赵旭东:美国白蛾丝氨酸蛋白酶基因HcSP1的克隆、时空表达及对取食不同寄主植物的表达响应论文

赵旭东:美国白蛾丝氨酸蛋白酶基因HcSP1的克隆、时空表达及对取食不同寄主植物的表达响应论文

本文主要研究内容

作者赵旭东,孙宇航,陈昌宇,田朔,陶蓉,郝德君(2019)在《美国白蛾丝氨酸蛋白酶基因HcSP1的克隆、时空表达及对取食不同寄主植物的表达响应》一文中研究指出:【目的】为探究美国白蛾Hyphantria cunea在寄主转换过程中的消化生理机制奠定基础。【方法】通过筛选美国白蛾cDNA文库,克隆美国白蛾丝氨酸蛋白酶基因。荧光定量PCR检测该基因在美国白蛾不同发育阶段的表达特性;半定量RT-PCR和荧光定量PCR分别检测该基因在美国白蛾5龄幼虫体内不同组织中的分布及表达特性;荧光定量PCR检测取食不同寄主植物(美洲黑杨Populus deltoides,日本晚樱Cerasus serrulata var.lannesiana,山樱花Cerasus serrulata,喜树Camptotheca acuminata和法国梧桐Platanus orientalis)叶片后美国白蛾4龄幼虫中该基因的表达量。【结果】克隆获得美国白蛾丝氨酸蛋白酶基因HcSP1(GenBank登录号:MH663425),开放阅读框长882 bp,编码293个氨基酸,预测分子量为30.5 kD,理论等电点预测为9.86。编码蛋白N末端疏水区包含15个氨基酸组成的信号肽;具有丝氨酸蛋白酶的典型特征,即氨基酸序列中具有组氨酸(His)、天门冬氨酸(Asp)以及丝氨酸(Ser)残基组成的酶活性催化中心三元件;具有明显的胰蛋白酶前体的特征,即具有信号肽、激活肽以及胰蛋白酶N末端保守的起始氨基酸序列(IVGG)。NCBI BLAST比对结果表明美国白蛾HcSP1与其他鳞翅目昆虫丝氨酸蛋白酶的氨基酸序列一致性在50%~70%之间。荧光定量PCR结果显示,HcSP1在美国白蛾幼虫不同发育阶段的相对表达量呈现动态的变化,并随着幼虫虫龄的增长呈现上升趋势。半定量RT-PCR及荧光定量PCR结果显示,HcSP1在美国白蛾5龄幼虫头部、唾液腺、中肠、脂肪体、表皮、马氏管和血淋巴等组织中均有表达且在幼虫中肠中表达量极高。与取食其他寄主植物叶片相比,美国白蛾取食喜树叶片后HcSP1的相对表达量明显升高,并显著高于取食其他寄主植物。【结论】本研究克隆获得美国白蛾丝氨酸蛋白酶基因HcSP1,检测了其在美国白蛾不同发育阶段、不同组织以及取食不同寄主植物叶片后的表达量,为探究美国白蛾在寄主转换过程中消化生理的机制奠定基础,也为美国白蛾的防治提供新的思路。

Abstract

【mu de 】wei tan jiu mei guo bai e Hyphantria cuneazai ji zhu zhuai huan guo cheng zhong de xiao hua sheng li ji zhi dian ding ji chu 。【fang fa 】tong guo shai shua mei guo bai e cDNAwen ku ,ke long mei guo bai e si an suan dan bai mei ji yin 。ying guang ding liang PCRjian ce gai ji yin zai mei guo bai e bu tong fa yo jie duan de biao da te xing ;ban ding liang RT-PCRhe ying guang ding liang PCRfen bie jian ce gai ji yin zai mei guo bai e 5ling you chong ti nei bu tong zu zhi zhong de fen bu ji biao da te xing ;ying guang ding liang PCRjian ce qu shi bu tong ji zhu zhi wu (mei zhou hei yang Populus deltoides,ri ben wan ying Cerasus serrulata var.lannesiana,shan ying hua Cerasus serrulata,xi shu Camptotheca acuminatahe fa guo wu tong Platanus orientalis)xie pian hou mei guo bai e 4ling you chong zhong gai ji yin de biao da liang 。【jie guo 】ke long huo de mei guo bai e si an suan dan bai mei ji yin HcSP1(GenBankdeng lu hao :MH663425),kai fang yue dou kuang chang 882 bp,bian ma 293ge an ji suan ,yu ce fen zi liang wei 30.5 kD,li lun deng dian dian yu ce wei 9.86。bian ma dan bai Nmo duan shu shui ou bao han 15ge an ji suan zu cheng de xin hao tai ;ju you si an suan dan bai mei de dian xing te zheng ,ji an ji suan xu lie zhong ju you zu an suan (His)、tian men dong an suan (Asp)yi ji si an suan (Ser)can ji zu cheng de mei huo xing cui hua zhong xin san yuan jian ;ju you ming xian de yi dan bai mei qian ti de te zheng ,ji ju you xin hao tai 、ji huo tai yi ji yi dan bai mei Nmo duan bao shou de qi shi an ji suan xu lie (IVGG)。NCBI BLASTbi dui jie guo biao ming mei guo bai e HcSP1yu ji ta lin chi mu kun chong si an suan dan bai mei de an ji suan xu lie yi zhi xing zai 50%~70%zhi jian 。ying guang ding liang PCRjie guo xian shi ,HcSP1zai mei guo bai e you chong bu tong fa yo jie duan de xiang dui biao da liang cheng xian dong tai de bian hua ,bing sui zhao you chong chong ling de zeng chang cheng xian shang sheng qu shi 。ban ding liang RT-PCRji ying guang ding liang PCRjie guo xian shi ,HcSP1zai mei guo bai e 5ling you chong tou bu 、tuo ye xian 、zhong chang 、zhi fang ti 、biao pi 、ma shi guan he xie lin ba deng zu zhi zhong jun you biao da ju zai you chong zhong chang zhong biao da liang ji gao 。yu qu shi ji ta ji zhu zhi wu xie pian xiang bi ,mei guo bai e qu shi xi shu xie pian hou HcSP1de xiang dui biao da liang ming xian sheng gao ,bing xian zhe gao yu qu shi ji ta ji zhu zhi wu 。【jie lun 】ben yan jiu ke long huo de mei guo bai e si an suan dan bai mei ji yin HcSP1,jian ce le ji zai mei guo bai e bu tong fa yo jie duan 、bu tong zu zhi yi ji qu shi bu tong ji zhu zhi wu xie pian hou de biao da liang ,wei tan jiu mei guo bai e zai ji zhu zhuai huan guo cheng zhong xiao hua sheng li de ji zhi dian ding ji chu ,ye wei mei guo bai e de fang zhi di gong xin de sai lu 。

论文参考文献

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  • 论文详细介绍

    论文作者分别是来自昆虫学报的赵旭东,孙宇航,陈昌宇,田朔,陶蓉,郝德君,发表于刊物昆虫学报2019年02期论文,是一篇关于美国白蛾论文,丝氨酸蛋白酶论文,胰蛋白酶论文,序列分析论文,时空表达论文,寄主植物论文,昆虫学报2019年02期论文的文章。本文可供学术参考使用,各位学者可以免费参考阅读下载,文章观点不代表本站观点,资料来自昆虫学报2019年02期论文网站,若本站收录的文献无意侵犯了您的著作版权,请联系我们删除。

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