论文题目: pEgr-sPEX辐射诱导表达特性及其抗肿瘤作用的实验研究
论文类型: 博士论文
论文专业: 耳鼻咽喉科学
作者: 王贵全
导师: 董震
关键词: 基因,启动子,重组质粒,转染,电离辐射,抗肿瘤作用,血管生成
文献来源: 吉林大学
发表年度: 2005
论文摘要: 恶性肿瘤基因放射治疗是近年来辐射肿瘤学新的发展方向,本研究根据电离辐射可诱导早期生长反应-1(Egr-1)基因启动子激活,启动下游基因表达增强的分子机制,以及PEX 基因的抗肿瘤作用,在克隆鼠源性的PEX 基因的基础上,构建了pEgr-sPEX 重组表达载体,观察其在肿瘤细胞中辐射诱导表达特性,通过体内外实验探讨PEX 基因联合辐射对肿瘤细胞生长、侵袭能力的影响及其作用机制。结果表明:pEgr-sPEX 重组质粒具有辐射诱导激活,启动下游基因PEX 表达增强的特性; pEgr-sPEX 重组质粒体外转染联合辐射能够降低B16F10 细胞侵袭能力和抑制HUVEC 小管形成能力;PEX 基因具有阻滞I 型胶原导致的MMP-2 酶原活化的作用; pEgr-sPEX 重组质粒基因-放射治疗具有提高放疗疗效的作用;PEX 基因联合辐射具有抑制肿瘤血管生成的作用,并且二者具有协同效应。本研究为临床基因-放射治疗奠定了重要理论基础和实验依据。
论文目录:
英文缩写词
第一章 绪论
1. 基因治疗研究进展及发展前景
1.1 基因治疗的基本概念
1.2 基因治疗的研究现状
1.3 基因治疗的基因导入系统
1.4 基因治疗中有待解决的关键问题
1.5 基因治疗的应用前景
2. 肿瘤基因治疗及其研究进展
2.1 肿瘤基因治疗的分类
2.2 肿瘤基因治疗存在的问题及应用前景
3. 肿瘤的抗血管生成基因治疗及其研究进展
3.1 肿瘤血管生成及其调控
3.2 血管生成是肿瘤生长的关键
3.3 血管生成与肿瘤转移
3.4 抗血管生成治疗肿瘤
4. MMPs 及其抑制剂对肿瘤侵袭、转移作用的实验研究
4.1 基质金属蛋白酶分类、结构及其性质
4.2 基质金属蛋白酶的调控机制
4.3 MMPs 及其抑制剂在肿瘤生长、侵袭和转移中的作用
5. 恶性肿瘤基因-放射治疗及其研究进展
5.1 肿瘤基因-放射治疗的理论
5.2 Egr-1 基因的结构及其辐射诱导特性
5.3 辐射诱导 Egr-1 启动下游基因表达的研究进展
5.4 辐射诱导启动子 Egr-1 的优化
6. 本研究的立题依据
第二章 材料与方法
1. 实验材料
1.1 试剂
1.2 主要器材
1.3 主要仪器
1.4 质粒与菌种
1.5 细胞株
1.6 实验动物
1.7 照射条件
2. 实验方法
2.1 鼠sPEX cDNA 片段的获得
2.2 表达载体构建
2.3 目的cDNA 的表达
2.4 Boyden 小室侵袭实验
2.5 脐静脉内皮细胞(HUVEC)小管形成实验
2.6 动物模型的建立
2.7 RT-PCR 法检测瘤内目的基因mRNA 水平
2.8 肿瘤组织微血管密度(MVD)的测定
2.9 明胶酶谱分析
2.10 统计学方法
第三章 实验结果
1. 鼠sPEX cDNA 片段的获得及序列分析
2. pEgr-sPEX 重组质粒的构建与鉴定
3. 重组质粒pEgr-sPEX 的辐射诱导表达特性
3.1 不同剂量X 射线照射后PEX 的表达水平
3.2 2Gy X 射线照射后不同时间PEX 的表达水平
4. pEgr-sPEX 重组质粒体外转染联合辐射对 B16F10 细胞 侵袭能力的影响
5. pEgr-sPEX 重组质粒体外转染联合辐射对脐静脉内皮细胞(HUVEC)小管形成的影响
6. pEgr-sPEX 重组质粒体外转染联合辐射对 B16F10 细胞MMP-2 活化的影响
7. pEgr-sPEX 重组质粒体内基因-放射治疗的抗肿瘤作用及其作用机制
7.1 pEgr-sPEX 基因-放射治疗对小鼠移植肿瘤生长的影响
