阿莫西林/克拉维酸钾片在猫体内的药动学及安全性评价研究

论文摘要

阿莫西林/克拉维酸钾是广谱抗生素阿莫西林与β-内酰胺酶抑制剂克拉维酸钾组成的复方制剂,克拉维酸钾可保护阿莫西林不被细菌产生的β-内酰胺酶灭活,从而提高阿莫西林产酶耐药菌抗菌活性,扩大抗菌谱。该药对胃酸稳定,口服吸收良好,临床上被广泛应用于呼吸道,泌尿、生殖系统,皮肤、软组织,骨、关节感染等的治疗。但关于阿莫西林/克拉维酸钾片在猫等宠物上的使用在国内鲜有报道,为了使此药安全、有效的用于猫等宠物临床,本试验主要进行了以下研究：1.阿莫西林/克拉维酸钾的体外药物敏感性试验试验采用微量肉汤稀释法,以大肠杆菌ATCC25922和金黄色葡萄球菌ATCC29213为质控菌,以恩诺沙星和阿莫西林为药物对照,检测阿莫西林/克拉维酸钾对临床常见菌株（犬源链球菌、大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、沙门氏菌、变形杆菌、产气荚膜梭菌等）的最小抑菌浓度（MIC）；同时测定了其对链球菌和葡萄球菌的敏感率以及两种药物联用时的FIC指数。结果表明：阿莫西林/克拉维酸钾对临床常见菌株的MIC范围为0.03125～32μg/mL,阿莫西林MIC范围为0.0625～256μg/mL,恩诺沙星的MIC范围为0.0625～32μg/mL,其中一些对阿莫西林耐药的菌株对阿莫西林/克拉维酸钾同样敏感；阿莫西林和克拉维酸联用后对链球菌、葡萄球菌的FIC值主要分布在≤0.5和0.5～1的范围内,表明两药联合使用的抗菌效果以协同和相加作用为主。阿莫西林/克拉维酸对临床分离的链球菌的敏感率为77.78%（阿莫西林为50%）；阿莫西林/克拉维酸对临床分离的葡萄球菌的敏感率为100%（阿莫西林为86.67%）。阿莫西林/克拉维酸钾的抗微生物效果要显著优于阿莫西林。2.阿莫西林/克拉维酸钾片剂在猫体内药动学研究为了研究阿莫西林/克拉维酸钾（4：1）片在健康猫体内的药代动力学过程及计算其相对生物利用度。本试验选用18只健康成年猫,体重2.0～3.5kg,随机平均分为两组,每组9只,按2×2随机交叉试验设计,12.5mg/kg.bw进行单剂量内服及肌注阿莫西林/克拉维酸钾片和混悬液,试验间隔5天,采用RP-HPLC法及柱前咪唑衍生化RP-HPLC方法分别测定血浆中阿莫西林、克拉维酸的药物浓度,3p97药动学计算软件处理血药浓度-时间数据,得出药代动力学参数,进行房室模型拟合。结果：试验猫口服阿莫西林/克拉维酸钾片后,阿莫西林的药物浓度-时间数据符合一级吸收二室模型,主要药动学参数如下：tl/2ka为（0.97±0.34）h、t1/2ke为（2.09±0.90） h、Tmax为（1.91±0.53）h、Cmax为（4.65±2.41）μg/mL、AUC为（23.11±8.59） mg/h/mL、V/F为（1.61±1.28）L/kg、Cl为（0.50±0.21） L/h/kg;克拉维酸的药物浓度-时间数据符合一级吸收二室模型,主要药动学参数：t1/2ka为（0.42±0.21）h、t1/2ke为（2.75±2.62）h、 Tmax为（1.12±0.90）h、Cmax为（0.56±0.21）AUC为（1.77±0.86） mg/h/mL、 V/F为（3.39±2.17） L/kg、Cl为（1.40±0.92）L/h/kg。以肌肉注射液为参比制剂,得出猫口服阿莫西林/克拉维酸钾片剂后,血浆中阿莫西林和克拉维酸的相对生物利用度分别为39.87%和26.42%。3.阿莫西林/克拉维酸钾片剂对猫的安全性评价试验选用24只健康成年猫作为研究对象,体重2.0～3.5kg,随机平均分成4组,每组6只,分别为对照不用药组、临床推荐剂量组（12.5mg/kg.bw）、3倍临床推荐剂量组（37.5mg/kg.bw）、5倍临床推荐剂量组（62.5mg/kg.bw）,连续口服给药7天。记录给药期间的临床症状,分别于第0、4、8天检测血液学、血生化指标、尿液指标,试验结束后观察病理解剖组织学变化。结果发现：试验期间临床症状未观察到异常,试验结束后,各组动物的体增重与对照组比较,差异均不显著（P>0.05）；血液学检测除5倍推荐剂量组在第8天给药后白细胞计数与对照组比较显著降低（P<0.05）外,其余各组试验猫检测指标均正常；血生化指标检测结果发现5倍临床推荐治疗剂量组给药4天后总胆红素（Tbil）、肌酐（Crea）在与对照组相比显著降低（P<0.01）；谷丙转氨酶（ALT）、谷草转氨酶（AST）显著升高（P<0.05）,但在给药8天后均恢复正常,总蛋白（TP）、氯离子（Cl）在给药8天后显著降低（P<0.05）。3倍推荐剂量组、5倍推荐剂量组在给药后（第4、8天）碱性磷酸酶（ALP）与对照组相比明显升高,差异极显著（P<0.01）,但其变化均在正常范围内。其余指标各组间比较差异不显著（P>0.05）；尿液指标检测每组试验动物的尿蛋白（PRO）出现不同的程度的阴性,且与给药剂量呈现正相关,其余指标与对照组比较均无明显变化,对心、肝、脾、肺、肾主要脏器进行病理切片检查,5倍推荐剂量组的肝脏有少许红细胞,其余组未见异常的病理变化。

