“草原”美国薄荷的组织培养及挥发油成份研究

“草原”美国薄荷的组织培养及挥发油成份研究

论文摘要

本试验以“草原”美国薄荷(Monarda didyma‘Praricnacht’)带芽茎段、叶片和叶柄为材料,进行茎段培养和愈伤组织培养同时,利用GC—MS技术分析“草原”美国薄荷实生苗和试管苗的叶片挥发油成份,以期为美国薄荷离体培养建立有效途径,为美国薄荷工厂化试管育苗及种质资源保存提供理论依据。运用正交试验设计方法和Excel、SPSS软件进行数据处理,主要研究结果如下:(1)通过组织培养技术研究得出:①种子发芽及无菌苗的获得的最佳途径为:先将“草原”美国薄荷种子在发芽盒中萌发出苗,再用0.1%HgCl2灭菌2min,接入MS空白培养基中,效果最好。发芽率为45%,污染率为10%,死亡率为45%。②初代培养:带芽茎段培养以MS+6-BA1.0 mg·L-1+NAA0.05 mg·L-1为最适宜培养基配方组合,启动率达98.33%,平均新梢长为4.23cm。叶片、叶柄、和茎段的愈伤组织培养以MS+6-BA3.0 mg·L-1+NAA0.05 mg·L-1+2,4-D0.1 mg·L-1为最适宜培养基配方组合,出愈率为100%。③继代培养:适宜于茎段芽苗增殖培养的最适宜培养基配方组合为:MS+6-BA2.0 mg·L-1+NAA0.01 mg·L-1+IBA0.5 mg·L-1,芽苗增殖倍数达3.9,腋芽萌发早,有效苗多,且健壮。愈伤增殖的最适宜培养基配方组合为:MS+6-BA2.0mg·L-1+NAA0.1 mg·L-1+2,4-D 0.1 mg·L-1,愈伤的增殖率为81.6%。④愈伤组织分化培养:愈伤组织分化的最适宜培养基配方组合为:MS+BA2.0mg·L-1+TDZ1.0 mg·L-1+ZT0.25 mg·L-1+NAA 0.05mg·L-1分化培养最好,分化率为40%。⑤壮苗与生根培养:以空白培养基MS为最适宜的壮苗培养基配方。生根培养的最适宜培养基配方为:1/2MS+蔗糖30g·L-1+IBA0.05mg·L-1,生根率达100%,平均根长达4.16cm,平均根数为4.5条。⑥炼苗与移栽:最适宜的移栽基质为珍珠岩:蛭石:河沙(1:1:2),成活率为92.5%。(2)通过挥发油成份的气相色谱-质质谱(GC—MS)分析研究得出:以“草原”美国薄荷实生苗与组培苗的叶片为材料,利用GC-MS技术共分离鉴定出28种化学成分。其中实生苗挥发油鉴别出25种化学成份,而组培苗鉴别出有23种。发现两者的叶片挥发油的主要化学成份无明显的差异,其主要的化学成分为:麝香草酚,γ-松油烯,邻-聚伞花素,1-辛烯-3-醇,2-甲氧基-5-甲基-异丙苯,芳樟醇,4-蒈烯,3-崖柏烯,月桂烯。

论文目录

  • 摘要
  • Abstract
  • 前言
  • 2 文献综述
  • 2.1 美国薄荷的简介
  • 2.1.1 美国薄荷的形态特征与生物学特性
  • 2.1.2 美国薄荷的品种
  • 2.2 美国薄荷的价值
  • 2.2.1 观赏价值
  • 2.2.2 食用价值
  • 2.2.3 保健与药用价值
  • 2.2.4 精油价值
  • 2.3 香草植物及美国薄荷的研究与应用
  • 2.3.1 香草植物的研究与应用
  • 2.3.2 美国薄荷的研究与应用
  • 2.4 唇形科香草植物的组织培养研究进展
  • 2.5 香草植物的挥发油成份研究进展
  • 2.5.1 植物挥发油的定义
  • 2.5.2 植物挥发油的研究进展
  • 3 研究的目的与意义
  • 4 材料与方法
  • 4.1 组织培养体系的建立
  • 4.1.1 试验材料
  • 4.1.2 预备实验
  • 4.1.3 技术线路
  • 4.1.4 试验方案与方法
  • 4.2 挥发油成份的测定
  • 4.2.1 仪器与材料
  • 4.2.2 技术路线
  • 4.2.3 试验方案与方法
  • 4.3 试验数据统计与分析方法
  • 4.3.1 试验结果观察
  • 4.3.1.1 组织培养体系建立
  • 4.3.1.2 挥发油成份的测定
  • 4.3.1.2.1 组培苗挥发油成份的测定
  • 4.3.1.2.2 实生苗挥发油成份的测定
  • 4.3.2 数据统计分析方法
  • 5 结果与分析
  • 5.1 组织培养体系建立
  • 5.1.1 种子发芽及无菌苗的获得试验
  • 5.1.2 初代培养基的筛选
  • 5.1.3 继代增殖培养
  • 5.1.4 愈伤组织分化培养
  • 5.1.5 壮苗培养
  • 5.1.6 生根培养
  • 5.1.7 炼苗与移栽
  • 5.2 挥发油成份GC-MS结果与分析
  • 6 小结
  • 6.1 组织培养体系建立
  • 6.1.1 种子发芽及无菌苗的获得试验
  • 6.1.2 初代培养
  • 6.1.3 继代增殖培养
  • 6.1.4 愈伤组织分化培养
  • 6.1.5 壮苗培养
  • 6.1.6 生根培养
  • 6.1.7 炼苗与移栽
  • 6.2 挥发油成份GC-MS试验
  • 7 讨论
  • 7.1 组织培养中基本培养基的影响
  • 7.2 组织培养中生长调节剂的影响
  • 7.3 茎段继代增殖培养中激素累积的影响
  • 7.4 组织培养中愈伤组织难以分化成芽的原因
  • 7.5 组织培养中植株叶面卷曲的原因
  • 7.6 美国薄荷挥发油成份比较
  • 8 对下一步研究工作的建议
  • 参考文献
  • 附图
  • 致谢
  • 硕士期间发表的文章
  • 相关论文文献

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