大青叶中生物碱4（3H）喹唑酮的提取和纯化工艺研究

论文摘要

大青叶是我国的传统中药,其性苦、味寒,具清热解毒、凉血消斑之功效,常用于治疗高热烦渴、神昏、吐血、黄疽等温热症。4(3H)喹唑酮是大青叶中有效成分,药理研究表明其具有抗菌、抗病毒、抗高血压、抗高血脂、抗高胆固醇等药理活性。目前有关大青叶中4(3H)喹唑酮的分离和制备的研究较少,本文主要对大青叶中生物碱4(3H)喹唑酮的提取工艺的优化和分离纯化进行研究,为4(3H)喹唑酮的进一步研究奠定了基础。试验结果表明:1.以4(3H)喹唑酮含量为指标,采用正交实验方法,以药材粒度、提取溶剂、提取时间、溶剂倍量等为提取因素,分别进行渗漉提取、热回流提取、超声波提取和微波提取工艺研究,并找出每种提取工艺的最佳条件。其中渗漉提取试验一最佳条件组合是50%乙醇、浸泡24h、渗漉倍量8倍、渗漉速度为2ml/min;渗漉提取试验二最佳条件组合是纯甲醇、浸泡12h、渗漉倍量16倍、渗漉速度为4ml/min。热回流提取试验一最佳条件组合是药材粒度60目、70%乙醇、热回流时间1h、8倍量溶剂为优;热回流提取试验二最佳条件组合是药材粒度60目、纯甲醇、热回流时间3h、8倍量溶剂为优。超声提取试验一最佳条件组合是药材粒度80目、70%乙醇、超声时间20min、9倍量溶剂为优;超声提取提取试验二最佳条件组合是药材粒度60目、纯甲醇、超声时间40min、9倍量溶剂为优。微波提取试验一最佳条件组合是药材粒度40目、50%乙醇、微波辐射时间10min、10倍量溶剂为优;微波提取提取试验二最佳条件组合是药材粒度20目、纯甲醇、微波辐射时间5min、20倍量溶剂为优。综合以上四种提取工艺,其中热回流提取实验二对4(3H)喹唑酮的提取率最高。即药材粒度60目、纯甲醇、热回流时间3h、8倍量溶剂提取为优。由于甲醇的毒性较大,只适宜在实验室进行少量提取,因此参考其正交试验直观分析结果,建议使用纯乙醇进行提取。2.有机溶剂萃取法分离大青叶中4(3H)喹唑酮,其中提取液的调酸和调碱对4(3H)喹唑酮萃取有很大的影响。调酸试验中,当pH值为1时萃取的效果最好;在调碱试验中,当pH值为9时萃取效果最好。在最佳的酸碱条件下,对4(3H)喹唑酮进行分离提取,得出4(3H)喹唑酮在制得浸膏中的含量为3.52%。3.采用硅胶柱色谱对大青叶中4(3H)喹唑酮进行分离纯化得到单体,经红外光谱、质谱和核磁共振等方法进行结构鉴定,确认为4(3H)喹唑酮。经HPLC测定其含量为95.7%。

论文目录

• 摘要
• SUMMARY
• 第一部分 文献综述
• 前言
• 1 大青叶的化学成分及相关的药理活性
• 1.1 吲哚类生物碱
• 1.2 喹唑酮类生物碱
• 1.3 有机酸类
• 1.4 苷类
• 1.5 无机元素
• 1.6 其他
• 2 大青叶的药理作用
• 2.1 抗菌作用
• 2.2 抗病毒作用
• 2.3 抗内毒素活性
• 2.4 对免疫系统的作用
• 2.5 抗肿瘤作用
• 2.6 其他作用
• 3 大青叶中4（3H）喹唑酮的研究概述
• 4 中药中生物碱的提取和纯化研究概述
• 4.1 生物碱概述
• 4.1.1 概念
• 4.1.2 生物碱的理化性质
• 4.1.3 生物碱的分类
• 4.2 中药有效成分提取原理及影响因素
• 4.2.1 中药有效成分提取原理
• 4.2.2 中药有效成分提取过程的影响因素
• 4.3 中药中生物碱提取研究现状
• 4.3.1 按所用溶剂不同分类
• 4.3.2 按提取条件不同分类
• 4.4 中药中生物碱的分离纯化方法
• 4.4.1 有机溶剂萃取
• 4.4.2 色谱法
• 4.5 结束语
• 第二部分 试验部分
• 第一章 生物碱4（3H）喹唑酮的提取工艺研究
• 1 材料
• 1.1 仪器与设备
• 1.2 试剂与药品
• 2 方法
• 2.1 4（3H）喹唑酮的含量测定
• 2.1.1 吸收波长测定
• 2.1.2 色谱条件
• 2.1.3 对照品溶液的制备
• 2.1.4 标准曲线的制作
• 2.1.5 精密度试验
• 2.1.6 稳定性试验
• 2.1.7 供试品溶液的制备
• 2.1.8 加样回收率试验
• 2.2 渗漉提取工艺
• 2.2.1 含量测定
• 2.2.2 加样回收率试验
• 2.2.3 渗漉提取试验一
• 2.2.4 渗漉提取试验二
• 2.2.5 结果分析
• 2.3 热回流提取工艺
• 2.3.1 含量测定
• 2.3.2 加样回收率试验
• 2.3.3 热回流提取试验一
• 2.3.4 热回流提取试验二
• 2.3.5 结果分析
• 2.4 超声提取工艺
• 2.4.1 含量测定
• 2.4.2 加样回收率试验
• 2.4.3 超声提取试验一
• 2.4.4 超声提取试验二
• 2.4.5 结果分析
• 2.5 微波提取工艺
• 2.5.1 含量测定
• 2.5.2 加样回收率试验
• 2.5.3 微波提取试验一
• 2.5.4 微波提取试验二
• 2.5.5 结果分析
• 3 讨论
• 3.1 提取因素的影响
• 3.2 四种提取工艺的提取结果比较
• 3.2.1 四种不同浓度乙醇为提取溶剂提取效果比较
• 3.2.2 纯甲醇、纯乙醇和0.896的酸水为提取溶剂提取效果比较
• 第二章 生物碱4（3H）喹唑酮的分离和纯化
• 1 材料
• 1.1 仪器与设备
• 1.2 试剂与药材
• 2 方法
• 2.1 4（3H）喹唑酮的萃取
• 2.1.1 标准曲线的制作
• 2.1.2 提取液调酸处理
• 2.1.3 提取液调碱处理
• 2.1.4 结果分析
• 2.2 4（3H）喹唑酮的分离和纯化
• 2.2.1 薄层硅胶板制备
• 2.2.2 分离和纯化
• 2.2.3 结果分析
• 3 讨论
• 3.1 4（3H）喹唑酮的萃取
• 3.2 4（3H）喹唑酮的纯化
• 结论
• 致谢
• 参考文献
• 个人简介
• 导师简介