苏南部分地区螃蟹重金属残留调查及镉对成骨细胞毒性的初步研究

论文摘要

本研究采用原子吸收光谱法、原子荧光光谱法等检测方法,对江苏省常州辖区现有的3大螃蟹养殖水域——滆湖、长荡湖和溧阳水产养殖场养殖的中华绒螯蟹及其饲料、水质、土壤等周围生活环境中重金属残留进行了调查,了解水产食品中有害元素残留状况,认识环境污染的程度及其与动物性食品中有害残留的关系,从而为研究两者之间的关系,推断该水域养殖螃蟹的安全性,对建立出口螃蟹养殖基地,通过标准化养殖,从而确保螃蟹的安全卫生质量,推动该区域螃蟹产业的发展具有意义。本次调查结果表明,位于苏南地区的滆湖、长荡湖和溧阳水产养殖场中华绒螯蟹组织样品中Cd、Cr、Hg平均含量都没有超标;除Cd元素外,螃蟹生殖腺重金属含量明显低于蟹腿肌肉和蟹胸肌肉。螃蟹重金属超标的主要元素为Pb、As和Cu。检测的部分螃蟹饲料及养殖水体湖水、湖底泥土样品中重金属不超标。用混合酶消化法分离大鼠颅盖骨成骨细胞,进行原代培养;成骨细胞与不同浓度的Cd2+作用后,MTT法测定细胞增殖; PNPP法检测碱性磷酸酶活性;利用放免法对细胞骨钙素进行检测;矿化结节计数和面积测量分析镉对成骨细胞矿化能力的影响;AO/EB双染法进行凋亡形态学观察。结果表明各剂量组氯化镉均可抑制成骨细胞增殖,其中0.75μmol/ L以上剂量组与对照组相比差异有统计学显著意义（P <0.01）;各时点、各剂量组氯化镉均能抑制ALP活性,72h以上影响作用更明显（P<0.01）;细胞内骨钙素水平各组间无显著影响,上清中骨钙素水平则不同,各染镉组比对照均显著下降;0.5μmol/L、1.0μmol/L浓度的氯化镉可明显抑制成骨细胞矿化能力;1μmol/L、2μmol/L剂量组OB可见较多凋亡细胞。实验证明,镉可以抑制成骨细胞增殖、分化及矿化能力,促进成骨细胞凋亡,对成骨细胞的骨形成能力有明显抑制作用。

论文目录

• 中文摘要
• ABSTRACT
• 第1章 前言
• 1 重金属污染与控制
• 1.1 我国重金属污染的现状
• 1.2 重金属污染的控制
• 2 水产品对重金属的富集作用
• 2.l 水生生物对汞的富集
• 2.2 水生生物对砷的富集
• 2.3 水生生物对铬的富集
• 2.4 水生生物对镉的富集
• 2.5 水生生物对铅的富集
• 3 重金属元素的危害
• 3.1 镉（Cd）
• 3.2 铅（Pb）
• 3.3 铜（Cu）
• 3.4 铬（Cr）
• 3.5 汞（Hg）
• 3.6 砷（As）
• 4 镉的骨毒性作用研究进展
• 4.1 镉的骨毒性作用机制研究
• 4.2 镉的骨毒性作用检测指标
• 4.3 现代医学对骨质疏松症的认识
• 5 本研究的目的意义
• 第2章 苏南部分地区湖蟹中重金属残留调查
• 1 材料和方法
• 1.1 仪器和试剂
• 1.2 样品的采集
• 1.3 样品的处理
• 1.4 测定方法的建立
• 2 结果及分析
• 2.1 原子吸收法测定条件
• 2.2 原子荧光法测定条件
• 2.3 检测结果
• 3 讨论
• 第3章 镉对成骨细胞毒性的初步研究
• 1 材料和方法
• 1.1 实验动物
• 1.2 主要试剂及仪器
• 1.3 实验方法
• 1.4 质量控制
• 1.5 数据处理
• 2 实验结果
• 2.1 OB 形态结构变化
• 2.2 氯化镉对成骨细胞形态的影响
• 2.3 氯化镉对OB 细胞增殖的影响
• 2.4 氯化镉对成骨细胞碱性磷酸酶活性的影响
• 2.5 氯化镉对OB 矿化的影响
• 2.6 骨钙素含量
• 2.7 OB 凋亡形态学观察
• 3 讨论
• 3.1 镉对成骨细胞的一般指标的影响
• 3.2 镉对成骨细胞特异性功能指标的影响
• 3.3 镉对成骨细胞矿化能力的影响
• 3.4 镉对成骨细胞凋亡的影响
• 3.5 小结
• 参考文献
• 致谢