绵羊生长及肌内脂肪部分相关基因表达的发育性变化研究

论文摘要

为了给绵羊生长及肌内脂肪的研究提供基础资料，本文以2～120日龄的雄性哈萨克羊和新疆细毛羊(120日龄的只有新疆细毛羊)为试验对象，探讨了生长和肌内脂肪部分相关基因表达的发育规律和特点。本研究主要测定了两品种绵羊的累积生长曲线；用索氏抽提法测定肌内脂肪含量；以GAPDH基因为内标，用real time PCR法对影响生长和肌内脂肪含量的部分相关基因的表达进行了相对定量分析；并对各基因表达的相关性，基因表达与生长及肌内脂肪含量的相关性进行了分析。研究结果如下： 1．绵羊ghrelin及其受体基因表达的发育性变化 (1)哈萨克羊早期生长发育比新疆细毛羊快；(2)哈萨克羊的下丘脑、垂体、心脏、肝脏、瘤胃、网胃、瓣胃、皱胃、十二指肠和肌肉中均有ghrelin mRNA分布，但在皱胃中的表达量远远高于其他组织(P＜0.01)；(3)绵羊皱胃ghrelin mRNA的表达量随着日龄的增加而呈上升趋势，与其累积生长曲线呈正相关。哈萨克羊皱胃ghrelin mRNA的表达量在各日龄都极显著高于新疆细毛羊(P＜0.01)。结果表明ghrelin基因可能与绵羊的生长发育密切相关；(4)绵羊下丘脑GHSR mRNA的表达量随着日龄的增加而呈先升后降的趋势。哈萨克羊下丘脑GHSR mRNA的表达量在2～30日龄期间略高于新疆细毛羊，在60～90日龄期间极显著高于后者(P＜0.01)；(5)绵羊垂体GHSR mRNA的表达量随着日龄的增加而呈上升趋势，与绵羊皱胃ghrelin mRNA的表达及累积生长曲线呈正相关，哈萨克羊垂体GHSR mRNA的表达量在2～90日龄期间极显著高于新疆细毛羊(P＜0.01)，提示ghrelin可能主要通过垂体而非下丘脑的GHSR来影响绵羊的生长发育。 2．绵羊下丘脑GHRH和SS基因表达的发育性变化 (1)绵羊下丘脑GHRH mRNA的表达量在90日龄前持续上升，新疆细毛羊的表达量在90日龄后开始回落；哈萨克羊下丘脑GHRH mRNA的表达量在2日龄时显著低于新疆细毛羊(P＜0.01)，30～90日龄期间都极显著高于新疆细毛羊(P＜0.01)，

