芹菜素对哮喘实验小鼠EOS炎症和TGF-β1影响机制研究

论文摘要

第一部分----芹菜素对哮喘小鼠气道炎症抑制作用的研究目的研究芹菜素对哮喘小鼠气道炎症制作用及其机制。方法选择32只6周龄SPF级BALB/c小鼠,随机分为4组,每组8只,A组正常组、B组哮喘组、C组芹菜素高剂量治疗组(20 mg.kg-1.d-1)、D组芹菜素低剂量治疗组(2 mg.kg-1.d-1)。卵白蛋白（OVA）致敏和激发制作哮喘模型。药物治疗组以芹菜素溶于1%二甲基亚砜（DMSO）腹腔注射。小鼠末次雾化吸入24 h后,小鼠肺功能仪检测气道对乙酰胆碱（Ach）阻力;苏木素-伊红（HE）染色观察气道炎症浸润情况;支气管肺泡灌洗液（BALF）瑞氏染色计数嗜酸性粒细胞百分比;酶联免疫吸附（ELISA）法测定血清总IgE、BALF液中IL-4和IL-13;免疫印迹（Western blot）测定肺组织中嗜酸性粒细胞趋化因子（Eotaxin）表达水平;免疫组化测定肺组织中趋化因子受体3（CCR3）的含量。结果与正常对照组比较,哮喘组Ach气道阻力、气道炎症、BALF细胞计数和嗜酸性粒细胞分类计数、血清总IgE、BALF中IL-4、IL-13以及肺组织中Eotaxin、CCR3蛋白表达明显增高（P < 0. 05）。与哮喘组比较,芹菜素治疗组各项指标均明显降低（P < 0. 05）,而且高、低剂量组之间存在显著性差异（P < 0. 05）。结论芹菜素通过降低肺组织Eotaxin、CCR3和Th2细胞因子的表达而降低哮喘小鼠气道炎症和气道高反应性,具有潜在的临床应用前景。第二部分----芹菜素对慢性哮喘小鼠模型气道重塑的影响目的观察芹菜素对慢性哮喘模型小鼠气道炎症和气道重塑的影响及探讨可能机制。方法BALB/c小鼠分成对照组、哮喘组、芹菜素组和布地奈德组。OVA致敏,每周三次激发,共12周,芹菜素(20 mg.kg-1.d-1)腹腔注射,布地奈德混悬液雾化,共12周。末次激发24h后,测定气道反应性。末次激发24h后,测定气道反应性,HE染色观察肺组织炎性细胞浸润情况,PAS染色观察杯状细胞增生情况,Masson三色染色观察上皮下纤维化,ELISA检测血清总IgE和BALF中IL-4、IL-13的水平,肺组织进行羟脯氨酸测定观察肺组织胶原含量,免疫组化测定气道α-SMA,TGF-β1的表达应用WB检测。结果随着Ach浓度的增加,哮喘组小鼠RL明显增加,正常组小鼠RL轻度增加,芹菜素组小鼠与哮喘组小鼠相比有统计学意义（P<0.05）,芹菜素与布地奈德组小鼠之间无统计学意义（P>0.05）;哮喘组小鼠BALF中炎性细胞总数和EOS细胞数高于正常组小鼠（P<0.01）,两治疗组小鼠明显降低（P<0.05）,芹菜素组和布地奈德组之间无统计学意义（P>0.05）;哮喘组BALF中IL-4、IL-13和血清总IgE含量高于正常组（P<0.01）,治疗组低于哮喘组小鼠（P<0.05）,芹菜素和布地奈德组两组之间无差异（P>0.05）;哮喘组小鼠肺组织羟脯氨酸含量高于正常组小鼠（P<0.01）,治疗组减低,与哮喘组相比有统计学意义（P<0.05）;哮喘组小鼠肺组织TGF-β1的蛋白高于正常组（P<0.05）。结论芹菜素可抑制哮喘模型小鼠的气道炎症气道重塑,对气道重塑的抑制作用可能与抑制TGF-β1的表达有关。

论文目录

• 主要英文缩略语词表
• 中文摘要
• ABSTRACT
• 引言
• 第一部分 芹菜素对急性哮喘模型小鼠气道炎症的影响
• 材料和方法
• 结果
• 讨论
• 第二部分 芹菜素对慢性哮喘小鼠气道重塑的影响
• 材料和方法
• 结果
• 讨论
• 全文小结
• 参考文献
• 综述及论著
• 致谢
• 说明