论文摘要
目的:观察不同浓度孕酮(P)对小鼠生发泡(GV)期卵母细胞体外成熟的影响。观察不同浓度反义c-myb ODN(c-myb ASODN)对小鼠GV 期卵母细胞体外成熟的影响;在适宜浓度孕酮存在下,将小鼠GV 期卵母细胞或/和反义c-myb ODN、或/和二丁酰环腺苷酸(dbcAMP)、或/和维拉帕米(Verapamil)、或/和肝素钠(Heparin)共同孵育24h,观察卵母细胞体外成熟的情况并分析它们之间的相互关系。通过实验资料的分析获得卵巢功能调控的新知识、新资料,为开辟新的促生育和抗生育途径提供新的方法。方法:用外源性孕马血清促性腺激素(PMSG)诱导昆明小鼠超排卵,48h 后断头处死,取出双侧卵巢,在解剖显微镜下用4 号针划破卵泡,然后用口吸管将卵丘-卵母细胞复合体(COC)吹散,收集裸卵(DO)。在M199 培养液(Medium 199)中添加P、或/和反义c-myb ODN、或/和dbcAMP、或/和Verapamil、或/和肝素钠,观察卵母细胞体外成熟的情况。结果:(1)在M199 培养液分别添加0、5、10、20μmol/L 的孕酮培养GV 期小鼠卵母细胞(裸卵)24h。5、10、20μmol/L 的孕酮均能够促进GV 期小鼠卵母细胞体外成熟,10μmol/L孕酮组与5μmol/L孕酮组比较有显著性差别,与20μmol/L孕酮组比较无显著性差别。观察孕酮促卵母细胞成熟的时效关系时发现,各孕酮组均于2h 开始显著促进生发泡破裂(GVBD),随着时间的延长,这种促进作用一直持续。各孕酮组均于8h 开始显著促进第一极体(PBI)排出,随着时间的延长,这种促进作用一直持续。(2)在M199 培养液分别添加0、4、8、16μmol/L的反义c-myb ODN 培养GV 期小鼠卵母细胞(裸卵)24h。反义c-myb ODN 对GV期小鼠卵母细胞体外成熟的抑制作用呈剂量依赖关系。8、16μmol/L 的反义c-myb ODN 可显著抑制GV 期小鼠卵母细胞体外成熟。观察反义c-myb ODN 抑制
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