解脲脲原体LAMPs通过激活NF-κB诱导小鼠巨噬细胞表达iNOS和凋亡

论文摘要

目的 研究从解脲脲原体（Uu）提取的脂质相关膜蛋白（LAMPs）在体外诱导小鼠巨噬细胞表达诱导性一氧化氮合酶（iNOS）及产生一氧化氮（NO）的水平,研究该膜蛋白能否激活小鼠巨噬细胞中核因子kappa B（NF-κB）及诱导细胞发生凋亡的情况,以便了解Uu潜在的致病性,为进一步探讨Uu LAMPs诱导小鼠巨噬细胞表达iNOS及诱导巨噬细胞发生凋亡的分子机制提供实验依据。 方法 用从Uu提取的LAMPs刺激小鼠巨噬细胞,用Griess试剂测定经刺激后的小鼠巨噬细胞产生的NO水平,以RT-PCR和Western blot方法分析iNOS的表达水平,用细胞免疫组化、间接免疫荧光检测NF-κB的激活,用Western blot检测核提取物中NF-κB蛋白的表达,且利用RT-PCR和Western blot方法检测NF-κB的特异性抑制剂二硫代氨基甲酸吡咯烷（PDTC）和蛋白酶抑制剂放线菌酮（CHX）对iNOS的表达及对NF-κB激活的影响。用细胞凋亡检测试剂盒检测经Uu LAMPs处理的小鼠巨噬细胞的凋亡情况。 结果 Uu LAMPs能诱导小鼠巨噬细胞表达iNOS,且能以时间和剂量依赖方式刺激小鼠巨噬细胞产生NO,当LAMPs的浓度为3μg/mL时产生的NO量最多,为13.56±0.5μmol/L;但当LAMPs从3μg/mL增加到5μg/mL时,NO产生的量反而减少。另外当LAMPs刺激细胞4h后即可从培养基中检测到NO,而刺激32h后产生的NO量则达到高峰。在用该膜蛋白与NF-κB的抑制剂PDTC或蛋白酶抑制剂

论文目录

• 一、主要英文缩写词索引
• 二、中文摘要
• 三、英文摘要
• 四、正文
• 1 前言
• 2 实验材料
• 3 实验方法
• 4 实验结果
• 5 讨论
• 6 结论
• 五、参考文献
• 六、文献综述
• 七、致谢