论文目录

• 缩略语中英文对照
• 摘要
• 引言
• 第一部分 文献综述
• 第一章 ghrelin基因研究进展
• 1 ghrelin的结构
• 2 ghrelin的组织分布
• 3 ghrelin的调控
• 3.1 禁食和摄食
• 3.2 食物成分
• 3.3 Leptin
• 3.4 内脏激素
• 3.5 其它激素
• 4 GHSR
• 4.1 GHSR的结构与分布
• 4.2 GHSR的信号转导作用
• 5 ghrelin的作用
• 5.1 与垂体释放GH的相关作用
• 5.2 影响摄食,调节能量代谢
• 5.3 对胃肠的作用
• 5.4 对心血管系统的影响
• 5.5 对细胞增殖的作用
• 5.6 其它作用
• 6 ghrelin基因
• 7 小结
• 第二章 动物部分生长轴基因研究进展
• 1 动物生长轴
• 2 GHRH和GHRHR基因
• 2.1 GHRH基因
• 2.2 GHRHR基因
• 3 SS和SSR基因
• 3.1 SS基因
• 3.2 SSR基因
• 4 GH、GHBP和GHR基因
• 4.1 GH基因
• 4.2 GHBP基因
• 4.3 GHR基因
• 5 IGF、IGFBP和IGFR基因
• 5.1 IGF基因
• 5.2 IGFBP基因
• 5.3 IGFR基因
• 第三章 畜禽脂肪性状部分相关基因研究进展
• 1 肥胖基因及其受体的相关研究
• 1.1 肥胖基因及其表达产物
• 1.2 肥胖受体基因
• 2 脂肪酸结合蛋白基因的研究进展
• 2.1 H-FABP基因
• 2.2 A-FABP基因
• 3 脂蛋白脂酶基因和激素敏感脂酶基因
• 3.1 脂蛋白脂酶基因
• 3.2 激素敏感脂肪酶
• 4 过氧化物酶体增殖物激活受体基因
• 4.1 PPARα基因
• 4.2 PPARγ基因
• 5 黑素皮质素受体基因
• 5.1 MC3R基因
• 5.2 MC4R基因
• 6 解偶联蛋白基因
• 第四章 real time PCR
• 1 原理
• 1.1 Real time PCR
• 1.2 Real time PCR的化学基础
• 2 定量方法
• -ΔΔCT法'>2.1 2^-ΔΔCT法
• 2.2 标准曲线法
• 第二部分 绵羊部分生长相关基因表达的发育性变化
• 第五章 绵羊ghrelin及其受体基因表达的发育性变化
• 1 材料与方法
• 1.1 实验动物
• 1.2 主要试剂和仪器
• 1.3 引物设计与合成
• 1.4 RNA提取
• 1.5 反转录
• 1.6 PCR反应
• 1.7 PCR产物回收及克隆测序
• 1.8 real time PCR
• 1.9 数据分析
• 2 结果与分析
• 2.1 绵羊的累积生长曲线
• 2.2 各组织总RNA电泳结果
• 2.3 ghrelin、GHSR和GAPDH基因的RT-PCR扩增及克隆质粒测序结果
• 2.4 ghrelin mRNA表达的组织分布
• 2.5 皱胃ghrelin mRNA表达的发育性变化
• 2.6 下丘脑GHSR mRNA表达的发育性变化
• 2.7 垂体GHSR mRNA表达的发育性变化
• 3 讨论与小结
• 3.1 绵羊的早期生长发育
• 3.2 ghrelin mRNA表达的组织分布
• 3.3 皱胃ghrelin mRNA表达的发育性变化
• 3.4 下丘脑和垂体GHSR mRNA表达的发育性变化
• 3.5 小结
• 第六章 绵羊下丘脑GHRH和SS基因表达的发育性变化
• 1 材料与方法
• 1.1 实验动物
• 1.2 主要试剂和仪器
• 1.3 引物设计与合成
• 1.4 real time PCR检测GHRH和SS mRNA丰度
• 2 结果与分析
• 2.1 GHRH和SS基因的RT-PCR扩增结果和克隆质粒测序结果
• 2.2 下丘脑GHRH mRNA表达的发育性变化
• 2.3 下丘脑SS mRNA表达的发育性变化
• 3 讨论与小结
• 3.1 下丘脑GHRH mRNA表达的发育性变化
• 3.2 下丘脑SS mRNA表达的发育性变化
• 3.3 小结
• 第七章 绵羊垂体GH基因表达的发育性变化
• 1 材料与方法
• 1.1 实验动物
• 1.2 主要试剂和仪器
• 1.3 引物设计与合成
• 1.4 real time PCR检测GH mRNA丰度
• 2 结果与分析
• 2.1 GH基因的RT-PCR扩增结果和克隆质粒测序结果
• 2.2 垂体GH mRNA表达的发育性变化
• 3 讨论与小结
• 3.1 垂体GH mRNA表达的发育性变化
• 3.2 小结
• 第八章 绵羊肝脏GHR、IGF-1和IGF-1R基因表达的发育性变化
• 1 材料与方法
• 1.1 实验动物
• 1.2 主要试剂和仪器
• 1.3 引物设计与合成
• 1.4 real time PCR检测GHR、IGF-1和IGF-1R mRNA丰度
• 2 结果与分析
• 2.1 GHR、IGF-1和IGF-1R基因RT-PCR扩增结果和克隆质粒测序结果
• 2.2 肝脏GHR mRNA表达的发育性变化
• 2.3 肝脏IGF-1 mRNA表达的发育性变化
• 2.4 肝脏IGF-1R mRNA表达的发育性变化
• 3 讨论与小结
• 3.1 肝脏GHR mRNA表达的发育性变化
• 3.2 肝脏IGF-1 mRNA表达的发育性变化
• 3.3 肝脏IGF-1R mRNA表达的发育性变化
• 3.4 小结
• 第九章 绵羊肌肉GHR、IGF-1和IGF-1R基因表达的发育性变化
• 1 材料与方法
• 1.1 实验动物
• 1.2 主要试剂和仪器
• 1.3 real time PCR检测GHR、IGF-1和IGF-1R丰度
• 2 结果与分析
• 2.1 肌肉GHR mRNA表达的发育性变化
• 2.2 肌肉IGF-1 mRNA表达的发育性变化
• 2.3 肌肉IGF-1R mRNA表达的发育性变化
• 3 讨论与小结
• 3.1 肌肉GHR mRNA表达的发育性变化
• 3.2 肌肉IGF-1 mRNA表达的发育性变化
• 3.3 肌肉IGF-1R mRNA表达的发育性变化
• 3.4 小结
• 第十章 绵羊下丘脑GHR基因和垂体IGF-1R基因表达的发育性变化
• 1 材料与方法
• 1.1 实验动物
• 1.2 主要试剂和仪器
• 1.3 real time PCR检测GHR和IGF-1R mRNA丰度
• 2 结果与分析
• 2.1 下丘脑GHR mRNA表达的发育性变化
• 2.2 垂体IGF-1R mRNA表达的发育性变化
• 3 讨论与小结
• 3.1 下丘脑GHR mRNA表达的发育性变化
• 3.2 垂体IGF-1R基因表达的发育性变化
• 3.3 小结
• 第三部分 绵羊IMF部分相关基因表达的发育性变化
• 第十一章 绵羊肌肉H-FABP和PPARγ基因表达的发育性变化及其对肌内脂肪含量的影响
• 1 材料与方法
• 1.1 实验动物
• 1.2 主要试剂和仪器
• 1.3 IMF含量测定
• 1.4 引物设计与合成
• 1.5 real time PCR检测H-FABP和PPARγ mRNA丰度
• 2 结果与分析
• 2.1 绵羊肌肉IMF含量
• 2.2 绵羊H-FABP和PPARγ基因RT-PCR扩增结果及克隆质粒测序结果
• 2.3 绵羊肌肉H-FABP mRNA表达的发育性变化
• 2.4 绵羊肌肉PPARγ mRNA表达的发育性变化
• 2.5 哈萨克羊肌肉H-FABP和PPARγ mRNA表达与IMF含量的相关分析
• 3 讨论与小结
• 3.1 绵羊肌肉IMF含量
• 3.2 绵羊肌肉H-FABP mRNA表达的发育性变化
• 3.3 绵羊肌肉PPARγ mRNA表达的发育性变化
• 3.4 小结
• 结论
• 创新点
• 参考文献
• 附录
• 附录1：各基因扩增片断序列克隆质粒测序结果
• 附录2：各基因扩增片断序列与引物设计源序列的比对
• 攻读博士学位期间发表的论文著作
• 致谢