导读:本文包含了胞膜外区论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:人可溶性TNF受体1,免疫球蛋白G,哮喘,妊娠
胞膜外区论文文献综述
马佳佳,Nick,Lu,陈必良[1]（2013）在《人可溶性sTNFR1及胞膜外区Ig融合基因重组腺病毒的真核表达及功能活性鉴定》一文中研究指出目的构建携带人sTNFR1与IgGFc片段融合基因的重组腺病毒,稳定表达并初步鉴定其功能活性在妊娠哮喘炎症机制中的作用。方法将PCR扩增的sTNFR1及IgGFc基因片段先后连接到穿梭质粒pAdTrack-CMV多克隆位点上,酶切线性化后在BJ5183细菌内与骨架质粒pAdEasy-1同源重组,产生获得的AdE-EGFP-sTNFR1-Ig以脂质体法转染AD293细胞进行病毒包装,以绿色荧光蛋白(GFP)监测病毒滴度及感染效率。RT-PCR、Western blot实验鉴定细胞内重组腺病毒转录及融合基因与蛋白表达;流式细胞术、ELISA实验分析混合培养上清中转染肥大细胞(MC)激活、调节同基因来源T细胞表达Th2/Treg水平及细胞因子分泌效果;MTT评估转染细胞上清中sTNFR1-Ig对TNF-α介导细胞毒效应的拮抗作用。结果成功构建编码sTNFR1-Ig基因的重组腺病毒载体经酶切和测序鉴定正确,制备的腺病毒在转染细胞中的GFP表达以及CPE效应明显,扩增后的滴度为3.7×1010～4.8×1010pfu/ml,体外感染效率可达90%以上;sTNFR1-Ig基因在mRNA及蛋白水平获得的清晰条带均证实腺病毒包装与扩增成功。表达sTNFR1-Ig的MC诱导T细胞转化为CD4+CD25+Foxp3+T细胞水平以及IL-12含量均明显升高,CD4+IL-4+Th2细胞水平下调(P<0.05),Th2/Treg所占CD4+T细胞比值下降(P<0.05)。sTNFR1-Ig封闭TNF-α对MC免疫毒性作用的浓度效应明显,而EGFP-MCs与对照细胞上清对TNF-α毒性效应的中和阻断能力不足(P<0.05)。结论携sTNFR1-Ig基因重组腺病毒参与的免疫调控与妊娠期哮喘发生发展密切相关。sTNFR1及IgG-Fc亚基胞膜外区结合的表达和引起免疫耐受的作用研究,为妊娠哮喘发病机制在理论上的新突破,为以sTNFRI-Ig为靶点的妊娠哮喘干预治疗奠定基础。(本文来源于《中国药理学通报》期刊2013年08期）
王锐,郭红星,程昕,张砚君,刘荣[2]（2010）在《4-1BBL胞膜外区蛋白增强抗CD3/抗PgP的抗肿瘤作用》一文中研究指出目的研究4-1BBL胞膜外区蛋白对抗CD3/抗Pgp微型双功能抗体抗肿瘤作用的影响。方法表达纯化人4-1BBL胞膜外区融合蛋白及抗CD3/抗Pgp微型双功能抗体,体外CytoTox96检测联合应用人4-1BBL胞膜外区融合蛋白、抗CD3/抗Pgp微型双功能抗体及PBL对靶细胞K562/A02细胞的杀伤作用,体内建立裸鼠移植瘤模型检测4-1BBL胞膜外区蛋白作为一种免疫调节蛋白,增强抗CD3/抗Pgp基于PBL的抗肿瘤效果。结果4-1BBL胞膜外区融合蛋白在体外能够增强抗CD3/抗Pgp及PBL对靶细胞K562/A02的杀伤作用,在体内能够增强抗CD3/抗Pgp基于PBL的抗肿瘤作用。结论可溶型4-1BBL可能成为一种有前景的生物治疗佐剂,有助于PBL更高效地靶向杀伤肿瘤细胞。(本文来源于《免疫学杂志》期刊2010年01期）
