论文摘要
烟草赤星病是烟叶中较普遍、较严重的病害,至今还没有建立起令人满意的抗病品种体系及研制出有效的防治药剂。目前多采用易污染环境、对人体危害较大、高残留的化学药剂进行防治,、而应用植物源农药进行防洽,既对人、畜安全，不污染环境,不易引起抗药性,在自然界中易于降解,又顺应了农业可持续发展和人类对自身健康要求提高的需要。因此,研究与开发植物源农药已成为当今新型农药研究的主要方向。本研究的目的是应用现代研究手段,将商陆、厚朴、苍耳子等三味中药的抗菌活性成分提取制备成提取物,对其进行组方研制成复方陆朴微乳剂,并完成制剂工艺、质量标准及初步药效学研究,以期开发出一种符合“生态烟叶”及环保、健康、持续发展理念的新型高效的防治烟草赤星病的植物源农药。提取物制备工艺研究中,以商陆总皂苷的含量为评价指标,筛选出商陆提取物的最佳提取工艺,在此基础上采用大孔吸附树脂纯化法对商陆粗提物进行纯化研究。分别从大孔吸附树脂的型号、吸附条件、上样体积、水洗量、乙醇洗脱浓度、乙醇洗脱流速、洗脱剂用量等方面对大孔吸附树脂纯化工艺参数进行了考察,确定了商陆提取物的最佳纯化工艺。该工艺所得的商陆总皂苷的纯度能达到60%以上,工艺稳定、简单、适合于工业化生产。采用高效液相色谱法,以厚朴酚与和厚朴酚的含量为评价指标,筛选出厚朴提取物的最佳制备工艺。采用高效液相色谱法,以绿原酸的含量为评价指标,筛选出苍耳子提取物的最佳制备工艺。以上工艺提取率高,稳定性好,操作简便,适合工业化生产。制剂成型工艺研究中,对商陆、厚朴、苍耳子三种提取物的混配比例、乳化剂和助溶剂的种类和用量、制备工艺进行了研究,并对复方陆朴微乳剂进行水质、乳液稳定性、经时稳定性、热贮稳定性、低温稳定性、pH值范围等考察。确定了复方陆朴微乳剂的最佳处方组成、制备工艺及制剂的各项技术指标。结果表明,该制剂制备方法简单、稳定、使用方便。制剂质量标准研究中,首次采用多指标对复方陆朴微乳剂的质量进行控制。采用薄层色谱法分别对复方陆朴微乳剂中厚朴、商陆、苍耳子进行了定性鉴别研究,通过对薄层色谱条件的考察,分别建立了复方陆朴微乳剂中厚朴、商陆、苍耳子的薄层色谱鉴别方法,该法斑点清晰可见,阴性无干扰,方法简便、快速、重现性好；采用高效液相色谱法对复方陆朴微乳剂中有效成分的含量测定方法进行了研究,建立了复方陆朴微乳剂中厚朴酚、和厚朴酚、绿原酸的含量测定方法,该方法准确度高、重现性好、可作为该制剂的质量控制依据。制剂的初步药效学研究中,采用滤纸片法测定复方陆朴微乳剂对烟草赤星病菌孢子萌发的活性,菌丝生长速率法测定其对烟草赤星病菌活性,首次完成了复方陆朴微乳剂的初步药效学研究。结果表明,复方陆朴微乳剂对烟草赤星病菌孢子的萌发及菌丝生长都具有显著地抑制作用,且随药剂浓度增高,产孢量明显减少,菌丝生长明显受到抑制。该研究为复方陆朴微乳剂进一步室内药效学试验及大田药效试验奠定了基础。