论文摘要
目的:1.建立黄药子配伍甘草指纹图谱,比较合煎液和分煎液中主要化学成分的变化。从物质基础层面探讨甘草降低黄药子肝毒性的作用机理,为该药的临床安全合理应用提供科学的实验依据,同时探索传统解毒药甘草降低药物毒性的机理。2.建立HPLC测定黄独乙素和甘草甜素含量的分析方法,比较黄药子配伍甘草合煎液与分煎液中的毒效成分黄独乙素和减毒保肝成分甘草甜素的含量变化。方法:1.实验一:采用高效液相色谱法,PLATISILTM-C18(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱,乙腈:0.1%冰乙酸为流动相梯度洗脱,检测波长260nm,流速0.8 mL·min-1,柱温30℃;进样量20μL;建立黄药子配伍甘草溶液的指纹图谱,比较黄药子甘草合煎液与分煎液主要化学成分的变化。2.实验二:采用高效液相色谱法,PLATISILTM-C18(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱,流动相乙腈-0.1%冰乙酸(40:60),检测波长210 nm,流速0.8 mL·min-1,柱温25℃,测定黄药子配伍甘草合煎液和分煎液中毒效成分黄独乙素的含量。3.实验三:采用高效液相色谱法,PLATISILTM-C18(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱,流动相乙腈-3%冰乙酸(40:60),检测波长250 nm,流速0.8 mL.min-1,柱温25℃,测定黄药子配伍甘草合煎液和分煎液中减毒保肝成分甘草甜素的含量。结果:1.建立了黄药子配伍甘草水煎液的指纹图谱。合煎液与分煎液相比化学成分没有发生质的变化,但是某些成分的含量发生了较大的变化。2.黄独乙素在37.5~310.0μg·mL-1浓度范围内呈良好的线性,r=0.9999。分煎液和合煎液的平均加样回收率分别为100.89%和100.55%,RSD分别为3.26%和2.79%。黄独乙素含量:合煎液<分煎液<黄药子单煎液,分别为:0.717mg·g-1, 0.808mg·g-1,175mg·g-1。3.甘草甜素在30.2~604.0μg·mL-1浓度范围内呈良好的线性,r=0.9999。分煎液和合煎液的平均加样回收率分别为99.82%和99.85%,RSD分别为2.78%和3.48%。甘草甜素含量:合煎液<分煎液<甘草单煎液,分别为:4.322mg·g-1,7.245 mg·g-1,10.290mg·g-1。结论:1.本实验建立的黄独乙素和甘草甜素含量测定方法简便,灵敏,准确,结果可靠。可用于黄独乙素和甘草甜素含量的测定。2.黄药子配伍甘草合煎液与分煎液主要成分未发生质的变化,但多数化学成分的量发生了较大变化。3.黄药子配伍甘草后黄独乙素和甘草甜素的含量均有所下降,提示:黄药子配伍草后毒性降低的原因可能是因为毒性成分黄独乙素含量下降,但是甘草甜素含下降的原因及具体减毒机制还有待进一步研究。
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