赵紫琴,李兰英,陆凤先,朱学良,朱云娟[3]（2008）在《hTSHR胞膜外区片段真核表达载体的构建和表达》一文中研究指出目的:构建人类促甲状腺激素受体(hTSHR)胞膜外区氨基端的两个片段hTSHRf(aa29~100)、hTSHRe(aa101~278)的真核表达载体pcDNA3.1-hTSHRf和pcDNA3.1-hT-SHRe,并在CHO细胞中进行表达。方法:RT-PCR法从人甲状腺正常组织的cDNA中扩增hTSHRf和hTSHRe,定向插入真核表达载体pcDNA3.1(D)/V5-His-TOPO中,经酶切、PCR和测序鉴定后通过脂质体介导转染至CHO细胞中进行表达,RT-PCR扩增转染细胞的cDNA、Western blot分别鉴定hTSHR在CHO细胞中mRNA和蛋白水平的表达。结果:RT-PCR分别扩增两个片段的阳性克隆株,所得片段大小与预期一致,经Western blot鉴定,相对分子质量(Mr)分别为11900、23600左右,与预期的大小相符。结论:真核表达载体pcDNA3.1-hTSHRf和pcDNA3.1-hTSHRe构建成功,RT-PCR和Western blot检测证实重组质粒能在CHO细胞中高效表达,为进一步研究pcDNA3.1-hTSHRf和pcDNA3.1-hTSHRe在体内的基因表达,建立Graves'病的动物模型奠定了基础。(本文来源于《细胞与分子免疫学杂志》期刊2008年08期）
郭红星,程昕,苏晔,范冬梅,邵晓枫[4]（2008）在《4-1BBL胞膜外区蛋白对人外周血淋巴细胞体外活性的调节作用》一文中研究指出目的:研究4-1BBL胞膜外区融合蛋白(ex4-1BBL)对人外周血淋巴细胞(PBL)体外活性的调节作用。方法:表达纯化人4-1BBL胞膜外区融合蛋白,台盼蓝计数观察其对淋巴细胞增殖的作用;CytoTox 96非放射性细胞毒试剂盒检测培养液的乳酸脱氢酶(LDH)水平,ELISA检测白介素-2(IL-2)水平。CytoTox 96检测其联合应用anti-CD3/anti-Pgp微型双功能抗体及PBL对靶细胞K562/A02细胞的杀伤作用。结果:4-1BBL胞膜外区融合蛋白能够促进淋巴细胞增殖,减少细胞死亡,促进IL-2分泌;联合应用ex4-1BBL的淋巴细胞组的杀伤效率优于对照组。结论:ex4-1BBL可能成为增强淋巴细胞活性的重要免疫佐剂。(本文来源于《细胞与分子免疫学杂志》期刊2008年05期）
郭红星[5]（2008）在《4-1BBL胞膜外区蛋白及四价抗CD3/抗Pgp双功能抗体的抗耐药肿瘤作用研究》一文中研究指出抗CD3×抗Pgp(anti-CD3/anti-Pgp)diabody治疗P-糖蛋白(P-glycoprotein,Pgp)高表达的多药耐药(Multidrug resistance,MDR)肿瘤具有良好应用前景,其杀伤肿瘤的作用主要由外周血淋巴细胞(peripheral blood lymphocyte,PBL)中活化的细胞毒T淋巴细胞(cytotoxic T lymphocyte,CTL)来完成。因此,采用促进T细胞活化的方法可进一步增强PBL的抗肿瘤效果。本文从两方面进行了相关的研究。1.利用可溶型4-1BBL促进PBL活化4-1BB/4-1BBL作为一对重要的共刺激信号分子,通过促进活化的细胞毒淋巴细胞增殖、减少凋亡、延长存活时间、甚至增加细胞内颗粒酶、穿孔素的蓄积等机制调节T细胞活化,有助于机体达到最佳状态的抗肿瘤细胞免疫反应。本文第一部分用原核表达的可溶型人4-1BBL胞膜外区蛋白(extracellulardomain of human 4-1BBL,ex4-1BBL)来调节PBL的抗肿瘤反应。