椿叶花椒组织培养与植株再生技术研究

论文摘要

本试验以椿叶花椒实生苗幼苗的根、茎、叶及一年生带腋芽的茎段为外植体材料进行组织培养植株再生技术研究,通过正交实验设计及统计分析方法,确定植株再生的可能途径及适宜的培养条件,筛选出各阶段的适宜培养基,以期建立椿叶花椒组织培养的技术体系,并通过显微结构观察来探索组培苗不定根的起源机理。结果表明：1.以实生苗幼苗（根、茎、叶）为外植体诱导愈伤组织,由于其组织太嫩加上消毒过程中升汞的药害作用,导致外植体没有愈伤组织的发生最后以死亡告终,试验宣告失败；以一年生带腋芽的茎段诱导愈伤组织则获得成功。2.初代培养以带腋芽的茎段为外植体,能诱导大量不定芽萌发。消毒剂选用70%酒精+0.1%升汞,消毒时间为酒精30秒,升汞6分钟,无菌外植体获得率为50%。适宜的培养基为：WPM+6-BA2.5 mg/L+NAA2.0mg/L+IBAO.5mg/L；愈伤组织诱导的适宜培养基为：WPM+6-BA2.5mg/L+NAA 1.0mg/L.3.增殖培养阶段：通过L9（33）正交及单因子实验,得出适于诱导椿叶花椒芽的增殖培养基为：WPM+6-BA0.2 mg/L+IBA 0.1 mg/L+NAA0.1 mg/L,增殖系数为5.6,增殖芽平均高达5.5cm；愈伤组织增殖培养的最适培养基为WPM+6-BA1.0 mg/L+IBA0.5mg/L+NAA0.1mg/L.BA为椿叶花椒增殖培养的主要影响因素。4.生根培养阶段：通过L9（33）正交及单因子实验,得出适于生根培养基为：1/4MS+IBA0.5mg/L,生根率达95%,平均生根数4.6条,平均根长为4.0cm。生长素是生根培养的必需成分,活性炭对生根无明显的影响。5.移栽炼苗阶段：椿叶花椒的组培苗移栽以疏松且保水的圃地表土为基质最好,且生长状况良好,成活率达96%。6.通过石蜡切片对显微结构进行观察,椿叶花椒组培苗萌发的不定根发生于中柱鞘细胞,为内起源。

论文目录

• 摘要
• ABSTRACT
• 缩略词
• 1 文献综述
• 1.1 组织培养技术及其原理
• 1.2 植物组织培养在林木遗传育种中的应用
• 1.2.1 林木品种改良及良种繁育
• 1.2.2 种苗的快繁和脱毒
• 1.2.3 种质资源的保存
• 1.2.4 次生代谢物的生产
• 1.2.5 组培快繁的优点
• 1.3 椿叶花椒研究现状
• 1.3.1 椿叶花椒生物学特性
• 1.3.2 国外花椒研究简介
• 1.3.3 国内花椒研究简介
• 1.3.4 影响花椒属树种组织培养植株再生的因素
• 1.4 本研究的目的和意义
• 2 材料与方法
• 2.1 材料来源
• 2.2 试验条件
• 2.3 研究路线
• 2.4 试验方案
• 2.4.1 材料的准备和灭菌处理
• 2.4.2 基本培养基的选择
• 2.4.3 初代培养
• 2.4.4 继代培养
• 2.4.5 壮苗培养
• 2.4.6 生根培养
• 2.4.7 炼苗与移栽
• 2.4.8 数据统计分析方法
• 2.4.9 椿叶花椒试管苗生根的组织学观察
• 3 结果与分析
• 3.1 外植体的选择和消毒时间的筛选
• 3.2 基本培养基的选择
• 3.3 初代培养
• 3.3.1 椿叶花椒茎段诱导芽形成结果
• 3.3.2 椿叶花椒茎段初代培养中愈伤组织的发生
• 3.3.3 实生苗幼苗为外植体诱导愈伤组织形成结果
• 3.4 继代培养
• 3.4.1 不同激素浓度组合对不定芽增殖系数的影响
• 3.4.2 不同激素浓度组合对增殖芽高生长的影响
• 3.4.3 不同激素浓度组合对愈伤组织增殖生长及分化的影响
• 3.4.4 增殖最佳培养基的选择
• 3.5 壮苗培养
• 3.6 生根培养
• 3.6.1 不同组合对椿叶花椒生根的影响
• 3.6.2 生根最佳培养基的选择
• 3.7 炼苗及移栽
• 3.8 不定根组织学观察
• 4 结论与讨论
• 4.1 结论
• 4.2 讨论
• 4.2.1 外植体取材的影响
• 4.2.2 外植体消毒与污染
• 4.2.3 褐化现象的产生和控制
• 4.2.4 玻璃苗的产生及对策
• 4.2.5 植物生长调节剂的影响
• 4.2.6 炼苗及移栽
• 5.对下一步研究工作的建议
• 6.创新点
• 图版
• 参考文献
• 附录A
• 附录B
• 致谢