金针菇子实体多糖的提取、分离纯化及结构鉴定

论文摘要

本文研究主要分为三方面,分别为热水浸提法提取金针菇子实体多糖工艺条件优化、多糖的理化性质研究和多糖的结构分析。采用单因素、正交实验,得出热水浸提法提取金针菇子实体多糖的最佳工艺条件为：固液比1：20；时间3h；温度90℃；提取3次,并且得出影响多糖得率条件：固液比>提取次数>时间>温度。在所得最优条件下提取了2kg金针菇子实体,乙醇分级沉淀,得到粗多糖。选取60%醇沉粗多糖经过DEAE Sapharose Fast Flow阴离子交换层析和Sephacryl S系列凝胶柱层析后获得多糖组分：FVP60-B和FVP60-C2。紫外全扫描证实两者均不含蛋白质及核酸,红外光谱检测都具有多糖的特征性基团,高效液相检测为均一组分,并测得分子量分别为：1.3×104 Da及1.4×104 Da。FVP60-B通过单糖组成分析、甲基化分析和核磁共振分析,综合分析结果可得出：FVP60-B为中性多糖,主要由四种单糖构成：岩藻糖、甘露糖、葡萄糖及半乳糖,摩尔比为：0.71：0.82：1.00：4.88；其中岩藻糖以端基形式存在,葡萄糖有端基连接和1,6连接两种连接方式,半乳糖为1,6位连接,甘露糖为1,2,6连接方式存在,推测FVP60-B多糖主链是由半乳糖与葡萄葡萄糖为构成；糖残基以α构型为主,并包含少量β葡萄糖。FVP60-C2通过单糖组成分析得出主要由岩藻糖、木糖、甘露糖、葡萄糖、半乳糖构成,摩尔比为：0.74：0.21：1.36：1.00：1.31。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 重要名词缩写
• 第一章 综述
• 1.1 形态特征
• 1.2 金针菇的一般营养成分
• 1.3 金针菇多糖结构及功能性效应研究
• 1.3.1 多糖结构对其生物活性的影响
• 1.3.2 金针菇多糖的生物活性功能
• 1.4 多糖的提取、纯化研究
• 1.4.1 多糖的提取
• 1.4.2 多糖纯化方法
• 1.4.3 多糖含量及纯度测定
• 1.5 多糖结构研究概况
• 1.6 多糖结构测定内容
• 1.6.1 纯度测定
• 1.6.2 分子量的测定
• 1.6.3 单糖的鉴定
• 1.6.4 糖链接位置的测定
• 1.6.5 糖链连接顺序的确定
• 1.6.6 糖苷键构型及氧环的确定
• 1.7 多糖结构一级结构鉴定方法
• 1.7.1 化学方法
• 1.7.2 物理方法
• 1.7.3 生物方法
• 1.8 高级结构测定方法
• 1.8.1 核磁共振技术（NMR）
• 1.8.2 X-射线衍射法（XRD）
• 1.8.3 毛细管电泳法（CE）
• 1.8.4 圆二色谱法（CD）
• 1.8.5 原子力显微镜（AFM）
• 1.9 金针菇多糖功能性产品开发方面研究
• 1.9.1 糖类药物
• 1.9.2 功能性食品
• 1.10 本研究内容
• 第二章 金针菇子实体多糖提取、分离纯化及理化性质研究
• 2.1 材料和仪器
• 2.1.1 实验原料
• 2.1.2 实验试剂
• 2.1.3 主要仪器
• 2.2 实验方法
• 2.2.1 最佳提取工艺选择
• 2.2.2 粗多糖提取
• 2.2.3 多糖纯化
• 2.2.4 多糖纯度及分子量测定
• 2.2.5 紫外光谱（UV）全扫描检测
• 2.2.6 红外光谱（IR）分析
• 2.3 结果与分析
• 2.3.1 最佳提取工艺
• 2.3.2 最优条件提取粗多糖
• 2.3.3 离子柱层析
• 2.3.4 凝胶柱层析
• 2.3.5 多糖纯度及分子量测定
• 2.3.6 多糖紫外光谱分析
• 2.3.7 多糖红外光谱分析
• 第三章 FVP60-B、FVP60-C2结构分析
• 3.1 材料和仪器
• 3.1.1 实验原料
• 3.1.2 实验试剂
• 3.1.3 主要仪器
• 3.2 实验方法
• 3.2.1 气相（GC）色谱法
• 3.2.2 甲基化分析
• 3.2.3 核磁共振（NMR）分析
• 3.3 结果与分析
• 3.3.1 FVP60-B结构分析
• 3.3.2 FVP60-C2结构分析
• 第四章 全文总结与展望
• 参考文献
• 致谢
• 攻读学位期间发表的学术论文情况