威灵仙质量标准规范化研究

论文题目: 威灵仙质量标准规范化研究

论文类型: 博士论文

论文专业: 中药学

作者: 杨林

导师: 万德光

关键词: 威灵仙,本草考证,品种调查研究,齐墩果酸,有效部位筛选研究,皂苷类成分提取分离,研究分析

文献来源: 成都中医药大学

发表年度: 2005

论文摘要: 威灵仙为古今镇痛抗炎的常用中药之一,近年来关于威灵仙本草考证、品种鉴别、化学成分研究及药理学方面的研究报道颇多,但对威灵仙药材质量控制、镇痛抗炎有效部位的系统筛选、以及镇痛抗炎有效成分的提取分离和药效学筛选方面的文献报道却并不多见。《中国药典》2005年版威灵仙项下只有药材中三萜皂苷元齐墩果酸的TLC鉴别项,仍然停留在定性鉴别的阶段。 本文对威灵仙近年来在各方面的研究进展作了综述,对威灵仙在古今本草中的记载和应用作了梳理。 对威灵仙资源植物作了整理,并首次对川产威灵仙资源植物的种类和分布做了调查、整理和研究,并列出川产市售威灵仙药材基原植物分种检索表。 通过对四川成都荷花池中药材专业市场、甘肃兰州黄河中药材专业市场以及云南、贵州、黑龙江等地区商品威灵仙药材的调查、收集、鉴定和整理,澄清了当今市场常见的威灵仙药材品种情况。 对威灵仙《中国药典》2005年版收载品种之一的东北铁线莲首次从化学成分类型的角度对其镇痛抗炎作用有效部位进行了系统的药效学筛选研究工作。研究结果表明:东北铁线莲中镇痛抗炎作用的有效部位主要为皂苷类成分及生物碱类成分。挥发油类及芳香水部位也有一定的镇痛抗炎作用。并由试验结果得出降低炎性组织中炎性介质前列腺素E2水平,可能是其抗炎作用的机理之一。 对中药威灵仙的三个药典品种作了化学成分系统预试。并对威灵仙药典品种之一的东北铁线莲中所含的三萜皂苷元进行了提取分离和结构鉴定。对三萜皂苷类成分进行了分离工作。 首次应用HPLC法对威灵仙药材中三萜皂苷元齐墩果酸进行了含量测定方法学研究,为威灵仙类药材质量标准从定性走向定量从方法学上提供了有力的依据。 对与威灵仙药材品种相关的铁线莲属11个分类群叶作了RAPD分析研究,结果显示,RAPD分析方法在本属植物的研究中是可行的,有着广阔的应用前景。

论文目录:

摘要

Abstract

前言

1.立题依据

2.主要研究内容

第一部分：威灵仙综述

1.威灵仙本草考证

2.品种资源研究

3.威灵仙药材及其类同品、易混品、伪品的形态组织，理化鉴别研究

4.化学成分研究

5.药理学研究

第二部分：威灵仙资源植物及川产威灵品种资源研究

1.威灵仙资源植物

2.川产威灵仙品种资源研究

3.川产市售威灵仙药材基原植物分种检索表

4.小结

第三部分：中药威灵仙商品品种调查研究

1.实验材料

2.实验方法

3.实验结果

3.1 性状鉴别部分

3.2 显微鉴别部分

3.2.1 八种商品威灵仙药材根横切面显微特征

3.2.2 八种商品威灵仙药材根横切面显微鉴别分种检索表

4.小结

第四部分：威灵仙镇痛抗炎有效部位药效学筛选

1.试验材料

1.1 实验动物

1.2 实验药材

1.3 实验仪器及试剂

1.4 供试药液的制备

1.4.1 水煎液的制备

1.4.2 总皂苷药液的制备

1.4.3 总生物碱药液的制备

1.4.4 挥发油药液的制备

1.4.5 芳香水药液的制备

1.5 动物分组情况

2 试验方法

2.1 镇痛实验

2.1.1 小鼠热板实验

2.1.2 小鼠扭体实验

2.2 抗炎实验

2.2.1 小鼠耳肿胀实验

2.2.2 大鼠足肿胀实验

2.2.3 大鼠棉球肉芽肿实验

2.2.4 大鼠PGE2含量测定

3 统计

4 试验结果

4.1 镇痛实验结果

4.1.1 小鼠热板结果

4.1.2 小鼠扭体实验结果

4.2 抗炎试验结果

4.2.1 小鼠耳肿胀试验结果

4.2.2 大鼠足肿胀实验结果

4.2.3 大鼠棉球肉芽肿试验结果

4.2.4 大鼠PGE2含量测定结果

5 结论及讨论

第五部分：化学成分研究

1 威灵仙化学成分系统预试

1.1 材料与试剂

1.1.1 药材

1.1.2 试剂

1.2 实验内容

1.2.1 供试药液的制备

1.2.2 试管预试

1.3 试验结果

2 东北铁线莲总皂苷部位的提取

2.1 试验材料及试剂

2.2 提取方法

2.2.1 提取溶剂的筛选

2.2.2 提取工艺的确定

3 东北铁线莲根皂苷元的分离

3.1 仪器及材料

3.2 总皂苷的水解

3.3 皂苷元的分离

3.4 结构鉴定

4 东北铁线莲根总皂苷类成分的分离

4.1 大孔树脂柱初步分离

4.1.1 大孔树脂的预处理

4.1.2 大孔树脂柱初步分离

4.2 硅胶柱层析分离

第六部分：HPLC法测定威灵仙中齐墩果酸含量

1 实验材料

1.1 药材

1.2 仪器

1.3 试剂

2 方法与结果

2.1 色谱条件

2.2 方法学考察

2.2.1 提取条件的考察

2.2.1.1 水解时间的考察

2.2.1.2 水解酸浓度考察

2.2.2 对照品溶液的制备

2.2.3 线性范围考察

2.2.4 精密度考察

2.2.5 重复性试验

2.2.6 稳定性试验

2.2.7 回收率试验

2.3 供试品溶液的制备与测定

2.3.1 供试品溶液的制备

2.3.2 样品的测定

3 讨论

第七部分：铁线莲属11个分类群叶的RAPD分析

1 前言

2 试验材料和方法

2.1 试验材料

2.2 DNA的提取

2.2.1 试剂

2.2.2 仪器设备

2.2.3 基因组DNA提取方法的筛选

2.2.4 基因组DNA提取物的检测及定量

2.3 RAPD反应

2.3.1 PCR程序的筛选

2.3.2 PCR反应缓冲液组成的筛选优化

2.3.3 RAPD反应

2.4 扩增产物多态性

2.5 数据处理

2.6 结果与分析

2.7 讨论

结论与讨论

参考文献

图版及说明

1.威灵仙商品药材根横切面显微图

2.川产威灵仙属植物照片

3.东北铁线莲皂苷元YL—D谱图

致谢

在校期间公开发表的学术论文及科研成果

声明

发布时间: 2005-09-20

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