导读:本文包含了酵母异源表达论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:裂解多糖单加氧酶,异源表达,热稳定,糖基化
酵母异源表达论文文献综述
姚昌阳,谢兴欢,蒋思婧,马立新,康立新[1]（2019）在《裂解多糖单加氧酶在毕赤酵母中的异源表达》一文中研究指出裂解多糖单加氧酶(lysate polysaccharide monooxygenase,LPMO)是一类含铜氧化酶,在还原型辅因子存在下可氧化裂解纤维素,对纤维素的降解起重要作用.优化并合成黄孢原毛平革菌(Phanerochaete chrysosporium)lpmo基因,构建pPICZ_αA-Pclpmo表达载体,电转毕赤酵母GS115实现了分泌表达,重组蛋白表达量为450 mg/L.重组PcPLMO对微晶纤维素催化活性为14 U/mL,对碱预处理的秸秆纤维活性较高,为24 U/mL.PcPLMO具有较好的热稳定性,分别在80、90、100℃保温60 min,残留活性为80%、62%与48%.经Endo H脱糖基化分析,PcLPMO发生了高度糖基化修饰,从而促进了酶的高温热稳定.相关结果可为LPMO协同纤维素酶降解纤维素的应用提供参考.(本文来源于《湖北大学学报(自然科学版)》期刊2019年06期）
吴蓉,杨猛,苏二正[2]（2019）在《南极假丝酵母脂肪酶B在大肠杆菌中的异源表达及其发酵优化》一文中研究指出南极假丝酵母脂肪酶B(Candida antarctica lipase B, CALB)是一种重要的工业酶,与其他脂肪酶相比有诸多优点,在很多合成反应中都表现出特异性和较强的催化活性,比如水解、酯化、转酯反应、有机合成以及手性催化反应等,因此被广泛应用于食品、化妆品、制药等领域。其天然宿主南极假丝酵母CALB产量低,因此,研究CALB的异源表达有重要的意义。(本文来源于《第十二届中国酶工程学术研讨会论文摘要集》期刊2019-08-08）
杨正凤,吴倩,丁俊美,李俊俊,慕跃林[3]（2019）在《康宁木霉菌来源的中性蛋白酶基因在毕赤酵母中的异源表达、酶学性质研究及分子改造》一文中研究指出[目的]本研究从NCBI数据库检索获得来源于康宁木霉菌来源的中性蛋白酶基因TCP1,将其在毕赤酵母中异源表达,进行酶学性质的研究及分子改造。[方法]利用简并PCR方法克隆目的基因并与pPIC9K载体重组,以电转法将重组质粒转入毕赤酵母进行异源表达。利用国标folin显色法对酶学性质进行研究,(本文来源于《第十二届中国酶工程学术研讨会论文摘要集》期刊2019-08-08）
田思琪,乔坤,王凡红,梁爽,王红[4]（2018）在《OsPDR在酵母中异源表达增强了酵母对钴的耐受性（英文）》一文中研究指出在通过RNA-Seq技术得到的镉响应转录组图谱中,用50μmol/L Cd处理24 h后,一个镉响应金属离子转运蛋白OsPDR被鉴定出其在水稻(Oryza sativa ssp. japonica cv. Nipponbare)茎中的表达量显着上调.本研究中,从水稻(Oryza sativa cv.Nipponbare)中分离了OsPDR基因,并对其金属离子转移活性进行了分析.金属耐受性实验结果表明,过表达OsPDR能提高酵母对Co的耐受性,但对Zn、Ni和Cd的耐受性不强,并且经电感耦合等离子体质谱法(ICP-MS)测定Co含量后,与空载体转化酵母相比,过表达OsPDR的酵母中Co的积累更高.利用共聚焦显微镜观察发现,EGFP-OsP DR融合蛋白定位于液泡膜上.这些数据表明OsP DR可能在Co稳态中起着重要作用.OsPDR在植物中的作用,还需要进一步的研究.(本文来源于《生物化学与生物物理进展》期刊2018年12期）
张晓伟,郭敏瑞,郭慧静,陈国刚[5]（2018）在《异源表达海苏特氏菌Argonaute蛋白基因提高酿酒酵母脂肪酸含量研究》一文中研究指出Argonaute蛋白作为一类高度保守的蛋白,是小RNA调控代谢机制的重要参与者,是RNA干扰所必须的,然而此蛋白在酿酒酵母中却未被发现。为初步探究海苏特氏菌Argonaute蛋白基因对脂肪酸含量的影响,以海苏特氏菌全基因组为模板,克隆并表达了海苏特氏菌Argonaute蛋白基因的CDS区。生物信息学分析发现该基因具有基因沉默调节因子SIR2结构域。将海苏特氏菌Argonaute蛋白基因连接至载体p ZMG中获得重组载体p ZMG-Jm-Argonaute并转化至酿酒酵母BY4742中,GC-MS检测显示,重组菌株总脂肪酸含量相对于野生菌株显着提高了6. 4%,其中不饱和脂肪酸C161含量显着提高了8. 3%,结果表明Jm-Argonaute蛋白基因能够提高酿酒酵母BY4742不饱和脂肪酸C161的含量,从而为深入研究该基因在菌体内对脂肪酸代谢的调节机制提供参考。(本文来源于《微生物学杂志》期刊2018年06期）
