黄粉虫蛋白分类提取水解纯化及其抗氧化活性研究

论文摘要

黄粉虫幼虫蛋白质含量丰富,是制备昆虫生物活性肽的有效资源之一。本研究以黄粉虫幼虫为材料,从黄粉虫幼虫中分离出4种蛋白,对获得的黄粉虫水溶蛋白和碱溶蛋白,分别进行了双酶水解工艺条件优化,并比较了两种多肽的抗氧化活性等。本研究为黄粉虫蛋白的充分利用提供了依据,提高黄粉虫的经济价值。主要结果如下:（1）黄粉虫幼虫脱脂干粉中水溶蛋白、碱溶蛋白、酸溶性蛋白和醇溶性蛋白所占比例分别为42.60%、16.33%、1.65%和1.33%。（2）双酶水解水溶蛋白的最佳工艺条件为:料液比1∶20、水解时间2h、加酶量17.36 mg/g（碱性蛋白酶和胰蛋白酶酶活比为1∶1）、pH8.0、温度46.5℃。在优化条件下制得的水解液·OH清除率为86.21%。（3）碱溶蛋白双酶水解的最佳工艺条件为:料液比1∶20、水解时间1.9h、加酶量10mg/g（碱性蛋白酶和胰蛋白酶酶活比为1∶1）、pH7.2、温度47.8℃。在优化条件下制得的水解液·OH清除率为55.38%。（4）通过Sephadex G-25葡聚糖凝胶色谱,水溶蛋白多肽被分离成3个组分,峰S2的·OH清除率高达64.26%;利用DEAE Sepharose F.F.离子交换层析将峰S2分离成4个部分,多肽组分S2-1和S2-2的·OH清除率较高,分别为78.44%、45.39%;碱溶蛋白多肽被Sephadex G-25凝胶过滤色谱分离成4个组分,其中峰J3的·OH清除率达40.55%;利用DEAE Sepharose F.F.将峰J3分离成4个部分,多肽组分J3-2的·OH清除率最强,为47.02%。（5）对分离纯化后的各抗氧化肽进行氨基酸成分测定可知,黄粉虫的水溶蛋白制得的抗氧化肽S2-1中主要的氨基酸为Ala、Pro、Leu、Glu、Val、Gly、Ile、Ser;S2-2中主要的氨基酸为Glu、Asp、Pro;碱溶蛋白制得的抗氧化肽J3-2中主要的氨基酸为Glu、Asp、Pro、Gly。

论文目录

• 摘要
• ABSTRACT
• 第一章 文献综述
• 1.1 黄粉虫概述
• 1.1.1 黄粉虫营养价值
• 1.1.2 黄粉虫功能性及食用安全性
• 1.1.3 黄粉虫食品的开发
• 1.2 蛋白质提取分离方法
• 1.2.1 植物性食品的蛋白质提取分离
• 1.2.2 动物性食品的蛋白质提取分离
• 1.2.3 昆虫蛋白质提取分离
• 1.3 生物活性肽
• 1.3.1 生物活性肽及其分类
• 1.3.2 生物活性肽的制备方法
• 1.3.3 生物活性肽的分离纯化方法
• 1.3.4 生物活性肽在食品工业的应用
• 1.4 研究目的意义与技术路线
• 1.4.1 研究的目的及意义
• 1.4.2 技术路线和主要研究内容
• 第二章 黄粉虫蛋白的分类提取及水溶蛋白水解工艺优化和活性研究
• 2.1 材料与方法
• 2.1.1 材料
• 2.1.2 试验方法
• 2.2 结果与分析
• 2.2.1 黄粉虫幼虫蛋白质分类提取
• 2.2.2 水溶蛋白水解单因素试验
• 2.2.3 二次正交旋转组合试验
• 2.2.4 黄粉虫水溶蛋白多肽的抗氧化活性
• 2.3 小结
• 第三章 碱溶蛋白水解工艺优化及多肽活性
• 3.1 材料与方法
• 3.1.1 材料
• 3.1.2 试验方法
• 3.2 结果与分析
• 3.2.1 碱溶蛋白水解单因素试验
• 3.2.2 中心组合试验
• 3.2.3 黄粉虫碱溶蛋白多肽的抗氧化活性
• 3.3 小结
• 第四章 水溶蛋白抗氧化肽及碱溶蛋白抗氧化肽的分离纯化
• 4.1 材料与方法
• 4.1.1 试验材料
• 4.1.2 主要仪器设备
• 4.1.3 试验方法
• 4.2 结果与分析
• 4.2.1 黄粉虫水溶蛋白制备多肽的分离与纯化
• 4.2.2 黄粉虫碱溶蛋白制备多肽的分离与纯化
• 4.2.3 黄粉虫抗氧化肽的氨基酸组成
• 4.3 小结
• 第五章 结论与讨论
• 5.1 结论
• 5.2 讨论
• 参考文献
• 致谢
• 作者简介