用免疫组化、PI染色和放射免疫法确认ex4-1BBL具有与4-1BB特异结合、减少Jurkat细胞凋亡和促进其释放IL-2活性后,进一步研究发现该蛋白能够促进PBL增殖(191.66%vs 146.67%,P＜0.05)和分泌Il-2(54.26±5.92 pg/ml vs 22.57±6.53pg/ml,P＜0.05),使PBL释放的乳酸脱氢酶(LDH)减少,改善其存活状态。在体外细胞毒杀伤实验中,ex4-1BBL联合anti-CD3/anti-CD20或anti-CD3/anti-Pgp微型双功能抗体,在不同的效靶比均能增强PBL对靶向细胞(Raji或K562/A02)的杀伤作用。在体内联合应用PBL、ex4-1BBL和anti-CD3/anti-Pgp diabody治疗裸鼠K562/A02移植瘤,能显着控制肿瘤生长并清除肿瘤,观察至100天未见肿瘤复发。因此,ex4-1BBL作为一种免疫调节蛋白,能够促进T细胞的活化,进而增强基于PBL的抗肿瘤生物治疗的效果。ex4-1BBL可能成为一种新型的、应用广泛的辅助抗肿瘤药物。2.构建四价形式的anti-CD3/anti-Pgp双功能抗体双功能抗体也称为双特异抗体(bispecific antibody,BsAb),其四价结构能够增加分子量和结合域,延长半衰期和增加结合力,间接延长抗体的作用时间。同时,增加对T细胞CD3分子的结合价能进一步促进其活化,也有利于PBL抗肿瘤作用。因此,为了发挥diabody的靶向优势并克服其不足,本文第二部分构建了四价形式的抗体并在原核系统进行表达。为了增加可溶型蛋白的表达量,先后采用优化表达温度和时间、改变培养基组成和更换载体等方法。优化表达条件后使产量得到提高,可供进一步研究蛋白功能。(本文来源于《中国协和医科大学》期刊2008-05-01）
邓虎平,庄然,贾卫,张贝斌,张圆[6]（2007）在《人CD226分子胞膜外区D1和D2真核表达载体的构建、表达和鉴定》一文中研究指出目的构建含有人CD226分子胞膜外区结构域1(D1)和结构域2(D2)的真核表达载体,表达并纯化重组蛋白。方法用特异性引物分别扩增CD226D1和D2的基因,定向插入真核表达载体pSecTag2B-Fc,进行酶切和DNA测序鉴定,重组质粒瞬时转染293T细胞,收集上清,纯化蛋白及SDS-PAGE和Western blot鉴定表达产物。结果利用PCR方法克隆出CD226胞膜外区D1和D2的基因,并正确插入pSecTag2B-Fc载体中,真核表达载体瞬时转染293T细胞,Western blot结果证实转染293T细胞的培养上清液中含有hCD226D1-Fc和hCD226D2-Fc融合蛋白,培养上清经亲和层析柱纯化,可获得较高纯度的重组蛋白。结论成功的构建了分泌型融合蛋白hCD226D1-Fc和hCD226D2-Fc真核表达载体,获得纯度较高的融合蛋白,为进一步探讨其配受体的相互作用机制奠定了基础。(本文来源于《免疫学杂志》期刊2007年05期）
张新海,杨琨,贾卫,欧阳为明,刘莹[7]（2003）在《含3C蛋白酶切位点的人CD226胞膜外区Ig融合蛋白的真核表达及应用》一文中研究指出目的 :构建含 3C蛋白酶酶切位点的人CD2 2 6 (PTA1)分子胞膜外区Ig融合蛋白编码基因的真核表达载体 ,并进行表达和初步鉴定。方法 :将人CD2 2 6分子的胞膜外区基因 ,克隆入含 3C蛋白酶靶序列的Ig真核表达载体 p 3C Ig中。测序证实后 ,转染COS7细胞并进行瞬时表达。表达产物经亲和层析柱纯化 ,并通过免疫荧光染色及 3C蛋白酶酶切反应进行鉴定。结果 :经表达和纯化获得CD2 2 6胞膜外区的Ig融合蛋白。该融合蛋白可与表达于ECV30 4细胞表面的CD2 2 6配体有效结合。同时 ,融合蛋白的Fc段亦经 3C蛋白酶切除 ,从而获得CD2 2 6胞膜外区的真核表达分子。结论 :成功地获得了含有 3C蛋白酶酶切位点的人CD2 2 6分子胞膜外区Ig真核表达产物 ,为进一步对CD2 2 6分子进行结构和功能研究 ,以及X线结晶衍射提供了重要条件(本文来源于《细胞与分子免疫学杂志》期刊2003年03期）
