藏药湿生扁蕾的化学成分及生物活性研究

论文摘要

湿生扁蕾Gentianopsis paludosa（Hook．f．）Ma属于龙胆科扁蕾属植物，系一年生草本植物，主要分布在我国西北地区。在民间主要用来治疗高血压、肠胃炎、腹泻等。由湿生扁蕾制成的扁蕾冲剂在治疗小儿腹泻方面效果显著，但其药效成分及其药理基础并不清楚，因此本文主要从化学成分和生物活性两方面对其进行了深入研究，为湿生扁蕾的开发利用提供科学的依据。主要结论如下： 1．利用各种层析方法从其全草中分离得到了23个化合物，通过理化性质、光谱分析、质谱及与已知样品对照等手段鉴定了18个化合物。14个化合物为首次从湿生扁蕾中分离得到，其中新化合物1个，新天然产物1个，9个化合物为首次从扁蕾属植物中得到。 2．通过蓖麻油致腹泻，炭末推进和家兔离体回肠实验，表明了湿生扁蕾具有抗腹泻活性，同时也阐明了其作用机制。通过离体回肠实验对其活性部位及有效成分进行了筛选，氯仿部位的活性最好而木犀草素有可能是湿生扁蕾抗腹泻的有效成分。 3．通过K-B纸片扩散法和生长速率法分别研究了湿生扁蕾乙醇提取物、各部位及单体化合物对细菌和真菌的抑制作用。结果表明，湿生扁蕾对细菌和真菌都有一定的抑制作用。抑菌部位主要集中在石油醚和氯仿部位，而在测试的化合物中，1，7-二羟基-3，8-二甲氧基（口山）酮的活性最好。 4．通过DPPH实验测定了湿生扁蕾的乙醇提取物、各部位及其单体化合物的抗氧化的活性，结果表明湿生扁蕾具有一定的抗氧化活性，其中正丁醇部位的活性最好，而单体化合物木犀草素和其苷的抗氧化活性强于其它化合物。 5．通过HPLC测定了木犀草素和1，7-二羟基-3，8-二甲氧基（口山）酮的含量，建立了湿生扁蕾药效成分的分析方法，为其质量控制研究提供了依据。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 第一章 文献综述
• 1.1 龙胆科药用植物的研究
• 1.2 扁蕾属植物的化学成分研究
• 1.3 扁蕾属植物的药理研究
• 1.4 藏药质量标准研究现状
• 1.5 （口山）酮类化合物的提取分离及药理作用研究
• 1.5.1 （口山）酮类化合物的提取方法
• 1.5.1.1 传统提取
• 1.5.1.2 超临界流体提取（SCF）
• 1.5.1.3 加压溶剂提取（PFE）
• 1.5.1.4 基质固相分散提取
• 1.5.2 （口山）酮类化合物的分离分析
• 1.5.2.1 柱色谱
• 1.5.2.2 薄层色谱
• 1.5.2.3 高效液相色谱
• 1.5.2.4 毛细管电泳
• 1.5.2.4.1 毛细管区带电泳
• 1.5.2.4.2 胶束电动毛细管色谱
• 1.5.2.4.3 微乳电动毛细管色谱
• 1.5.2.4.4 毛细管电色谱
• 1.5.2.5 气相色谱
• 1.5.3 （口山）酮类化合物的药理作用
• 1.5.3.1 抗氧化作用
• 1.5.3.2 抗微生物作用
• 1.5.3.3 单胺氧化酶抑制作用
• 1.5.3.4 抗疟疾作用
• 1.5.3.5 对中枢神经系统的作用
• 1.5.3.6 对心血管系统的作用
• 1.5.3.7 抗炎止痛作用
• 1.5.3.8 抗血小板凝集作用
• 1.5.3.9 其它作用
• 1.6 本课题的提出
• 参考文献
• 第二章 湿生扁蕾化学成分的研究
• 2.1 实验仪器与材料
• 2.2 提取分离和纯化
• 2.2.1 提取分离Ⅰ
• 2.2.2 提取分离Ⅱ
• 2.3 化合物的结构鉴定
• 2.3.1 新化合物的结构鉴定
• 2.3.2 已知化合物的结构鉴定
• 2.3.2.1 新天然产物的结构鉴定
• 2.3.2.2 （口山）酮类化合物的结构鉴定
• 2.3.2.3 黄酮类化合物的结构鉴定
• 2.3.2.4 三萜类化合物的结构鉴定
• 2.3.2.5 其它类化合物的结构鉴定
