本文主要研究内容
作者张英朔(2019)在《黄精皂苷的制备、抗癌活性及其机理》一文中研究指出:黄精是我国卫生部认定的药食同源资源,在天然药物和功能食品等领域具有广阔的应用前景。皂苷是黄精中的主要活性物质,由于结构多样,其抗菌、抗肿瘤的机制也各不相同。对这些机制进行研究,将为黄精资源的综合利用提供理论依据和技术支持。本论文以九华黄精为原料,制备了高纯度的薯蓣皂苷和甲基原薯蓣皂苷,并研究了其抑癌活性及相关分子机制,主要研究内容及结果如下:(1)黄精皂苷的分离纯化。使用单因素和响应面优化试验,确定了超声辅助提取黄精皂苷的最佳工艺条件:乙醇浓度78%、料液比1:20 g/mL、超声温度58°C、超声时间75 min,在此条件下的皂苷得率为2.72%;在此基础上,利用硅胶色谱柱、葡聚糖凝胶柱层析技术对提取物中的皂苷进行分离,得到纯度分别为98.05%和95.13%的薯蓣皂苷和甲基原薯蓣皂苷,并使用UPLC-TOF-MS/MS和NMR技术对其结构进行了鉴定。(2)薯蓣皂苷对人肝癌细胞HepG2的抑制及分子机制。细胞活性及周期分析表明,薯蓣皂苷对HepG2细胞的半抑制浓度为8.34μM,可将细胞周期阻滞在G2/M期;当处理浓度为9μM时,早期凋亡细胞比率可达34.0%。薯蓣皂苷通过调节CHK2、p53、p21、CDK1和Cyclin B1等细胞周期相关基因和蛋白的变化,将细胞周期阻滞在G2/M期;通过调节Bak、Bcl-xl、FasL、TNF-R1以及Caspase-3,8,9等基因和蛋白的变化诱导HepG2细胞经线粒体途径和死亡受体途径发生凋亡,此外,PI3K/Akt/mTOR信号通路相关基因、Smac和JNK等也参与了薯蓣皂苷诱导的细胞凋亡;最后,细胞内活性氧水平的积累也可能是诱导细胞凋亡的原因之一。(3)甲基原薯蓣皂苷对人宫颈癌细胞HeLa的抑制及分子机制。细胞活性及周期分析表明,甲基原薯蓣皂苷对Hela细胞的半抑制浓度为18.31μM,并将细胞周期阻滞在G2/M期;当处理浓度为18μM时,细胞凋亡比率高达46.58%。通过检测Bak、Bcl-xl、Fas以及Caspase-3、8、9等基因的mRNA和蛋白水平,以及Caspase-8抑制剂Z-IETD-FMK、Caspase-9抑制剂Z-LEHD-FMK的预处理,证明甲基原薯蓣皂苷可通过线粒体途径和死亡受体途径诱导Hela细胞凋亡,另外,细胞内活性氧水平的升高以及Smac、IAPs、NF-κB和JNK等基因mRNA水平的改变也可能与甲基原薯蓣皂苷诱导的Hela细胞凋亡有关。
Abstract
huang jing shi wo guo wei sheng bu ren ding de yao shi tong yuan zi yuan ,zai tian ran yao wu he gong neng shi pin deng ling yu ju you an kuo de ying yong qian jing 。zao gan shi huang jing zhong de zhu yao huo xing wu zhi ,you yu jie gou duo yang ,ji kang jun 、kang zhong liu de ji zhi ye ge bu xiang tong 。dui zhe xie ji zhi jin hang yan jiu ,jiang wei huang jing zi yuan de zeng ge li yong di gong li lun yi ju he ji shu zhi chi 。ben lun wen yi jiu hua huang jing wei yuan liao ,zhi bei le gao chun du de shu yu zao gan he jia ji yuan shu yu zao gan ,bing yan jiu le ji yi ai huo xing ji xiang guan fen zi ji zhi ,zhu yao yan jiu nei rong ji jie guo ru xia :(1)huang jing zao gan de fen li chun hua 。shi yong chan yin su he xiang ying mian you hua shi yan ,que ding le chao sheng fu zhu di qu huang jing zao gan de zui jia gong yi tiao jian :yi chun nong du 78%、liao ye bi 1:20 g/mL、chao sheng wen du 58°C、chao sheng shi jian 75 min,zai ci tiao jian xia de zao gan de lv wei 2.72%;zai ci ji chu shang ,li yong gui jiao se pu zhu 、pu ju tang ning jiao zhu ceng xi ji shu dui di qu wu zhong de zao gan jin hang fen li ,de dao chun du fen bie wei 98.05%he 95.13%de shu yu zao gan he jia ji yuan shu yu zao gan ,bing shi yong UPLC-TOF-MS/MShe NMRji shu dui ji jie gou jin hang le jian ding 。