论文摘要
【目的】原发性肝细胞癌（HCC）是目前世界上发病率最高的恶性肿瘤之一。流行病学早已证实乙肝病毒（HBV）的感染是HCC发生的独立危险因素。共价闭合环状DNA（cccDNA）是乙肝病毒生命周期中的一种重要的复制中间体，已经被公认为乙肝病毒持续感染和肝脏进行性病理改变的根本原因。许多的体外试验、动物试验研究均提示HBVcccDNA与肝细胞癌变的发生密切相关，而人肝癌组织内HBVcccDNA与肝细胞癌发生的关系及其临床研究，国内报道较少。应用荧光定量聚合酶链反应（FQ-PCR）的方法检测HCC患者癌组织、非癌组织两种手术标本中的HBVcccDNA定量水平、总HBVDNA定量水平，同时结合肝实质损害程度相关指标及癌组织病理分级，探讨HBVcccDNA在原发性肝癌发生发展中的作用以及和癌组织病理分级、肝实质损害程度的关系，为临床上原发性肝细胞癌的预防和治疗提供理论根据。【方法】45例HCC患者均为山东省立医院肝病中心2006年12月～2007年5月期间就诊的患者，男36例，女9例。42例为血清HBsAg阳性，3例为血清HBsAg阴性（2例血清HBeAb和HBcAb均阳性，1例血清HBcAb阳性），所有患者血清抗HCV均阴性。患者均未进行过抗病毒治疗。原发性肝细胞癌诊断均经组织病理证实。癌组织和非癌组织均取自于手术切除标本，手术切缘处无癌细胞残留。标本采集后，一部分进行癌组织病理分级；另一部分应用Roche light-cycle荧光PCR检测仪检测两种组织内HBVcccDNA和总HBVDNA定量水平；全自动生化分析仪检测肝实质损害程度相关指标（ALT、TBIL等指标）。进行统计分析。【结果】1、所有肝组织内均检测到HBVDNA和HBVcccDNA的存在。其中42例HBsAg阳性患者的癌组织HBVcccDNA定量为3．22×101copies／mg～4．51×104copies／mg（对数值为3．09±1．22）；总HBVDNA定量值为1．67×102copies／mg～6．43×105Scopies／mg（对数值为4．33±1．11）。非癌组织HBVcccDNA定量为1．17×101copies／mg～5．95×104copies／mg（对数值为2．62±0．97）；总HBVDNA定量值为1．42×102copies／mg～1．26×106copies／mg（对数值为4．13±1．09）。2、血清HBsAg阳性患者的癌组织较非癌组织总HBVDNA定量水平差别无显著性（4．33±1．11对4．13±1．09，P=0．439），而癌组织HBVcccDNA定量水平较非癌组织显著升高（3．09±1．22对2．62±0．97，P=0．039）。3、血清HBsAg阳性患者的癌组织中HBVcccDNA占总HBVDNA的比例显著升高（70．09％对62．33％，P=0．015）。42例HBsAg阳性患者中有14例（14／42，33％）的癌组织HBVcccDNA几乎成为HBVDNA唯一存在形式。（见表1）4、癌组织和非癌组织的HBVcccDNA定量和总HBVDNA定量均呈高度正相关（分别为r=0．8244，P<0．001；r=0．8460，P<0．001）。5、3例血清HBsAg阴性患者的肝组织内均检测到了HBVcccDNA的存在，且HBVcccDNA比例均较高，其中一组cccDNA比例高达99．52％。（见表2）6、癌组织中HBVcccDNA定量水平和癌组织的病理分级无相关性（P>0．05）。（见表3）7、癌组织和非癌组织的HBVcccDNA定量与肝实质损害指标血清谷丙转胺酶（ALT）、总胆红素（TBIL）凝血酶原时间（PT）均无相关性（P>0．05）。（见表4）【结论】1、癌组织内HBVcccDNA占总HBVDNA的比例较非癌组织显著增高。2、部分血清HBsAg、HBVDNA均阴性，HBcAb阳性的HCC患者检测到组织内HBVDNA的存在，且HBVcccDNA几乎成为病毒DNA的唯一存在形式。3、癌组织HBVcccDNA定量水平较对应的非癌组织显著增高，而总HBVDNA定量水平之间差别无显著性。4、癌组织HBVcccDNA水平与癌组织的病理分级及肝实质损害程度无相关性。癌组织HBVcccDNA水平不能作为HCC恶性程度的预测指标。
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