PICA）
• 1.3.3 两种制备方法的工艺路线
• 1.4 整体柱结构的评价
• 1.5 钛胶基质高效液相色谱的研究现状
• 1.5.1 二氧化钛的理化性质
• 1.5.2 二氧化钛在HPLC 中的应用
• 1.6 研目究的及意义
• 1.7 本实验研究的主要内容
• 第二章 钛胶基质高效液相色谱整体柱的制备和表征
• 2.1 引言
• 2.2 材料与方法
• 2.2.1 实验原料
• 2.2.2 实验仪器
• 2.2.3 实验方法
• 2.3 结果与讨论
• 2.3.1 初始混合物含量对凝胶化时间的影响
• 2.3.2 钛凝胶的电子显微镜结构以及最后制成品的形态
• 2.3.3 钛胶基质整体材料的比表面积测定
• 2.3.4 钛胶基质整体材料的孔径分布的测定
• 2.3.5 钛胶基质整体材料的SEM 图像
• 2.3.6 钛胶基质整体材料的XRD 检测
• 2.4 实验小结
• 第三章 正相钛胶基质高效液相色谱柱的应用
• 3.1 引言
• 3.2 材料与方法
• 3.2.1 主要试剂
• 3.2.2 主要仪器
• 3.2.3 实验方法
• 3.3 结果与讨论
• 3.3.1 不同稀释倍数的样品对分离效果的影响
• 3.3.2 不同浓度磷酸盐修饰二氧化钛裸柱对样品分离效果的影响
• 3.3.3 流动相中磷酸盐缓冲液的 pH 值对样品分离效果的影响
• 3.3.4 流动相中的乙腈浓度对样品分离效果的影响
• 3.3.5 流动相中的磷酸盐浓度对样品分离效果的影响
• 3.4 实验小结
• 第四章 反相钛胶基质高效液相色谱柱的应用
• 4.1 引言
• 4.2 材料与方法
• 4.2.1 主要试剂
• 4.2.2 主要仪器
• 4.2.3 实验方法
• 4.3 结果与讨论
• 4.3.1 流动相中的乙腈浓度对样品分离效果的影响
• 4.3.2 流动相中的缓冲盐浓度对样品分离效果的影响
• 4.3.3 牛血清白蛋白酶解液在四元泵色谱上的分离
• 4.4 实验小结
• 第五章 结论与展望
• 参考文献
• 致谢