山楂中抑制ACE的活性部位和有效成分的研究

论文摘要

目前,高血压已经成为困扰人类健康的主要疾病之一。山楂含有丰富的三萜类化合物,具有显著的降血压功能。对山楂的活性部位甚至活性成分进行了广泛的研究,开发降血压高活性部位甚至发现新的降血压活性成分,有非常重要的现实意义。本研究的主要内容有:（1）以ACE酶为靶标对近100味常用中药的全浸膏进行抑制酶活力的筛选;（2）对山楂乙醇浸膏用石油醚、乙酸乙酯、丙酮和水进行分离,然后对高抑制活性部位用硅胶柱进一步分离,并对分离物进行初步的定性鉴定:（3）对硅胶柱分离出的高抑制活性组分用半制备高效液相进行制备,得到11个组分;（4）用硅胶柱分离的高抑制活性组分进行高血压动物模型试验。通过以上实验,得到以下研究结果:（1）选得了高抑制活性的20味中药,其中山楂浸膏的抑制率较高,相对抑制率最大值为7.15。本文选取山楂作为研究对象,并对其活性成分进行系统分级和分离。（2）山楂丙酮活性部位的抑制活性最好。再用硅胶柱分离丙酮部位,洗脱液为（A）乙酸乙酯:100%乙醇=75:25;（B）100%乙醇;（C）100%乙醇:水=30:70,发现A组分的抑制活性最强,鉴别为三萜类物质。（3）A组分经半制备高效液相分离,得到11个组分,其中A1和A4组分有很强抑制活性,抑制率分别为95.10%和91.09%,相对抑制率分别为47.60和36.44。（4）A组分动物试验表明,其降压效果达显著水平（P＜0.05）,降压作用缓慢,持久。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 第一章 文献综述
• 1.1 高血压病概况
• 1.2 血管紧张素转化酶（ACE）和酶抑制剂（ACEI）的研究进展
• 1.2.1 ACE的生物学特性
• 1.2.2 ACE活力的检测方法研究概况
• 1.2.3 ACEI的种类
• 1.2.4 ACEI的药理作用及副作用
• 1.2.5 天然产物中的ACEI研究概况
• 1.3 山楂的研究进展
• 1.3.1 山楂化学成分的研究
• 1.3.2 山楂药理作用的研究
• 第二章 引言
• 2.1 研究目的和意义
• 2.2 主要研究内容
• 第三章 抑制ACE活性的中药筛选
• 3.1 实验材料
• 3.1.1 主要实验材料和试剂
• 3.1.2 主要实验仪器及设备
• 3.2 实验方法
• 3.2.1 实验试剂的配制
• 3.2.2 检测方法的建立
• 3.2.3 中药提取物抑制活性检测
• 3.2.4 中药提取物的制备
• 3.2.5 山楂乙醇提取物不同浓度对ACE的作用
• 3.2.6 统计分析
• 3.3 实验结果
• 3.3.1 马尿酸的检测波长
• 3.3.2 流动相的确定
• 3.3.3 检测方法的线性关系及检测限
• 3.3.4 回收率及精密度试验
• 3.3.5 100味中药筛选结果
• 3.3.6 山楂乙醇提取物不同浓度对ACE的作用结果
• 3.4 小结与讨论
• 第四章 山楂活性部位的筛选和硅胶柱分离
• 4.1 实验材料
• 4.1.1 主要实验材料和试剂
• 4.1.2 主要实验仪器及设备
• 4.2 实验方法
• 4.2.1 检测抑制剂对ACE的抑制活性
• 4.2.2 石油醚提取
• 4.2.3 乙酸乙酯提取
• 4.2.4 丙酮提取
• 4.2.5 硅胶柱分离丙酮提取物
• 4.2.6 抑制剂不同浓度对ACE的作用
• 4.2.7 硅胶柱分离的高活性组分A的显色鉴定
• 4.2.8 统计分析
• 4.3 实验结果
• 4.3.1 山楂不同极性提取物对ACE的抑制活性
• 4.3.2 丙酮提取物不同浓度对ACE的作用结果
• 4.3.3 硅胶柱分离结果
• 4.3.4 A组分不同浓度对ACE的作用结果
• 4.3.5 A组分显色反应结果
• 4.4 小结与讨论
• 第五章 半制备高效液相色谱法分离山楂活性部位
• 5.1 实验材料
• 5.1.1 主要试验材料和试剂
• 5.1.2 主要实验仪器及设备
• 5.2 实验方法
• 5.2.1 测定抑制剂对ACE的抑制活性
• 5.2.2 硅胶柱分离物的制备
• 5.2.3 半制备高效液相的分离制备
• 5.2.4 抑制剂不同浓度对ACE的作用
• 5.2.5 统计分析
• 5.3 实验结果
• 5.3.1 流动相和检测波长的确定
• 5.3.2 制备组分对ACE的抑制作用
• 5.3.3 抑制剂不同浓度对ACE的作用结果
• 1紫外光谱分析'>5.3.4 样品A₁紫外光谱分析
• 5.4 小结与讨论
• 第六章 山楂高活性部位对高血压大鼠的降压实验研究
• 6.1 实验材料
• 6.1.1 主要试验材料及试剂
• 6.1.2 主要试验仪器及设备
• 6.2 实验方法
• 6.2.1 受试物
• 6.2.2 动物实验
• 6.2.3 统计分析
• 6.3 实验结果
• 6.3.1 血压体外检测结果
• 6.3.2 血清ACE活性测定结果
• 6.4 小结与讨论
• 第七章 结论
• 7.1 抑制ACE活性的中药筛选
• 7.2 山楂活性部位的筛选和硅胶柱分离
• 7.2.1 丙酮提取物的相对抑制率显著高于其它溶剂提取物
• 7.2.2 硅胶柱分出的A组分抑制效果最好
• 7.3 半制备高效液相色谱法分离山楂活性部位
• 7.4 山楂高活性部位对高血压大鼠的降压实验研究
• 参考文献
• 致谢
• 在学期间发表论文的情况