达乌尔黄鼠冬眠过程中细胞因子变化规律的研究

论文摘要

冬眠作为一种复杂的生理适应现象,与免疫系统的调节是分不开的。本项研究用大鼠的MILLIPLEXTMMAP细胞因子检测试剂盒和液相芯片扫描仪,ELISA试剂盒双抗体夹心法两种方法检测了达乌尔黄鼠不同状态的24种细胞因子,即IL-1α、IL-1β、IL-2、IL-4、IL-5、IL-6、IL-9、IL-10、IL-12（p70）、IL-13、IL-17、IL-18、EGF、Eotaxin、G-CSF、GM-CSF、GRO/KC、IP-10、MCP-1、MIP-1α、TNF-α、VEGF、Rantes、Leptin。得到了两种方法细胞因子的浓度值,能够充分地反应达乌尔黄鼠体内细胞因子的变化情况,证实了用大鼠的细胞因子试剂盒检测达乌尔黄鼠的细胞因子是可行的。实验结果表明影响动物冬眠的细胞因子主要为:Leptin、Rantes、MIP-1α、VEGF。达乌尔黄鼠在冬眠诱导过程中体温逐渐降低,到深入冬眠期,达乌尔黄鼠的体温降到最低,腹温平均6.8℃,肛温平均6.2℃,随着光照培养箱温度升高,诱导达乌尔黄鼠出眠,它的体温也逐渐升至正常水平。达乌尔黄鼠在夏季和秋季大量的觅食,贮存能量,体重增加,在冬眠过程中,自发的调节其代谢率,靠分解贮存的脂肪来维持漫长的冬季的能量消耗,经过冬眠过程,达乌尔黄鼠的体重普遍下降了100g左右。达乌尔黄鼠冬眠移植的验证实验中,自体移植和异体移植两种方法,达乌尔黄鼠都没有死亡现象。两种方法的细胞因子检测结果无太大差别,两种方法移植前后体温的变化也是相同的,实验证明两种方法本身并没有对冬眠移植的最终结果产生大的影响,都是可行的。冬眠移植2天后达乌尔黄鼠的体温普遍降低,冬眠移植后10天,6只黄鼠中有4只进入了冬眠,移植成功率达到了67%。从移植后冬眠组和不冬眠组的对比中发现IL-6和IL-17两种细胞因子对冬眠移植的最终结果影响是最大的。

论文目录

• 中文摘要
• ABSTRACT
• 第一章 前言
• 1.1 冬眠概述
• 1.2 细胞因子与细胞因子网络概述
• 1.3 冬眠机理的研究进展
• 1.4 课题开展的依据和意义
• 1.4.1 课题开展的依据
• 1.4.2 课题开展的意义
• 第二章 材料和方法
• 2.1 实验动物的捕捉和饲养
• 2.1.1 实验动物
• 2.1.2 材料
• 2.1.3 仪器
• 2.1.4 饲养方法及分组
• 2.1.5 冬眠诱导过程中的六种状态
• 2.1.6 冬眠诱导方法
• 2.1.7 冬眠期间的观察方法
• 2.2 取血
• 2.2.1 材料
• 2.2.2 仪器
• 2.2.3 方法
• 2.3 达乌尔黄鼠的体温测量
• 2.3.1 仪器
• 2.3.2 方法
• TMMAP试剂盒对细胞因子的检测'>2.4 利用MILLIPLEX^TMMAP试剂盒对细胞因子的检测
• 2.4.1 液相芯片扫描仪检测的原理
• 2.4.2 材料
• 2.4.3 仪器
• 2.4.4 方法
• 2.5 利用ELISA试剂盒对细胞因子的检测
• 2.5.1 ELISA双抗体夹心法检测的原理
• 2.5.2 材料
• 2.5.3 仪器
• 2.5.4 方法
• 2.6 冬眠移植实验
• 2.6.1 材料
• 2.6.2 仪器
• 2.6.3 冬眠移植方法
• 2.6.4 操作步骤
• 2.6.5 注意事项
• 2.7 结果处理分析及统计方法
• 第三章 结果
• TMMAP试剂盒对细胞因子的检测结果'>3.1 利用MILLIPLEX^TMMAP试剂盒对细胞因子的检测结果
• 3.1.1 达乌尔黄鼠正常状态细胞因子检测结果
• 3.1.2 达乌尔黄鼠冬眠状态细胞因子检测结果
• 3.1.3 冬眠状态与正常状态达乌尔黄鼠细胞因子的对比结果
• 3.2 利用ELISA试剂盒对细胞因子的检测结果
• 3.2.1 细胞因子标准曲线的制作
• 3.2.2 冬眠过程中12种细胞因子的测量结果
• 3.2.3 冬眠过程中六种状态细胞因子比较分析
• 3.2.4 冬眠过程中六种状态细胞因子统计学检验
• 3.2.5 冬眠状态与冷暴露状态细胞因子浓度对比分析
• 3.3 冬眠移植实验结果
• 3.3.1 冬眠移植后2天细胞因子的检测结果
• 3.3.2 冬眠移植后10天细胞因子的检测结果
• 3.4 达乌尔黄鼠的体温测量结果
• 3.4.1 达乌尔黄鼠冬眠过程中体温测量结果
• 3.4.2 达乌尔黄鼠冬眠移植前后体温测量结果
• 3.5 达乌尔黄鼠的体重测量结果
• 第四章 讨论与分析
• TMMAP试剂盒对细胞因子的检测结果分析'>4.1 利用MILLIPLEX^TMMAP试剂盒对细胞因子的检测结果分析
• 4.2 利用ELISA试剂盒对细胞因子的检测结果分析
• 4.2.1 冬眠过程中12种细胞因子的检测结果分析
• 4.2.2 冬眠过程中六种状态细胞因子比较分析
• 4.2.3 冬眠状态与冷暴露状态细胞因子浓度对比分析
• 4.3 冬眠移植实验结果分析
• 4.3.1 冬眠移植后2天细胞因子的检测结果分析
• 4.3.2 冬眠移植后10天细胞因子的检测结果分析
• 4.4 达乌尔黄鼠的体温测量结果分析
• 4.4.1 达乌尔黄鼠冬眠过程中体温测量结果分析
• 4.4.2 达乌尔黄鼠冬眠移植前后体温测量结果分析
• 4.5 达乌尔黄鼠的体重测量结果分析
• 第五章 结论
• 5.1 证实了用大鼠的细胞因子试剂盒测定达乌尔黄鼠的细胞因子是可行的
• 5.2 影响动物冬眠的细胞因子主要为Leptin、Rantes、MIP-1α、VEGF
• 5.3 成功地完成了冬眠移植的验证实验
• 5.4 发现IL-6 和IL-17这两种细胞因子对冬眠移植的最终结果影响是最大的
• 第六章 创新点及进一步工作设想
• 参考文献
• 发表论文、参加科研情况说明
• 致谢