水产品中四环素类和氟喹诺酮类药物残留的同时检测

论文摘要

兽药残留是指给动物使用药物后蓄积在细胞或组织内的药物原形、代谢产物。目前市场上常见的兽药有以下几大类:四环素类、氟喹诺酮类、大环内酯类、磺胺类、硝基呋喃类和硝基咪唑类等。其中最常用的有四环素类、氟喹诺酮类和大环内酯类等。通常对兽药残留检测主要有以下几种方法:放射免疫法、酶联免疫法、微生物法、高效液相色谱法和液质联用法等。其中高效液相色谱法和液质联用法因其灵敏度高、稳定性好而成为残留检测的常用或标准方法。为实现高通量快速分析,多残留、多类属同时检测的方法研究成为热点。本论文旨在建立水产品中四环素类和氟喹诺酮类抗生素残留的同时提取、净化和色谱测定的检测方法。主要进行了以下几方面的研究:1)考察色谱柱,流动相组成、盐浓度、pH值,色谱柱温对四环素类和氟喹诺酮类抗生素的保留及分离的影响,采用紫外检测,建立这两类药物标准品的高效液相色谱分离检测方法。同时对样品的提取和净化条件进行优化,最终建立HPLC分析方法。用紫外检测器检测时,四环素类的检出限为0.0355～0.0509 mg/kg,定量限为0.118～0.169 mg/kg,线性范围为0.2～10 mg/L;氟喹诺酮类的检出限为0.0105～0.0138 mg/kg,定量限为0.0350～0.0460mg/kg,线性范围为0.1～10 mg/L。方法的平均加标回收率为80.8～90.5%。2)通过考察流动相、锥孔电压等因素对液质联用分离效果的影响,建立这两类药物标准品的LC-MS分离检测方法。结合1)中样品前处理方法,最终建立LC-MS分析方法。用MS进行检测时,四环素类检出限为0.0215～0.0426 mg/kg,定量限为0.0645～0.128 mg/kg,线性范围为0.2～10 mg/L;氟喹诺酮类的检出限为0.0100～0.0118 mg/kg,定量限为0.0300～0.0354mg/kg,线性范围为0.1～10 mg/L。3)在建立HPLC以及LC-MS分析方法之后,采用所建立的方法对土霉素、环丙沙星和恩诺沙星在鲫鱼体内的残留及消除规律进行初步研究。通过上述研究,建立了水产品中四环素类和氟喹诺酮类抗生素的HPLC和LC-MS分析方法。同时对其中几种药物在鲫鱼体内的残留进行初步研究。作者希望通过自己的研究对我国的水产品安全及其出口做出有益的贡献。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 第一章 绪论
• 1.1 引言
• 1.2 残留分析原理
• 1.2.1 分离
• 1.2.2 检测
• 1.3 四环素类和氟喹诺酮类研究概况综述
• 1.3.1 四环素类和氟喹诺酮类简介
• 1.3.2 样品前处理方法简述
• 1.3.3 提取方法
• 1.3.4 样品净化
• 1.3.5 浓缩与富集
• 1.3.6 检测技术
• 1.4 残留检测方法的发展与展望
• 1.5 分配色谱简介
• 1.5.1 分配原理
• 1.5.2 载体、固定相、流动相和溶质的保留
• 1.6 立题依据和研究内容
• 第二章 HPLC 分析方法的建立
• 2.1 实验部分
• 2.1.1 仪器、试剂和材料
• 2.1.2 HPLC 色谱条件
• 2.1.3 样品提取
• 2.1.4 样品净化
• 2.1.5 定性定量分析
• 2.2 结果与讨论
• 2.2.1 检测波长的选择
• 2.2.2 HPLC 色谱条件的优化
• 2.2.3 样品提取条件的优化
• 2.2.4 样品净化方式的选择
• 2.2.5 标准工作曲线及线性范围
• 2.2.6 方法的回收率和精密度
• 2.2.7 方法的检出限与定量限
• 2.2.8 样品分析
• 2.3 本章小结
• 第三章 LC—MS 分析方法的建立
• 3.1 实验原理
• 3.1.1 ESI 原理
• 3.1.2 ESI 实验条件优化
• 3.2 实验部分
• 3.2.1 实验仪器与试剂
• 3.2.2 LC-MS 操作条件
• 3.2.2 样品提取方法
• 3.2.3 样品净化方法
• 3.2.4 定性定量分析
• 3.3 结果与讨论
• 3.3.1 流动相组成的确定
• 3.3.2 流动相的梯度优化
• 3.3.3 锥孔电压的优化
• 3.3.4 标准工作曲线及线性范围
• 3.3.5 方法的回收率和精密度
• 3.3.6 方法的检出限和定量限
• 3.3.7 LC-MS 法与HPLC 法的比较
• 3.4 本章小结
• 第四章 TCS 和FQS 在鲫鱼体内消除规律的初步研究
• 4.1 实验部分
• 4.1.1 仪器和试剂
• 4.1.2 样品提取方法
• 4.1.3 样品净化方法
• 4.1.4 HPLC 色谱条件
• 4.1.5 LC-MS 操作条件
• 4.1.6 前期准备
• 4.1.7 饲养试验
• 4.1.8 样品采集方法
• 4.2 结果与讨论
• 4.2.1 HPLC 法检测样品
• 4.2.2 LC-MS 法定性验证
• 4.2.3 残留及消除规律
• 4.3 本章小结
• 第五章 对本课题的总结和展望
• 5.1 对本课题的总结
• 5.2 本实验的不足
• 致谢
• 参考文献
• 附录：作者在攻读硕士学位期间发表的论文