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【摘要】目的：观察非最终灭菌车间内部使用臭氧消毒的效果，为车间消毒提供理论支持。方法：采用臭氧发生器制造出的臭氧，对车间进行臭氧消毒。结果：消毒1h，杀菌率均＞90%；消毒2h，灭菌完全并且臭氧达到有效浓度。结论：该车间应进行2h的臭氧消毒，可达到彻底杀菌的效果。
【关键词】非最终灭菌车间；臭氧；效果观察
【中图分类号】R187.2【文献标识码】A【文章编号】1007-8231（2016）36-0271-02
臭氧是一种具有特殊气味的淡蓝色气体。其消毒的作用原理为[1，2]：（1）臭氧能氧化分解细菌内部氧化葡萄糖所必需的酶，使细菌灭活死亡。（2）直接与细菌、病毒作用，细菌的新陈代谢受到破坏，导致死亡。（3）渗透胞膜组织，使细菌溶解死亡。在如今利用臭氧对厂房、设备进行消毒已经非常广泛[3]。本研究介绍采用臭氧对无菌注射剂洁净车间进行消毒的方法及效果。
1.资料与方法
1.1一般资料
选取新建的非最终灭菌车间，该车间为无菌注射剂生产车间。其中A级和B级进行检测的房间为储物间（CW）、整衣间（Z）和灌装间（G），C级进行检测的房间为称量间（CL）、配制间（P）和清洗间（Q）。
1.2方法
按臭氧发生器（SW-018，青岛维斯特净化公司）使用说明进行臭氧消毒。消毒后，用新风对无菌室内空气进行置换，直到房间内臭氧浓度降低到1×10-7mol/L[4]。每一种检测取样人员均必须穿戴好防护服(防毒面具)，方可进入房间取样。
1.3臭氧浓度检测
臭氧有效杀菌浓度为2×10-5mol/L[5]。
开启臭氧发生器，分别在0.5、1.0、1.5、2.0h取样，用臭氧浓度测定仪（DTN660-O3，深圳市华利奥电子有限）对样品进行臭氧浓度检测，以此来确定臭氧达到有效浓度的时间点。
1.4灭菌度检测
分别在检测房间CW、Z、G、CL、P和Q的地面放置4支臭氧灭菌用生物指示剂（H6306，石家庄伟天科学仪器设备有限公司），编号为CW/Z/G/CL/P/Q-1、2、3、4。分别在灭菌0.5、1.0、1.5、2.0h取出6个房间各个取样点的一个指示剂送至化验室进行检测。将指示剂内部吸附芽孢的载体插入培养基中，同时将未使用的指示剂内部吸附芽孢的载体也插入培养基中，作为阴性对照，37℃，培养48h。
评判标准：培养48h后，若培养基颜色保持蓝色不变，则可判定为灭菌完全；若变成黄色，则判定为灭菌不完全。
1.5杀菌率测定
进行臭氧消毒前，用浮游菌采样器（FKC-Ⅲ型，苏州苏净仪器自控设备有限公司）分别在检测房间进行浮游菌收集，再将收集到的浮游菌接种到平板培养基上；开启臭氧发生器，1.0h再次取样接种，将接种后的平板置于37℃，培养24h，计算杀菌率（%）。杀菌率=(消毒前细菌数-消毒后细菌数)／消毒前细菌数。
2.结果
2.1臭氧浓度检测
从表1中数据可以看出，臭氧消毒＜1.5h，各房间臭氧浓度在1.0×10-5mol/L～1.9×10-5mol/L之间；臭氧消毒2h，各房间臭氧浓度在2.1×10-5mol/L～2.4×10-5mol/L之间。结果表明，只有臭氧消毒2h，才能达到有效浓度。
2.2灭菌度检测
通过臭氧灭菌用生物指示剂在消毒0.5、1.0、1.5、2.0h取样检测，结果为房间CW、Z、CL和P在1.5h培养基颜色未变黄，即灭菌完全；房间G和Q在2h培养基颜色未变黄，即灭菌完全。
2.3杀菌率测定
利用对收集到的浮游菌进行平板培养，培养24h。计算杀菌率为：CW92%、Z95%、G91%、CL96%、P94%、Q91%。
3.讨论
以往紫外线是一种简单、方便、廉价的空气消毒方法，其波长210～328nm，可使微生物DNA失去转化能力而死亡，但紫外线直照对人的眼睛、皮肤有损伤[6]。有研究认为臭氧是一种弥散性气体，穿透力强，具有高效广谱杀菌作用，还能杀灭芽孢等，并可破坏肉毒杆菌素，因而能快速有效杀灭各种微生物[7]。臭氧消毒为空气杀菌，在额定空间内杀菌效果与距离无关，不受物体遮挡影响[3]。在使用臭氧消毒时，应注意：(1)臭氧为强氧化剂，可对物品产生损害，浓度越高损害越重。可使铜片出现绿色锈斑；橡胶老化、变色、弹性降低、易断裂；使织物漂白褪色等。(2)当臭氧达到一定浓度之后，人体吸人高浓度臭氧，会因其强氧化作用，而对呼吸道形成烧灼，造成呼吸系统充血或发炎。我国医疗卫生机构臭氧消毒技术规定：在有人的情况下，大气中允许浓度不超过0.2mg／m3。(3)当水中有溴离子时，臭氧可以产生消毒副产物溴酸盐。国际癌症研究机构把溴酸盐定为2B级潜在致癌物，具有一定的染色体水平的遗传毒性。(4)应避免在明火和放置易燃、易爆物品的场所使用臭氧发生器[8]。
此次车间采取的臭氧消毒，消毒1h，各房间的杀菌率均在91%到96%之间；消毒2h，臭氧浓度在2.1×10-5mol/L～2.4×10-5mol/L之间，达到有效浓度值；并且各房间消毒2h，臭氧灭菌用生物指示剂的培养基颜色未变黄，能够完全灭菌。因此，该无菌注射剂生产车间进行臭氧消毒时，应消毒2h，方可获得完全杀菌的效果。
【参考文献】
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