岳晓平,陈朋,朱玥明,曾艳,刘汉民[6]（2019）在《米曲霉酸性蛋白酶基因在毕赤酵母中的异源表达及酶学性质》一文中研究指出酸性蛋白酶作为一类重要的天冬氨酸蛋白酶,被广泛应用于食品、医药和皮革等领域。为推动酸性蛋白酶的研究及应用,通过对发酵豆制品样品进行宏基因组测序,从中获得米曲霉酸性蛋白酶基因pepA,在毕赤酵母GS115中进行异源表达,并对重组酶PepA进行酶学性质分析。结果显示毕赤酵母发酵上清液中酸性蛋白酶的活性为50.62 U/mL。SDS-PAGE验证PepA的分子量约为50 kDa,且发酵上清液几乎无杂蛋白。PepA的最适pH值为4.5,最适温度为50℃,Mn~(2+)和Cu~(2+)对其具有激活作用,而Fe~(3+)、Fe~(2+)与Ca~(2+)则具有抑制作用。上述研究结果可为米曲霉酸性蛋白酶的异源表达及其相关工业应用提供指导。(本文来源于《生物工程学报》期刊2019年03期）
于源,牟海津[7]（2018）在《κ-卡拉胶酶在毕赤酵母(Pichia pastoris)中的异源表达研究》一文中研究指出为提升来源于Zobellia sp.ZM-2菌株的κ-卡拉胶酶的酶活力与功能,本文通过毕赤酵母表达系统对κ-卡拉胶酶目的基因cgkZ进行表达。设计并表达截除C-分泌末端结构域(Pst)的截短基因cgkZ△PSt与截除酶与底物结合域(CBM)的cgkZ△CBM;在含截短卡拉胶酶基因cgkZ△Pst的重组酵母菌株基础上,通过联合使用诱导型启动子AOX1与组成型启动子GAP,使卡拉胶酶表达水平得以提升。根据重组菌株培养条件的优化的结果,选取22℃,pH6.0,诱导剂甲醇添加量1%(v/v)的条件摇瓶培养96 h。重组菌株发酵期间,截短基因cgkZ△Pst与cgkZ△CBM的转录水平显着高于原目的基因cgkZ;重组酶cgkZ、cgkZ△PSt与cgkZ△CBM的酶活力分别为4.68、5.70和3.02 U/mL,分子量分别为65,45和40 kDa左右,K_m值分别为2.07、1.85和1.04 mg/mL,重组酶酶解终产物以κ-新卡四糖与六糖为主。联合使用诱导型启动子AOX1与组成型启动子GAP,使得目的基因cgkZ△Pst在无甲醇诱导的条件下得到表达,在22℃下摇瓶培养酶活力为2.73 U/mL。(本文来源于《中国食品科学技术学会第十五届年会论文摘要集》期刊2018-11-07）
刘云云,杨波,张灏,陈永泉,陈卫[8]（2018）在《共轭亚油酸合成相关基因在耶氏解脂酵母中异源表达及活性研究》一文中研究指出为了探究植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)中与共轭亚油酸(CLA)生物合成相关的3个基因:(亚)油酸水合酶基因(mcra)、短链脱氢酶/氧化还原酶基因(dh)、乙酰乙酸脱羧酶基因(dc)在耶氏解脂酵母(Yarrowia lipolytica,Y.lipolytica)中异源表达后能否具有活性,利用两个耶氏解脂酵母整合表达质粒(p INA 1269和p INA 1312),将3个基因分别导入耶氏解脂酵母营养缺陷型宿主菌Polf(Ura~-,Leu~-)中,构建了重组菌株。在不同重组菌中添加相应的底物:亚油酸(LA)和10-羟基-顺12-十八碳烯酸(10-HOE),然后对反应体系进行脂肪酸检测,得到基因对应的不同产物:10-HOE和10-氧代-反11-十八碳烯酸(10-oxo-trans 11-octadecenoic acid),证明mcra、dh、dc在耶氏解脂酵母中进行了异源表达并且具有活性。(本文来源于《中国油脂》期刊2018年09期）
扎木苏,杨华青,王鑫,孙宝国,王成涛[9]（2019）在《酿酒酵母胱硫醚β-裂解酶的异源表达及催化生成糠硫醇》一文中研究指出为明晰糠硫醇生物转化机制,将来源于酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)G20的胱硫醚β-裂解酶(cystathionineβ-lyase,Str3p)在大肠杆菌(Escherichia coli)中实现异源表达,并验证其催化性质。正交设计试验优化大肠杆菌基因工程菌蛋白表达的诱导条件,其最适诱导表达条件为诱导温度20℃、异丙基硫代半乳糖苷浓度0.5 mmol/L、诱导时间13 h。该条件下获得的菌体经超声破碎和镍柱亲和层析,纯化得到的可溶性Str3p分子质量约为52 kDa,其表达量达1.26 mg/mL,较优化前的表达量和酶活力分别提高41.7%和38.6%。实验发现Str3p能够催化裂解半胱氨酸-糠醛加合物生成糠硫醇,且催化过程受pH值影响较大,在pH 8.0时糠硫醇产量达到47μmol/L。本研究确定Str3p在E.coli BL21中的异源表达及催化特性,为生物转化合成天然糠硫醇提供新的参考途径。(本文来源于《食品科学》期刊2019年06期）
