ATRA联合IFN-α及Rh2对激素非依赖性前列腺癌细胞的生长抑制作用及其机制的研究

论文摘要

目的:研究全反式维甲酸（ATRA）联合干扰素-α（IFN-α）对PC-3细胞（激素非依赖性人前列腺癌细胞株）及Rh2对PC-3M（高转移性激素非依赖性前列腺癌细胞株）的生长抑制作用,并观察其对凋亡相关基因GRIM-19、原癌基因STAT3 表达的影响,为激素非依赖性前列腺癌的治疗提供理论依据及治疗线索。方法:采用MTT 比色法观察不同时间和剂量的ATRA/IFN-α联合应用及单独应用对PC-3 细胞增殖率的影响,筛选出最佳药物浓度;应用相差显微镜及吖啶橙染色（AO）观察其对PC-3 细胞的促凋亡作用;利用RT-PCR 方法和免疫细胞化学技术观察用药后PC-3 细胞GRIM-19mRNA、蛋白的表达;免疫印记（Western blot）方法分别检测GRIM-19,STAT3 的蛋白表达;AO 染色观察Rh2 对PC-3M 细胞的促凋亡作用;RT-PCR和Western blot 方法检测用药后GRIM-19mRNA 和蛋白的表达。结果:ATRA1uM 联合IFN-α1000u/ml 作用于PC-3 细胞72h 与ATRA或IFN-α单独应用相比,对细胞有显著的增殖抑制作用（P< 0.05）;PC-3细胞形态学观察显示二药合用后出现典型凋亡征象; RT-PCR、免疫细胞化学及Western blot 结果表明,ATRA/IFN-α两药合用在mRNA水平和蛋白质水平,与对照组和ATRA 组、IFN-α组相比,GRIM-19 表达增强,差异显著;STAT3 的蛋白表达,两药合用组较对照组、ATRA 组、IFN-α组明显减弱,差异有显著性。Rh2 作用于PC-3M 细胞的RT-PCR及Western blot 结果显示:随着Rh2 浓度的增加,GRIM-19mRNA 和蛋白质表达逐渐增强,并呈剂量依赖性,与对照组比较差异显著（P<0.05）。结论:ATRA/IFN-α联合应用可抑制PC-3 细胞的增殖并诱导其凋亡,其机制之一为上调GRIM-19 表达,进而下调原癌基因STAT3 的表达。Rh2

论文目录

• 绪论
• 第一部分 ATRA 联合IFN-α对PC-3 的生长抑制作用及对GRIM-19,STAT3基因表达的影响的研究
• 1. 材料与方法
• 1.1 材料
• 1.2 实验方法
• 1.3 统计学处理
• 2. 结果
• 2.1 不同浓度的IFN-α及ATRA 单药或联用72h 对PC-3 细的生长抑制作用
• 2.2 药物作用后PC-3 细胞的形态学变化
• 2.3 ATRA/IFN-α诱导 PC-3 细胞凋亡对 GRIM-19 基因表达的影响
• 2.4 GRIM-19 免疫细胞化学染色结果
• 2.5 GRIM-19 蛋白表达水平分析
• 2.6 STAT3 蛋白表达水平分析
• 3. 讨论
• 第二部分 Rh2诱导PC-3M 细胞凋亡及对凋亡相关基因GRIM-19 的表达影响
• 1. 材料与方法
• 1.1 材料
• 1.2 实验方法
• 1.3 统计学处理
• 2. 结果
• 2.1 凋亡细胞的荧光标记
• 2.2 Rh2诱导 PC-3M 细胞凋亡对 GRIM-19 基因表达的影响
• 2.3 GRIM-19 蛋白表达水平分析
• 3. 讨论
• 结论
• 参考文献
• 英文缩略词
• 附图
• 中文摘要
• 英文摘要
• 致谢
• 导师及作者简介