板蓝根、黄芪和淫羊藿复合多糖注射剂的制备及体外抗病毒作用研究

论文摘要

扶正解毒散处方被2000年版兽药典收载成中药成方制剂,具有一定的抗病毒作用,尤其是对鸡的传染性法氏囊病有很好的疗效。本试验是利用扶正解毒散抗病毒作用结合注射剂药效迅速、生物利用度、节省资源、提高利用率、减少服用剂量等优点,从扶正解毒散中提取植物多糖成分,制作成注射剂,用于病毒病的治疗。用蒽酮-硫酸法测定多糖含量,以提取物中多糖含量为指标,筛选多糖提取的最佳方法及方式、复合多糖注射剂的最佳PH和最佳增溶剂。参照2010年版《中国药典》和部颁标准规定的质量标准对自制复合多糖注射剂进行质量检查和安全性检查。利用MTT法,测定自制复合多糖注射剂对鸡胚成纤维细胞的毒性、对鸡脾脏淋巴细胞的增殖作用和对IBDV和NDV的抑制作用、阻断作用及直接杀灭作用。最佳提取方法及方式为:用闪式提取结合水煮法直接提取复方多糖且多糖含量为93.819%。多糖注射液的最佳PH值为6,最佳增溶剂为泊洛沙姆。自制复合多糖注射剂为淡棕黄色的澄明液体,经质量检查和安全性检查,各项指标均合格,6个月内有效成分含量、PH值等各项指标基本稳定。自制复合多糖注射剂对鸡胚成纤维细胞的半数致死量为1.256E4μg/mL;50μg/mL的复合多糖注射剂最鸡脾脏淋巴细胞的增殖作用最明显,增殖率为130.42%;对IBDV和NDV均有直接杀灭作用,能够有效的阻断和抑制IBDV和NDV对体外培养CEF细胞的感染。

论文目录

• 致谢
• 摘要
• 文献综述
• 1 中药注射剂的发展现状
• 1.1 中药注射剂的定义
• 1.2 中药注射剂的分类及特点
• 1.2.1 中药注射剂可以分为四大类
• 1.2.2 中药注射剂的特点
• 1.3 中药注射剂质量控制的相关政策法规
• 1.4 中药注射剂的开发现状
• 2 不良反应的主要临床表现
• 3 不良反应的原因
• 3.1 药材本身
• 3.2 辅料的选择
• 3.3 生产工艺
• 3.4 质量标准
• 3.5 配伍不当
• 4 解决对策
• 4.1 重视对现有剂型及辅料的监管和开发性能优良的新辅料
• 4.2 生产过程
• 4.3 质量评价
• 4.4 临床使用
• 4.5 中药注射剂安全性文献数据库建立及特色标准物质库
• 5 发展趋势与展望
• 试验一 复合多糖注射剂的制备
• 1 材料与方法
• 1.1 材料
• 1.1.1 药材
• 1.1.2 主要试剂及其配制
• 1.1.3 主要仪器
• 1.2 方法
• 1.2.1 多糖提取的方法
• 1.2.1.1 多糖含量的测定
• 1.2.2 复方多糖提取方式的选择
• 1.2.3 不同PH 条件下复合多糖水溶液的热降解动力学研究
• 1.2.4 辅料的筛选
• 1.2.5 注射剂的制备
• 3 结果与分析
• 3.1 不同提取方法多糖的提取率和净含量
• 3.2 不同提取方式多糖的提取率和净含量
• 3.3 不同PH 条件下复合多糖溶液的热降解动力学研究结果
• 3.4 辅料筛选研究结果
• 3.5 复合多糖注射剂制备
• 4 讨论
• 试验二 复合多糖注射剂的质量检测
• 1 材料与方法
• 1.1 材料
• 1.1.1 试剂
• 1.1.2 实验动物
• 1.1.3 仪器
• 1.2 方法
• 1.2.1 杂质或异物检查
• 1.2.2 安全性检查
• 1.2.3 室温留样观察
• 2 结果与分析
• 2.1 杂质或异物检查结果
• 2.1.1 澄明度检查结果
• 2.1.2 鞣质检查、草酸盐检查、树脂检查结果
• 2.1.3 蛋白质检查结果
• 2.2 安全性检查结果
• 2.2.1 无菌检查结果
• 2.2.2 热原检查结果
• 2.2.3 过敏反应检查结果
• 2.2.4 肌肉刺激性检查结果
• 2.2.5 溶血与凝聚检查结果
• 2.2.6 急性毒性试验结果
• 2.2.7 异常毒性检查结果
• 2.2.8 长期毒性试验结果
• 2.3 室温留样观察
• 3 讨论
• 试验三 复合多糖注射液体外抗IBDV 和NDV 作用的研究
• 1 材料与方法
• 1.1 材料
• 1.1.1 实验动物及病毒
• 1.1.2 试验药品
• 1.1.3 主要试剂
• 1.1.4 主要仪器设备
• 1.2 方法
• 1.2.1 注射剂对鸡胚成纤维细胞毒性的测定
• 1.2.2 注射剂对鸡脾脏淋巴细胞增殖的影响
• 1.2.3 复合多糖注射剂对IBDV 的影响
• 1.2.4 复合多糖注射剂对NDV 影响
• 2 结果与分析
• 2.1 不同浓度注射剂对鸡胚成纤维细胞的毒性作用
• 2.2 不同浓度注射剂对鸡脾脏淋巴细胞增殖的影响
• 2.3 复合多糖注射剂体外抗IBDV 作用的研究结果
• 2.3.1 复合多糖注射剂对IBDV 的阻断作用测定结果
• 2.3.2 复合多糖注射剂对IBDV 的抑制作用测定结果
• 2.3.3 复合多糖注射剂对 IBDV 的直接杀灭作用测定结果
• 2.4 复合多糖注射剂体外抗 NDV 作用的研究结果
• 2.4.1 复合多糖注射剂对 NDV 的阻断作用测定结果
• 2.4.2 复合多糖注射剂对 NDV 的抑制作用测定结果
• 2.4.3 复合多糖注射剂对 NDV 的直接杀灭作用测定结果
• 3.讨论
• 参考文献
• ABSTRACT