论文摘要
本试验以“草原”美国薄荷(Monarda didyma‘Praricnacht’)带芽茎段、叶片和叶柄为材料,进行茎段培养和愈伤组织培养同时,利用GC—MS技术分析“草原”美国薄荷实生苗和试管苗的叶片挥发油成份,以期为美国薄荷离体培养建立有效途径,为美国薄荷工厂化试管育苗及种质资源保存提供理论依据。运用正交试验设计方法和Excel、SPSS软件进行数据处理,主要研究结果如下:(1)通过组织培养技术研究得出:①种子发芽及无菌苗的获得的最佳途径为:先将“草原”美国薄荷种子在发芽盒中萌发出苗,再用0.1%HgCl2灭菌2min,接入MS空白培养基中,效果最好。发芽率为45%,污染率为10%,死亡率为45%。②初代培养:带芽茎段培养以MS+6-BA1.0 mg·L-1+NAA0.05 mg·L-1为最适宜培养基配方组合,启动率达98.33%,平均新梢长为4.23cm。叶片、叶柄、和茎段的愈伤组织培养以MS+6-BA3.0 mg·L-1+NAA0.05 mg·L-1+2,4-D0.1 mg·L-1为最适宜培养基配方组合,出愈率为100%。③继代培养:适宜于茎段芽苗增殖培养的最适宜培养基配方组合为:MS+6-BA2.0 mg·L-1+NAA0.01 mg·L-1+IBA0.5 mg·L-1,芽苗增殖倍数达3.9,腋芽萌发早,有效苗多,且健壮。愈伤增殖的最适宜培养基配方组合为:MS+6-BA2.0mg·L-1+NAA0.1 mg·L-1+2,4-D 0.1 mg·L-1,愈伤的增殖率为81.6%。④愈伤组织分化培养:愈伤组织分化的最适宜培养基配方组合为:MS+BA2.0mg·L-1+TDZ1.0 mg·L-1+ZT0.25 mg·L-1+NAA 0.05mg·L-1分化培养最好,分化率为40%。⑤壮苗与生根培养:以空白培养基MS为最适宜的壮苗培养基配方。生根培养的最适宜培养基配方为:1/2MS+蔗糖30g·L-1+IBA0.05mg·L-1,生根率达100%,平均根长达4.16cm,平均根数为4.5条。⑥炼苗与移栽:最适宜的移栽基质为珍珠岩:蛭石:河沙(1:1:2),成活率为92.5%。(2)通过挥发油成份的气相色谱-质质谱(GC—MS)分析研究得出:以“草原”美国薄荷实生苗与组培苗的叶片为材料,利用GC-MS技术共分离鉴定出28种化学成分。其中实生苗挥发油鉴别出25种化学成份,而组培苗鉴别出有23种。发现两者的叶片挥发油的主要化学成份无明显的差异,其主要的化学成分为:麝香草酚,γ-松油烯,邻-聚伞花素,1-辛烯-3-醇,2-甲氧基-5-甲基-异丙苯,芳樟醇,4-蒈烯,3-崖柏烯,月桂烯。
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标签:草原美国薄荷论文; 组织培养论文; 挥发油成份论文; 气相色谱质谱分析论文;