甲状旁腺素对大鼠成骨细胞增殖、分化影响的分子机制研究

甲状旁腺素对大鼠成骨细胞增殖、分化影响的分子机制研究

论文摘要

目的:甲状旁腺激素(PTH)是调节骨代谢的重要激素之一。甲状旁腺功能亢进的患者由于血钙升高,骨吸收增加导致骨质疏松。但另一方面,小剂量间歇性给予PTH可以增加骨形成,使骨量上升,因此PTH被认为是目前唯一有希望治愈骨质疏松的药物。PTH对骨代谢的双重调节作用一直是骨代谢领域的研究热点,但其机制目前仍未完全阐明。本研究通过PTH对大鼠成骨细胞相关细胞因子的调节作用,探讨甲状旁腺激素对骨代谢的双重作用的机制。 方法:用酶消化法从新生大鼠颅骨中分离成骨细胞体外培养,第3~5代细胞以1×104浓度接种于96孔板、24孔板和12孔板,细胞分为3组:①对照组;②PTH持续给药组;③PTH间歇给药组,每组3~8个复孔。以每48小时为一循环,PTH持续给药组48小时中持续给药,PTH间歇给药组前6小时给予PTH,后42小时撤除。对照组给予溶媒液。1~8个循环结束时,MTT法测定细胞增殖,测定细胞裂解液中碱性磷酸酶(ALP)活性,Trizol法提取总RNA,实时荧光定量RT-PCR法测定IGF-1、BMP-2、OPG和RANKL mRNA的表达水平。 结果:MTT结果显示,与对照组相比,PTH间歇给药组细胞增殖在第7和第8个循环时明显增加;与PTH持续给药组相比,第3~8个循环细胞增殖均增加。三组细胞中,PTH间歇给药组的ALP活性始终最高,但1~4个循环时,三组之间无显著性差异,从第5个循环开始至第8个循环,PTH间歇给药组

论文目录

  • 1. Abbreviations
  • 2. Abstract
  • 3. Chinese Abstract
  • 4. Introduction
  • 5. Materials and methods
  • 6. Results
  • 7. Discussion
  • 8. References
  • 9. Acknowledgment
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