论文目录

• 摘要
• ABSTRACT
• 缩略符号
• 引言
• 第一章 文献综述
• 1 阿莫西林/克拉维酸的研究概况
• 1.1 阿莫西林和克拉维酸钾发展
• 1.2 化学结构
• 1.3 基本理化性质
• 1.4 β-内酰胺类抑制剂的简介
• 2 阿莫西林/克拉维酸钾的药效学研究进展
• 2.1 作用机理
• 2.2 抗菌活性
• 2.3 临床应用
• 3 阿莫西林/克拉维酸钾的药动学研究进展
• 3.1 猪
• 3.2 羊
• 3.3 鸡
• 3.4 犬
• 3.5 猫
• 3.6 鸽
• 4 阿莫西林/克拉维酸钾毒理学研究进展
• 4.1 急性毒性研究
• 4.2 慢性毒性研究
• 4.3 免疫毒性研究
• 4.4 对育种犬精液的毒性
• 4.5 临床不良反应
• 参考文献
• 第二章 阿莫西林/克拉维酸钾的体外药物敏感性试验
• 摘要
• 1 材料与方法
• 1.1 材料
• 1.2 试验方法
• 2 试验结果
• 2.1 对临床常见细菌最小抑菌浓度（MIC）的测定
• 2.2 阿莫西林和克拉维酸对临床分离的链球菌、金葡菌MIC及两药联合应用的FIC测定
• 2.3 阿莫西林/克拉维酸钾对临床分离的链球菌和金黄色葡萄球菌的敏感性
• 3 分析与讨论
• 参考文献
• Abstract
• 第三章 阿莫西林/克拉维酸钾片剂在猫体内药动学研究
• 摘要
• 1 材料和方法
• 1.1 材料
• 1.2 试验方法
• 1.3 数据的处理
• 2 试验结果
• 2.1 克拉维酸和阿莫西林色谱检测方法的建立
• 2.2 药时曲线与药动参数
• 3 分析与讨论
• 3.1 关于阿莫西林和克拉维酸在血浆中的检测方法
• 3.2 关于HPLC检测波长的选择
• 3.3 体内药物浓度与临床应用
• 3.4 关于阿莫西林和克拉维酸的药动学
• 3.5 相对生物利用度分析
• 参考文献
• Abstract
• 第四章 阿莫西林/克拉维酸钾片剂对猫的安全性评价
• 摘要
• 1 材料与方法
• 1.1 试验动物及分组
• 1.2 试验药物及剂量
• 1.3 试验器材及试剂
• 1.4 试验方法与观察指标
• 1.5 统计分析
• 2 试验结果
• 2.1 临床观察
• 2.2 血液学检测
• 2.3 血液生化检测
• 2.4 尿液指标检测
• 2.5 解剖学与组织学检查
• 3 分析与讨论
• 3.1 临床观察
• 3.2 血液学检查
• 3.3 血液生化指标检查
• 3.4 尿液影响
• 3.5 病理组织切片
• 参考文献
• Abstract
• 全文结论
• 致谢
• 文章发表情况