李庆猛,李盛陶,王宁,高晓冬[10]（2018）在《酵母来源α-1,2甘露糖转移酶Alg11的异源表达、纯化和活性分析》一文中研究指出糖基转移酶Alg11作为N-糖基化途径中一个重要蛋白,功能为催化将甘露糖转移到底物DPGn_2M_3(Dolichyl-pyrophosphate-Glc NAc_2Mannose_3)上进而生成DPGn_2M_4和DPGn_2M_5这两种多萜醇寡糖前体的反应。在本研究中,首先通过对酿酒酵母Alg11的蛋白质结构进行分析,设计了去除跨膜域的蛋白Alg11_(45-548)并成功在大肠杆菌中表达,进而对诱导时间、诱导剂浓度进行了产量最大化的优化,最终得到了纯化蛋白。以PPGn_2(Phytanyl-pyrophosphate-Glc NAc_2)为底物,利用体外表达的重组蛋白Alg1ΔTM和Trx-Alg2以酶法合成出Alg11的天然底物类似物PPGn_2M_3。用纯化的Alg11_(45-548)蛋白催化转糖基反应,并通过液质联用(LC-MS)的方法检测产物,证实Alg11_(45-548)蛋白具有催化PPGn_2M_3生成PPGn_2M_4和PPGn_2M_5的糖基转移酶活性。产物PPGn_2M_5通过不同的甘露糖苷酶酶切反应,验证了两个新加上的甘露糖以α-1,2糖苷键的形式连接到底物PPGn_2M_3上。底物特异性实验表明Alg11_(45-548)可以特异性识别底物PPGn_2M_3,而其他N-糖基化中间体类似物如PPGn_2和PPGn_2M_1无法被识别,且底物中的脂肪链结构也对酶的识别具有重要作用。Alg11的底物特异性保证了多萜醇寡糖前体的有序合成,具有重要的生理意义。(本文来源于《中国生物工程杂志》期刊2018年06期）
酵母异源表达论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
南极假丝酵母脂肪酶B(Candida antarctica lipase B, CALB)是一种重要的工业酶,与其他脂肪酶相比有诸多优点,在很多合成反应中都表现出特异性和较强的催化活性,比如水解、酯化、转酯反应、有机合成以及手性催化反应等,因此被广泛应用于食品、化妆品、制药等领域。其天然宿主南极假丝酵母CALB产量低,因此,研究CALB的异源表达有重要的意义。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
酵母异源表达论文参考文献
[1].姚昌阳,谢兴欢,蒋思婧,马立新,康立新.裂解多糖单加氧酶在毕赤酵母中的异源表达[J].湖北大学学报(自然科学版).2019
[2].吴蓉,杨猛,苏二正.南极假丝酵母脂肪酶B在大肠杆菌中的异源表达及其发酵优化[C].第十二届中国酶工程学术研讨会论文摘要集.2019
[3].杨正凤,吴倩,丁俊美,李俊俊,慕跃林.康宁木霉菌来源的中性蛋白酶基因在毕赤酵母中的异源表达、酶学性质研究及分子改造[C].第十二届中国酶工程学术研讨会论文摘要集.2019
[4].田思琪,乔坤,王凡红,梁爽,王红.OsPDR在酵母中异源表达增强了酵母对钴的耐受性（英文）[J].生物化学与生物物理进展.2018
[5].张晓伟,郭敏瑞,郭慧静,陈国刚.异源表达海苏特氏菌Argonaute蛋白基因提高酿酒酵母脂肪酸含量研究[J].微生物学杂志.2018
[6].岳晓平,陈朋,朱玥明,曾艳,刘汉民.米曲霉酸性蛋白酶基因在毕赤酵母中的异源表达及酶学性质[J].生物工程学报.2019
[7].于源,牟海津.κ-卡拉胶酶在毕赤酵母(Pichiapastoris)中的异源表达研究[C].中国食品科学技术学会第十五届年会论文摘要集.2018
[8].刘云云,杨波,张灏,陈永泉,陈卫.共轭亚油酸合成相关基因在耶氏解脂酵母中异源表达及活性研究[J].中国油脂.2018
[9].扎木苏,杨华青,王鑫,孙宝国,王成涛.酿酒酵母胱硫醚β-裂解酶的异源表达及催化生成糠硫醇[J].食品科学.2019
[10].李庆猛,李盛陶,王宁,高晓冬.酵母来源α-1,2甘露糖转移酶Alg11的异源表达、纯化和活性分析[J].中国生物工程杂志.2018