前列腺癌基因诊断芯片的临床应用

前列腺癌基因诊断芯片的临床应用

论文摘要

前列腺癌(PCa)和前列腺增生(BPH)是泌尿外科常见的老年男性疾病,我国13.6%的老年男性患前列腺增生症;在西方国家前列腺癌死亡人数仅次于第一位的肺癌。当前临床诊断中使用前列腺特异抗原(PSA)作为前列腺癌和前列腺增生的主要鉴别诊断手段,然而由于PSA并非前列腺癌细胞所特有,血浆中PSA升高是前列腺癌细胞浸润正常细胞,导致前列腺液中PSA扩散到血液中所引起。前列腺增生、前列腺炎,甚至乳腺癌等多种疾病亦会引起血浆中PSA升高。当PSA在4~10 ng/ml时,难以区分PCa和BPH。因此临床有必要寻找比PSA更可靠的诊断指标。,PCa是多因素、多基因突变引起的疾病,凭单一指标的检测无法准确判断。近期,人们通过DNA微阵列技术,发现多个基因表达的变化与PCa病程相关,如能结合临床病理学研究,未来可作为PCa病程的生物标记。本论文利用国内外PCa和BPH相关基因研究成果,经充分的文献调研,预选了9个基因(KLK3/PSA、KLK2、KLK11、pim-1、hepsin、PSMA、AR、p27、IGF-1)作为研究对象,通过小型DNA微阵列技术和荧光定量PCR技术,结合PCa和BPH临床样本,对样本中9个基因的表达进行检测。研究中设计了9个基因和1个内参基因β-actin的引物,PCR扩增制备各基因探针序列后成功克隆到质粒载体中;运用包含这10个基因的小型DNA微阵列和荧光定量PCR技术共检测了25例临床样本,两种技术检测结果证明,这9个基因组合能明显区分PCa和BPH,其中KLK2、pim-1、AR、IGF-1可作为检测基因的核心组合。

论文目录

  • 中文摘要
  • Abstract
  • 目录
  • 缩略词表
  • 研究背景
  • 第一章 前列腺癌与前列腺增生相关基因的选择和克隆
  • 1.1 材料和试剂
  • 1.2 实验方法
  • 1.3 实验结果
  • 1.4 讨论
  • 第二章 小型 DNA微阵列制备与杂交
  • 2.1 材料和试剂
  • 2.2 实验方法
  • 2.3 结果
  • 2.4 讨论
  • 第三章 实时荧光定量 PCR检测 PCa和 BPH
  • 3.1 材料和试剂
  • 3.2 实验方法
  • 3.3 结果
  • 3.4 讨论
  • 总结
  • 参考文献
  • 综述
  • 附录
  • 附录1 临床样本资料
  • 附录2 按样本类型计算各基因小型DAN微阵列杂交原始数据的平均值
  • 附录3 荧光定量 PCR数据
  • 附录4 相关网站
  • 致谢
  • 相关论文文献

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