(2)shu yu zao gan dui ren gan ai xi bao HepG2de yi zhi ji fen zi ji zhi 。xi bao huo xing ji zhou ji fen xi biao ming ,shu yu zao gan dui HepG2xi bao de ban yi zhi nong du wei 8.34μM,ke jiang xi bao zhou ji zu zhi zai G2/Mji ;dang chu li nong du wei 9μMshi ,zao ji diao wang xi bao bi lv ke da 34.0%。shu yu zao gan tong guo diao jie CHK2、p53、p21、CDK1he Cyclin B1deng xi bao zhou ji xiang guan ji yin he dan bai de bian hua ,jiang xi bao zhou ji zu zhi zai G2/Mji ;tong guo diao jie Bak、Bcl-xl、FasL、TNF-R1yi ji Caspase-3,8,9deng ji yin he dan bai de bian hua you dao HepG2xi bao jing xian li ti tu jing he si wang shou ti tu jing fa sheng diao wang ,ci wai ,PI3K/Akt/mTORxin hao tong lu xiang guan ji yin 、Smache JNKdeng ye can yu le shu yu zao gan you dao de xi bao diao wang ;zui hou ,xi bao nei huo xing yang shui ping de ji lei ye ke neng shi you dao xi bao diao wang de yuan yin zhi yi 。(3)jia ji yuan shu yu zao gan dui ren gong geng ai xi bao HeLade yi zhi ji fen zi ji zhi 。xi bao huo xing ji zhou ji fen xi biao ming ,jia ji yuan shu yu zao gan dui Helaxi bao de ban yi zhi nong du wei 18.31μM,bing jiang xi bao zhou ji zu zhi zai G2/Mji ;dang chu li nong du wei 18μMshi ,xi bao diao wang bi lv gao da 46.58%。tong guo jian ce Bak、Bcl-xl、Fasyi ji Caspase-3、8、9deng ji yin de mRNAhe dan bai shui ping ,yi ji Caspase-8yi zhi ji Z-IETD-FMK、Caspase-9yi zhi ji Z-LEHD-FMKde yu chu li ,zheng ming jia ji yuan shu yu zao gan ke tong guo xian li ti tu jing he si wang shou ti tu jing you dao Helaxi bao diao wang ,ling wai ,xi bao nei huo xing yang shui ping de sheng gao yi ji Smac、IAPs、NF-κBhe JNKdeng ji yin mRNAshui ping de gai bian ye ke neng yu jia ji yuan shu yu zao gan you dao de Helaxi bao diao wang you guan 。
论文参考文献
论文详细介绍
论文作者分别是来自合肥工业大学的张英朔,发表于刊物合肥工业大学2019-09-20论文,是一篇关于九华黄精论文,皂苷论文,薯蓣皂苷论文,甲基原薯蓣皂苷论文,细胞凋亡论文,合肥工业大学2019-09-20论文的文章。本文可供学术参考使用,各位学者可以免费参考阅读下载,文章观点不代表本站观点,资料来自合肥工业大学2019-09-20论文网站,若本站收录的文献无意侵犯了您的著作版权,请联系我们删除。
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