7.2 辐射诱导肿瘤局部PEX mRNA 表达水平
7.3 pEgr-sPEX 基因-放射治疗对鼠黑色素瘤组织内微血管的影响
第四章 讨论
1. 基因克隆及其重组真核表达质粒的构建
1.1 目的基因sPEX 的克隆
1.2 pEgr-sPEX 真核表达质粒的构建
2. pEgr-sPEX 重组质粒的辐射诱导表达特性
3. pEgr-sPEX 重组质粒体外转染联合辐射对B16F10 细胞侵袭能力和人脐静脉内皮细胞(HUVEC)小管形成的影响
3.1 pEgr-sPEX 重组质粒体外转染联合辐射对B16F10 细胞侵袭能力的影响
3.2 pEgr-sPEX 重组质粒体外转染联合辐射对脐静脉内皮细胞小管形成的影响
4. pEgr-sPEX 重组质粒体外转染联合辐射对B16F10 细胞MMP-2 活化的影响
5. pEgr-sPEX 重组质粒体内基因-放射治疗的抗肿瘤作用
6. pEgr-sPEX 重组质粒基因-放射治疗抗肿瘤作用机制
6.1 辐射诱导肿瘤局部 PEX mRNA 表达水平
6.2 pEgr-sPEX 基因-放射治疗对鼠黑色素瘤组织内微血管的影响
结论
参考文献
博士期间发表的文章
论文摘要(中文)
论文摘要(英文)
致谢
发布时间: 2005-08-26
参考文献
- [1].pEgr-IL18-B7.1双基因联合辐射抗肿瘤作用及其机制的探讨[D]. 金光辉.吉林大学2004
- [2].rmFⅦ-Gen复合物靶向TF治疗肿瘤的实验研究[D]. 杨峥嵘.第三军医大学2004
- [3].肿瘤增敏药物的增敏作用及机制研究[D]. 孔肇路.复旦大学2004
- [4].人核糖核酸酶抑制因子对肿瘤细胞生长、凋亡、转移的影响及其机制的研究[D]. 陈俊霞.大连医科大学2004
- [5].热休克途径在肿瘤治疗中的应用[D]. 王晋慧.中国科学院研究生院（上海生命科学研究院）2004
- [6].中药苦参碱抗肿瘤作用的实验研究[D]. 马玲娣.重庆医科大学2005
- [7].IL-2基因修饰的肿瘤细胞来源的Exosomes的抗肿瘤作用及相关机制研究[D]. 杨云山.浙江大学2005
- [8].影响上海市肿瘤患者生活质量因素的研究[D]. 邹建军.第二军医大学2005
- [9].热休克蛋白70、90α在胃癌组织中表达及热休克蛋白70、90α多肽复合物疫苗抗肿瘤作用的实验研究[D]. 张剑军.中国医科大学2004
- [10].肺癌引流区域淋巴结细胞对自体肿瘤的作用机制研究[D]. 何明.河北医科大学2006
相关论文
- [1].重组pEgr-Endostatin-EGDP质粒的辐射诱导特性及其在基因—放射治疗中的应用[D]. 吴德生.汕头大学2007
- [2].pshuttle-Egr1-shTRAIL-shES双基因—放射治疗的体外抑瘤效应实验研究[D]. 李艳博.吉林大学2009
- [3].鼻咽癌的基因—放射治疗实验研究[D]. 唐瑶云.中南大学2003
- [4].放射线诱导性自杀基因的构建及其体内外治疗肝癌的实验研究[D]. 范永刚.南京医科大学2003
- [5].辐射诱导pEgr-p16的表达及抑瘤作用的实验研究[D]. 刘建香.中国人民解放军军事医学科学院2004
- [6].pEgr-IL18-B7.1双基因联合辐射抗肿瘤作用及其机制的探讨[D]. 金光辉.吉林大学2004
- [7].pEgr-IFNγ-Endostatin双基因-放射治疗的抑瘤效应及机制的研究[D]. 杨巍.吉林大学2005
- [8].pcEgr-hp53基因辐射诱导表达特性及其抑瘤作用的实验研究[D]. 董丽华.吉林大学2006
- [9].pEgr-IL18-B7.2双基因联合辐射抗肿瘤作用及其机制的探讨[D]. 杨建征.吉林大学2006
- [10].由Egr-1基因启动子调控TK自杀基因治疗胰腺癌的实验研究[D]. 刘金龙.南京医科大学2006