大鼠脑缺血再灌注后IRE1通路XBP1、CHOP基因表达及参芎对其影响

论文摘要

背景与目的脑缺血再灌注损伤引起的细胞死亡包括凋亡和死亡两种,迟发性神经细胞损伤多以凋亡的形式出现。近来研究表明缺血性脑损伤时细胞的凋亡不仅存在线粒体途径及死亡受体途径还存在内质网途径。在内质网应激反应中,IRE1介导的UPR信号通路很重要,它不仅诱导的XBP1的表达,还通过诱导凋亡因子如CHOP的表达启动细胞凋亡。XBP1是内质网应激的标志物。目前在脑缺血再灌注模型中有关IRE1介导的UPR信号通路的研究较少见。本研究第一部分通过检测局灶性脑缺血后XBP1、CHOP基因在大鼠脑内的表达变化,以探讨它们在脑缺血损伤中的作用及其与细胞凋亡的关系,从而为了解脑缺血后细胞凋亡的分子调控机制提供实验基础;第二部分应用参芎对大鼠MCAO模型进行干预,研究参芎对ERS后IRE1通路XBP1、CHOP基因表达的影响及神经保护机制,从而为临床治疗脑缺血提供理论基础和治疗思路。方法实验第一部分将10-12周龄健康雄性144只雄性SD大鼠随机分为两组:假手术组、手术组;实验第二部分随机使用健康雄性SD大鼠72只分为参芎组。采用线栓法制作大脑中动脉缺血再灌注模型,用Longa’s的5级标准评分法评价神经功能缺损。再灌注后6h、12h、24h、72h处死动物,TTC染色测定脑梗死体积,免疫组化学及RT-PCR法分别检测脑缺血区XBP1、CHOP蛋白和mRNA表达变化;末端标记法原位检测神经细胞凋亡。结果1.大鼠MCAO模型脑梗死体积及神经细胞凋亡随再灌注时间增加而增加,均在24h达到高峰。2.XBP1、CHOP蛋白及mRNA水平在再灌注后均有升高,其中XBP1、CHOP mRNA分别在再灌注后6h、12h达到高峰;XBP1、CHOP蛋白在灌注12h、24h达到高峰。3.再灌注后12h、24h、72h参芎干预组脑梗死体积、神经功能评分及神经细胞凋亡数均低于对照组,两者之间比较具有统计学意义P<0.05。4.再灌注后6h、12h、24h、72h参芎干预组XBP1、CHOP蛋白及mRNA低于相应时间点的对照组大鼠,两组之间比较P<0.01。结论1.脑缺血再灌注后,可诱发了ERS,启动了IRE1介导的UPR信号通路。2.大鼠脑缺血再灌注后,CHOP其动态变化与神经凋亡相平行,可能在神经细胞凋亡中发挥作用。3.参芎注射液可改善脑缺血再灌注后大鼠神经功能缺损并减少大鼠脑梗死体积。4.参芎注射液可下调XBP1、CHOP的表达,抑制了IRE1介导的内质网应激反应及随后的凋亡信号通路,减少神经细胞凋亡,减少脑缺血再灌注损伤。

论文目录

• 中文摘要
• 英文摘要
• 前言
• 第一部分 大鼠脑缺血再灌注损伤后内质网应激IRE1 通路中XBP1、CHOP 基因表达及神经元凋亡机制的研究
• 第一章 材料与方法
• 第二章 结果
• 第三章 讨论
• 第四章 结论
• 第二部分 参芎对大鼠脑缺血再灌注损伤后内质网应激机制XBP1、CHOP 的影响及神经保护作用
• 第一章 材料与方法
• 第二章 结果
• 第三章 讨论
• 第四章 结论
• 参考文献
• 附录
• 综述
• 攻读硕士学位期间发表的论文及参与的科研课题
• 致谢