银杏内酯AB对大鼠局灶性脑缺血的保护作用及其对NF-κB信号通路的抑制作用

论文摘要

目的:观察银杏内酯A B（Ginkgolide AB, GKAB; Ginkgolide A : Ginkgolide B =1:1）静脉注射对大鼠永久性局灶性脑缺血的保护作用及其对NF-κB信号转导通路的抑制作用。方法:采用大鼠永久性大脑中动脉阻塞（permanent middle cerebral artery occlusion, pMCAO）模型观察GKAB 12.5、25、50mg/kg对脑梗塞体积、脑水肿、行为学症状及组织形态学（光镜）的影响,大鼠脑缺血后10 min静脉注射GKAB。应用免疫组织化学法分析NF-κB的核转位;采用Western-blot法检测大鼠大脑皮层NF-κB, IκBα, p-IKKα蛋白含量及大鼠大脑皮层、纹状体和海马NIK蛋白含量;采用RT-PCR技术检测NF-κB靶基因c-Myc mRNA的表达。结果:GKAB 12.5、25、50mg/kg静脉注射呈剂量依赖性减少pMCAO大鼠脑梗死体积,降低脑含水量和改善行为学症状,减轻脑组织形态变化（P <0.05, P <0.01）。Western-blot显示:大鼠pMCAO后12小时大脑皮层缺血区NF-κB的含量显著增加（P <0.01）,GKAB 12.5、25、50mg/kg能显著降低NF-κB的含量（P <0.01）;大鼠pMCAO后6小时大脑皮层缺血区NF-κB的抑制蛋白IκBα水平显著减少（P <0.01）,GKAB 25、50mg/kg能显著增加IκBα水平（P <0.05, P <0.01）;大鼠pMCAO后3小时大脑皮层缺血区p-IKKα的水平显著增加（P <0.01）,GKAB 12.5、25、50mg/kg能明显降低p-IKKα的表达量（P <0.01）。Western-blot结果亦证明:缺血后3小时大鼠大脑皮层缺血区p-NIK的水平明显增加（P <0.05）,随后下降;缺血侧纹状体p-NIK蛋白水平于缺血12小时及24小时明显增加（P <0.05）;而缺血侧海马p-NIK蛋白水平在缺血后各时间点均无明显变化。GKAB 50mg/kg能明显降低缺血后3小时大鼠大脑皮层缺血区p-NIK的水平（P <0.05）。免疫组化证明:假手术组大鼠大脑皮层NF-κB主要表达在神经细胞胞浆中;pMCAO后12小时,模型组大鼠大脑皮层NF-κB主要表达于神经细胞胞核,说明缺血使NF-κB从细胞浆移位至细胞核;

论文目录

• 中文摘要
• Abstract
• 前言
• 第一部分 GKAB 对大鼠永久性局灶性脑缺血（pMCAO）的保护作用
• 材料与方法
• 结果
• 小结
• 第二部分 GKAB 对大鼠永久性局灶性脑缺血保护作用的分子机制
• 一、pMCAO 大鼠大脑皮层缺血区、纹状体、海马p-NIK 蛋白水平的时程变化
• 材料与方法
• 结果
• 二、GKAB 对pMCAO 大鼠大脑皮层缺血区NF-κB、IκBα、pIKKαp-NIK 蛋白水平，NF-κB 核转位及c-Myc mRNA 表达的影响
• 材料与方法
• 结果
• 小结
• 讨论
• 结论
• 参考文献
• 攻读硕士学位期间发表的论文
• 附录一 综述
• 附录二 论文
• 附录三 英文缩写词表
• 致谢
• 中文详细摘要