• 2.4 化合物理化数据
• 2.4.1 新化合物的理化数据
• 2.4.2 已化合物的理化数据
• 2.4.2.1 新天然产物的理化数据
• 2.4.2.2 （口山）酮类化合物的理化数据
• 2.4.2.3 黄酮类化合物的理化数据
• 2.4.2.4 三萜类化合物的理化数据
• 2.4.2.5 其它类化合物的理化数据
• 2.5 小结
• 参考文献
• 第三章 湿生扁蕾提取物及单体化合物的生物活性研究
• 3.1 湿生扁蕾提取物及单体化合物的抗腹泻活性研究
• 3.1.1 实验材料
• 3.1.1.1 湿生扁蕾不同溶剂提取物的制备
• 3.1.1.2 75%乙醇提取物各部位的制备及待测化合物
• 3.1.1.3 实验试剂与仪器
• 3.1.1.4 实验动物
• 3.1.2 实验方法
• 3.1.2.1 台氏液的配制
• 3.1.2.2 待测物溶液的配制
• 3.1.2.3 家兔离体回肠平滑肌标本的制备
• 3.1.2.4 收缩曲线的描记
• 3.1.2.5 湿生扁蕾提取物对离体回肠自发收缩的影响
• 3.1.2.6 75%乙醇提取物各部位对离体回肠自发收缩的影响
• 3.1.2.7 筛选湿生扁蕾抗腹泻的有效成分
• 3.1.2.8 75%乙醇提取物及有效成分对KCl和ACh所致回肠平滑肌收缩的影响
• 2所致离体回肠收缩的影响'>3.1.2.9 75%乙醇提取物和有效成分对CaCl₂所致离体回肠收缩的影响
• 3.1.2.10 75%乙醇提取物和有效成分对无钙液中Ach引起回肠收缩的影响
• 3.1.2.11 75%乙醇提取物对蓖麻油引起泻下作用的影响
• 3.1.2.12 75%乙醇提取物对小鼠胃肠推进运动的影响
• 3.1.2.13 统计方法
• 3.1.3 实验结果
• 3.1.3.1 湿生扁蕾提取物及各部位对离体回肠自发收缩的影响
• 3.1.3.2 湿生扁蕾抗腹泻有效成分的筛选
• 3.1.3.3 75%乙醇提取物及有效成分对KCl和ACh所致回肠平滑肌收缩的影响
• 2所致离体回肠收缩的影响'>3.1.3.4 75%乙醇提取物和有效成分对CaCl₂所致离体回肠收缩的影响
• 3.1.3.5 75%乙醇提取物和有效成分对无钙液中Ach引起回肠收缩的影响
• 3.1.3.6 75%乙醇提取物对蓖麻油引起泻下作用的影响
• 3.1.3.7 75%乙醇提取物对小鼠胃肠推进运动的影响
• 3.1.4 讨论
• 3.2 湿生扁蕾提取物及单体化合物的抑菌活性研究
• 3.2.1 菌株
• 3.2.1.1 细菌
• 3.2.1.2 真菌
• 3.2.2 培养基
• 3.2.3 测试样品
• 3.2.4 实验方法
• 3.2.4.1 化合物溶液的配制
• 3.2.4.2 对细菌的抑制（K-B纸片法）
• 3.2.4.3 对真菌的抑制（生长速率法）
• 3.2.5 实验结果
• 3.2.5.1 对细菌的抑制作用
• 3.2.5.2 对真菌的抑制作用
• 3.2.6 讨论
• 3.3 湿生扁蕾提取物及单体化合物的抗氧化活性研究
• 3.3.1 实验试剂及仪器
• 3.3.2 测试样品
• 3.3.3 实验方法
• 3.3.3.1 样品溶液的配制
• 3.3.3.2 清除DPPH的测定
• 3.3.4 结果与讨论
• 3.4 小结
• 参考文献
• 第四章 湿生扁蕾有效成分的含量测定
• 4.1 化学对照品的确定依据
• 4.2 实验仪器和材料
• 4.2.1 实验仪器
• 4.2.2 试剂和药材
• 4.3 实验方法和结果
• 4.3.1 检测波长的选择
• 4.3.2 流动相的选择
• 4.3.3 标准曲线的建立
• 4.3.4 样品制备及测定
• 4.3.5 精密度试验
• 4.3.6 重复性试验
• 4.3.7 加样回收率试验
• 4.4 小结与讨论
• 第五章 结论
• 附图 化合物谱图
• 作者简介及发表文章目录
• 致谢