小鼠卵丘细胞自体与异体核移植的探索

小鼠卵丘细胞自体与异体核移植的探索

论文摘要

本研究共分3个部分。首先是建立常规的小鼠体细胞核移植方法,具体以B6D2F1小鼠卵丘细胞作为核供体,用piezo操作系统把PVP处理的供体细胞核直接注入去核的同品系小鼠MII卵母细胞质中获得重构胚胎,用SrCl2激活后,再用CZB溶液培养至囊胚阶段。在此基础上,设计了下面的两组实验:a、把同一只小鼠的卵丘细胞核注射到同一只小鼠的去核卵母细胞内(简称自体克隆);b、把一只小鼠的卵丘细胞注入另一只小鼠的去核卵母细胞内(简称异体克隆),然后比较两种重组胚的体外发育能力。结果发现,自体克隆与异体克隆胚胎形成原核的比例(83.2%,89.9%vs 95.8%)和卵裂比例(98.4%,93.6%vs 98.5%)与孤雌激活对照间没有差异(p>0.05)。继续培养发现,自体和异体克隆胚胎发育至4-细胞(82.9%,80.8%vs 95.7%)、桑椹胚(75.2%,70.4%vs 92.8%)、和囊胚(31.8%,25.6%vs 72.5%)阶段的比例显著低于对照组(p<0.05);两种处理间未见任何差异(p>0.05)。最后,进行了克隆胚胎的输卵管和子宫移植,其中自体克隆组移植了77枚原核胚和37枚囊胚,,异体克隆组移植了68枚原核胚和28枚囊胚,均无克隆小鼠出生。初步结果表明,核/质基因型的相同与否不影响克隆胚胎的体外发育能力,对克隆胚胎继续发育的影响还需深入的研究。

论文目录

  • 中文摘要
  • 缩略语表
  • 第一章 文献综述 小鼠体细胞核移植的方法及应用
  • 1 小鼠克隆的方法与步骤
  • 2 克隆小鼠在基础研究中的应用
  • 3 结语
  • 第二章 研究论文 小鼠卵丘细胞自体和异体核移植的探索
  • 1 材料和方法
  • 2 实验设计
  • 3 实验结果
  • 4 讨论
  • 参考文献
  • 致谢
  • 相关论文文献

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    小鼠卵丘细胞自体与异体核移植的探索
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