贾卫,刘雪松,张新海,朱勇,张贇[8]（2003）在《人CD226(PTA1)分子胞膜外区截短体真核表达载体的构建、表达及其识别结构域的分析》一文中研究指出目的 确定一套CD2 2 6单克隆抗体 (McAb)识别CD2 2 6分子胞膜外区结构域的部位。方法 应用计算机软件分析CD2 2 6分子蛋白质序列疏水性 ,确定其亲水性区域。采用PCR方法扩增CD2 2 6分子基因序列 ,分别缺失相应亲水性区域 ,构建CD2 2 6截短体重组真核细胞表达载体pcDNA3 PTA1T1和pcDNA3 PTA1T2。测序正确后 ,转染COS7细胞 ,抗CD2 2 6分子多克隆抗体间接免疫荧光染色 ,流式细胞术检测CD2 2 6分子截短体的表达。表达成功后 ,采用间接免疫荧光染色和流式细胞术分析 ,用一套CD2 2 6McAb检测与截短突变体的免疫反应性 ,从而确定CD2 2 6McAb识别CD2 2 6分子结构域的部位。结果 PCR扩增出CD2 2 6分子相应目的片段序列 ,定向克隆入pcDNA3真核表达载体 ,DNA序列测定正确。转染COS7细胞后 ,流式细胞术检测CD2 2 6截短体分子有较高水平的表达。CD2 2 6McAbLeoA1、NewE1和FMU1～ 7均可识别CD2 2 6全长分子 ;LeoA1、NewE1、FMU1、FMU2、FMU4和FMU5与截短突变体PTA1T1和PTA1T2均无反应性 ;FMU3可结合PTA1T1分子 ,不结合PTA1T2分子 ;FMU6和FMU7均可结合PTA1T1及PTA1T2分子。结论 CD2 2 6McAbLeoA1、NewE1、FMU1、FMU2、FMU3、FMU4和FMU5识别CD2 2 6分子胞膜外区D1结构域 ,其中FMU3识别的位点位于V1和V2环之间 ;FMU6?(本文来源于《中华微生物学和免疫学杂志》期刊2003年01期）
张新海,欧阳为明,贾卫,杨琨,宁双飞[9]（2002）在《人CD226(PTA1)分子胞膜外区的原核表达、复性及免疫反应性的鉴定》一文中研究指出目的 构建人CD2 2 6 (PTA1)分子胞膜外区的原核表达载体 ,并进行原核表达和复性 ,为该分子的X线结晶衍射及功能学研究提供充足的蛋白来源。方法 将人CD2 2 6分子的胞膜外区基因克隆入原核表达载体pBV2 2 0 ,测序证实后 ,转化宿主菌MC10 6 1 P3并进行温度诱导表达。产物采用稀释加透析法复性 ,亲和层析柱纯化 ,并通过Westernblot和ELISA对其复性效果进行鉴定。结果 温度诱导 7h ,目的蛋白的表达量达宿主菌总蛋白量的 2 3.8% ,其相对分子质量为 30× 10 3,Westernblot及ELISA证实其重折迭和复性是成功的。结论 成功地获得了人CD2 2 6 (PTA1)分子胞膜外区的原核表达产物 ,可用于该分子X线结晶衍射及功能学实验(本文来源于《中华微生物学和免疫学杂志》期刊2002年06期）
