短暂性前脑缺血再灌注及美满霉素干预后Hsp27及Caspase-9表达的研究

论文摘要

目的：观察蒙古沙鼠前脑缺血再灌注损伤及美满霉素干预后Hsp27和Caspase—9的表达变化及二者表达的相关性和保护机制，探讨其在短暂性脑缺血发作（TIA）中的意义。方法：（1）分组：健康雄性蒙古沙鼠50只，随机分为正常对照组、假手术组、缺血再灌注组（I／R）、美满霉素干预组（MI／R）；观察在脑缺血再灌注后6h、1d、3d、7d的各相应时间点Hsp27及Caspase-9的表达；（2）模型制作：对照组沙鼠予以夹闭双侧颈总动脉10min后再灌注；假手术组沙鼠仅分离双侧颈总动脉不予以夹闭；美满霉素干预组于缺血再灌注前一天腹腔注射美满霉素（剂量为45mg／kg，Bid）然后建立缺血再灌注模型；（3）HE染色观察病理变化；（4）免疫组织化学染色观察表达变化。结果：（1）HE染色：I／R组可见胶质细胞增生肥大，神经元变性、坏死。而相应时间点的MI／R组脑组织损伤程度均明显轻于脑缺血再灌注组。（2）免疫组化：正常对照组与假手术组沙鼠前脑神经元及胶质细胞中均可见Hsp27及Caspase-9少量阳性表达，Hsp27在缺血再灌注损伤后在各时间点表达显著上调，在1d时达到高峰，与对照组比较，有显著性差异（P＜0.05）。缺血再灌注损伤后Caspase-9在各相应时间点表达显著上调，在1d时达到高峰，与对照组比较，有显著性差异（P＜0.05）。且两者随时间推移表达变化的趋势一致。美满霉素干预组在缺血再灌注损伤后，Caspase-9表达在各相应时间点较对照组表达上调，趋势与缺血再灌注组一致，但Caspase-9阳性率明显低于缺血再灌注组（P＜0.05）。美满霉素干预组在缺血再灌注损伤后，Hsp27的表达无明显变化。结论：沙鼠前脑缺血再灌注后前脑组织Hsp27及Caspase-9表达上调，推测Hsp27可能通过抑制CaSpase-9的活性而起到凋亡负性调节的作用。美满霉素干预可能通过降低Caspase-9的表达，而发挥其抗凋亡作用。本研究尚未发现美满霉素干预后Hsp27的表达有明显变化。

论文目录

• 摘要
• ABSTRACT
• 第一章 前言
• 1.1 小分子热休克蛋白27
• 1.2 半肤氮酸天冬氮酸特异性蛋白酶-9
• 1.3 美满霉素
• 第二章 材料与方法
• 2.1 实验材料和仪器
• 2.2 实验步骤和方法
• 2.3 统计分析
• 第三章 结果
• 3.1 缺血再灌注模型及美满霉素干预模型的建立
• 3.2 病理观察结果
• 3.3 免疫组化结果
• 第四章 讨论
• 4.1 小分子热休克蛋白72（Hsp27）在沙鼠短暂性前脑缺血再灌注损伤表达的意义
• 4.2 半肤天冬酶-9（Caspase-9）在沙鼠短暂性前脑缺血再灌注损伤表达的意义
• 4.3 小分子热休克蛋白27（Hsp27）对半肤天冬酶-9（Caspase-9）表达的影响
• 第五章 结论
• 参考文献
• 综述
• 致谢