乙酰肝素酶反义寡核苷酸对人胃癌细胞株SGC-7901免疫逃逸、增殖和凋亡及侵袭力影响的研究

乙酰肝素酶反义寡核苷酸对人胃癌细胞株SGC-7901免疫逃逸、增殖和凋亡及侵袭力影响的研究

论文题目: 乙酰肝素酶反义寡核苷酸对人胃癌细胞株SGC-7901免疫逃逸、增殖和凋亡及侵袭力影响的研究

论文类型: 博士论文

论文专业: 内科学

作者: 周世庆

导师: 刘倩

关键词: 乙酰肝素酶,寡核苷酸类,反义,胃肿瘤,免疫逃逸,凋亡,侵袭力

文献来源: 山东大学

发表年度: 2005

论文摘要: 目的:利用人胃癌细胞株SGC-7901细胞,通过检测Fas、FasL基因和蛋白的表达情况,探讨胃癌细胞的免疫逃逸机制;通过转染乙酰肝素酶反义寡核苷酸(HPSE AS-ODN),观察其对人胃腺癌细胞株SGC-7901细胞HPSE mRNA表达和免疫逃逸的影响,探讨其对胃癌细胞的抑制作用;通过观察HPSE AS-ODN对SGC-7901细胞增殖、凋亡和凋亡调控基因Fas、FasL、Bcl-2表达的影响,探讨其诱导胃癌细胞凋亡的机制:通过检测HPSE AS-ODN对碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)、细胞表面的整合膜蛋白(CD44v6)表达的影响,以及SGC-7901细胞体外侵袭力的变化,探讨其对胃癌细胞侵袭力的抑制作用。 方法:根据HPSE的基因序列设计互补于mRNA起始密码区的反义寡脱氧核苷酸(AS-ODN),并设计与其碱基组成相同,但碱基顺序随机排列的无义寡核苷酸(NS-ODN)作为对照。寡核苷酸序列行硫代磷酸化修饰。实验分为4组:无处理对照组(不进行转染)、脂质体对照组(转染时只加脂质体)、NS-ODN组(以脂质体转染NS-ODN)和AS-ODN组(以脂质体转染AS-ODN)。根据预试验结果,在以10μl/mL脂质体转染的情况下,选择0.1、0.2、0.4、0.8μmoL/L为终浓度进行实验。按照脂质体介导法,将HPSE反义寡核苷酸以阳离子脂质体Lipofectin包埋后转染已培养处于对数生长期的SGC-7901细胞,在37℃,5%CO2培养箱中培养,48小时后收集细胞,用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测转染前后细胞

论文目录:

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英文摘要

符号说明

前言

第一部分 乙酰肝素酶反义寡核苷酸对人胃癌细胞株SGC-7901免疫逃逸的影响

材料和方法

结果

讨论

附图

参考文献

第二部分 乙酰肝素酶反义寡核苷酸对人胃癌细胞株SGC-7901增殖和凋亡的影响

材料和方法

结果

讨论

附图

参考文献

第三部分 乙酰肝素酶反义寡核苷酸对人胃癌细胞株SGC-7901侵袭力的影响

材料和方法

结果

讨论

附图

参考文献

结论

致谢

攻读学位期间发表的学术论文及著作目录

发布时间: 2005-10-17

参考文献

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