论文摘要
前列腺癌(PCa)和前列腺增生(BPH)是泌尿外科常见的老年男性疾病,我国13.6%的老年男性患前列腺增生症;在西方国家前列腺癌死亡人数仅次于第一位的肺癌。当前临床诊断中使用前列腺特异抗原(PSA)作为前列腺癌和前列腺增生的主要鉴别诊断手段,然而由于PSA并非前列腺癌细胞所特有,血浆中PSA升高是前列腺癌细胞浸润正常细胞,导致前列腺液中PSA扩散到血液中所引起。前列腺增生、前列腺炎,甚至乳腺癌等多种疾病亦会引起血浆中PSA升高。当PSA在4~10 ng/ml时,难以区分PCa和BPH。因此临床有必要寻找比PSA更可靠的诊断指标。,PCa是多因素、多基因突变引起的疾病,凭单一指标的检测无法准确判断。近期,人们通过DNA微阵列技术,发现多个基因表达的变化与PCa病程相关,如能结合临床病理学研究,未来可作为PCa病程的生物标记。本论文利用国内外PCa和BPH相关基因研究成果,经充分的文献调研,预选了9个基因(KLK3/PSA、KLK2、KLK11、pim-1、hepsin、PSMA、AR、p27、IGF-1)作为研究对象,通过小型DNA微阵列技术和荧光定量PCR技术,结合PCa和BPH临床样本,对样本中9个基因的表达进行检测。研究中设计了9个基因和1个内参基因β-actin的引物,PCR扩增制备各基因探针序列后成功克隆到质粒载体中;运用包含这10个基因的小型DNA微阵列和荧光定量PCR技术共检测了25例临床样本,两种技术检测结果证明,这9个基因组合能明显区分PCa和BPH,其中KLK2、pim-1、AR、IGF-1可作为检测基因的核心组合。