孙凯,金伯泉,冯琦,田方,朱勇[10]（2000）在《血小板/T细胞活化抗原1胞膜外区基因片段的克隆及其融合蛋白的表达、鉴定及纯化》一文中研究指出血小板和T细胞化抗原1(platelet and T cell activationantigen 1,PTA1)最早在1985年由Burns 等发现.PTA1主要表达于活化T细、巨核及血小板谱系,参与T细胞的活化与分化、血小板的活化与聚集,与血小板功能异常、自身免疫性疾病、移植物抗宿主病、病毒感染性疾病及肿瘤等疾病的发病机理亦有密切的关系.1997年PTA1获得基因克隆,属免疫球蛋白超家族成员,它的胞膜外区仅由两个V样区组成,在免疫球白超家族中未见有其他分子具有这种结构.但到目前为止,PTA1配体尚未被基因克隆,亦末见有(本文来源于《西部大开发 科教先行与可持续发展——中国科协2000年学术年会文集》期刊2000-06-30）
胞膜外区论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
目的研究4-1BBL胞膜外区蛋白对抗CD3/抗Pgp微型双功能抗体抗肿瘤作用的影响。方法表达纯化人4-1BBL胞膜外区融合蛋白及抗CD3/抗Pgp微型双功能抗体,体外CytoTox96检测联合应用人4-1BBL胞膜外区融合蛋白、抗CD3/抗Pgp微型双功能抗体及PBL对靶细胞K562/A02细胞的杀伤作用,体内建立裸鼠移植瘤模型检测4-1BBL胞膜外区蛋白作为一种免疫调节蛋白,增强抗CD3/抗Pgp基于PBL的抗肿瘤效果。结果4-1BBL胞膜外区融合蛋白在体外能够增强抗CD3/抗Pgp及PBL对靶细胞K562/A02的杀伤作用,在体内能够增强抗CD3/抗Pgp基于PBL的抗肿瘤作用。结论可溶型4-1BBL可能成为一种有前景的生物治疗佐剂,有助于PBL更高效地靶向杀伤肿瘤细胞。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
胞膜外区论文参考文献
[1].马佳佳,Nick,Lu,陈必良.人可溶性sTNFR1及胞膜外区Ig融合基因重组腺病毒的真核表达及功能活性鉴定[J].中国药理学通报.2013
[2].王锐,郭红星,程昕,张砚君,刘荣.4-1BBL胞膜外区蛋白增强抗CD3/抗PgP的抗肿瘤作用[J].免疫学杂志.2010
[3].赵紫琴,李兰英,陆凤先,朱学良,朱云娟.hTSHR胞膜外区片段真核表达载体的构建和表达[J].细胞与分子免疫学杂志.2008
[4].郭红星,程昕,苏晔,范冬梅,邵晓枫.4-1BBL胞膜外区蛋白对人外周血淋巴细胞体外活性的调节作用[J].细胞与分子免疫学杂志.2008
[5].郭红星.4-1BBL胞膜外区蛋白及四价抗CD3/抗Pgp双功能抗体的抗耐药肿瘤作用研究[D].中国协和医科大学.2008
[6].邓虎平,庄然,贾卫,张贝斌,张圆.人CD226分子胞膜外区D1和D2真核表达载体的构建、表达和鉴定[J].免疫学杂志.2007
[7].张新海,杨琨,贾卫,欧阳为明,刘莹.含3C蛋白酶切位点的人CD226胞膜外区Ig融合蛋白的真核表达及应用[J].细胞与分子免疫学杂志.2003
[8].贾卫,刘雪松,张新海,朱勇,张贇.人CD226(PTA1)分子胞膜外区截短体真核表达载体的构建、表达及其识别结构域的分析[J].中华微生物学和免疫学杂志.2003
[9].张新海,欧阳为明,贾卫,杨琨,宁双飞.人CD226(PTA1)分子胞膜外区的原核表达、复性及免疫反应性的鉴定[J].中华微生物学和免疫学杂志.2002
[10].孙凯,金伯泉,冯琦,田方,朱勇.血小板/T细胞活化抗原1胞膜外区基因片段的克隆及其融合蛋白的表达、鉴定及纯化[C].西部大开发科教先行与可持续发展——中国科协2000年学术年会文集.2000
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